紫參膠囊稠膏不同干燥方法的優(yōu)選

劉曉闖，張艷艷，高家榮*，段賢春，陳 浩，韓燕全

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，國家中醫(yī)藥管理局中藥制劑三級實驗室，安徽合肥 230031;2.安徽醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，安徽合肥 230601)

紫參膠囊由紫河車、太子參、白芍、酸棗仁等十味中藥組成，具有溫腎填精、雙調(diào)陰陽的作用，主要用于治療圍絕經(jīng)期綜合征、閉經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)［1］。原制劑生產(chǎn)工藝采用熱風(fēng)真空干燥法干燥稠膏，所得干浸膏有糊化現(xiàn)象，且有焦味，為了改善制劑工藝，提高制劑質(zhì)量，本實驗分別采用熱風(fēng)真空干燥、微波干燥、噴霧干燥對紫參膠囊稠膏進(jìn)行干燥，以性狀、干浸膏得率、吸濕性、斯皮諾素和芍藥苷含有量作為評價指標(biāo)，篩選紫參膠囊最佳干燥工藝［2-4］。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters Acquity H-Class UPLC超高效液相色譜儀 (美國Waters公司)，包括四元高壓梯度泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱以及Empower2數(shù)據(jù)處理工作站;Sartorius BP211D十萬分之一電子天平 (德國賽多利斯公司);YE—100低溫真空干燥箱 (南京鑫長江制藥設(shè)備有限公司);微波干燥箱 (天水華圓制藥設(shè)備科技有限責(zé)任公司);小型噴霧干燥儀 (上海世遠(yuǎn)生物制備工程有限公司);HHB11—360型電熱恒溫培養(yǎng)箱 (上海躍進(jìn)醫(yī)療器械一廠)。

1.2 試藥 紫參膠囊提取、濃縮得稠膏 (自制，相對密度為1.15～1.20，60℃熱測)，斯皮諾素對照品 (中國食品藥品生物制品檢定研究院，批號111869-201102，純度為95.4%);芍藥苷對照品 (中國食品藥品檢定研究院，批號110736-200934，純度為94.9%);乙腈為色譜純，屈臣氏純凈水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 不同干燥方法制備干浸膏

2.1.1 熱風(fēng)真空干燥干浸膏的制備 取自制稠膏適量 (相當(dāng)于處方水提藥材680 g)，采用熱風(fēng)真空干燥法 (低溫真空干燥箱，溫度 (70±5)℃，壓力 (－0.04～－0.06)MPa制備得熱風(fēng)真空干燥干浸膏。

2.1.2 微波干燥干浸膏的制備 取自制稠膏適量 (相當(dāng)于處方水提藥材680 g)，采用微波干燥法 (箱式微波真空干燥設(shè)備)，微波功率15 kW，頻率 (2450±50)MHz，溫度(70±5)℃制備得微波干燥干浸膏。

2.1.3 噴霧干燥干浸膏粉的制備 取自制稠膏適量 (相當(dāng)于處方水提藥材680 g)，采用噴霧干燥法 (噴霧干燥設(shè)備，進(jìn)風(fēng)溫度150℃，噴霧速度0.1 kg/h，霧化壓力0.2 MPa)制備得噴霧干燥干浸膏。

2.2 測定方法及結(jié)果

2.2.1 斯皮諾素測定方法［5-8］

2.2.1.1 色譜條件 Waters Acquity BEH C18色譜柱 (2.1 mm×50 mm，1.7 μm);乙腈 (A)-水 (B)(13∶87)為流動相，檢測波長為335 nm;柱溫為30℃;體積流量0.25 mL/min。

2.2.1.2 對照品溶液的制備 稱取斯皮諾素對照品適量，精密稱定 (10.40 mg)，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，備用。精密吸取該溶液1.0 mL置5 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每1 mL含0.083 mg的溶液，0.22 μm微孔濾膜濾過，即得對照品溶液。

2.2.1.3 供試品溶液的制備 取干浸膏適量 (相當(dāng)于處方水提藥材3.5 g)，精密稱定，置10 mL量瓶中，加甲醇8 mL，超聲處理 (功率240 W，頻率45 kHz)30 min，放冷，加甲醇定容至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液過0.22 μm微孔濾膜，即得供試品溶液。自動進(jìn)樣對照品溶液1、2、3、4、5、6 μL，以色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸，線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)為Y=209514.5X－60160.2，r=0.9998，結(jié)果表明，斯皮諾素在0.083～0.498 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系;且專屬性試驗表明，陰性對照無干擾，見圖1～3，供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定 (RSD為2.68%，n=6)，精密度好 (RSD為 0.67%，n=6)，重復(fù)性好 (RSD為1.85%，n=6)，平均加樣回收率97.6%(RSD為1.09%，n=6)。

2.2.1.4 測定方法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液2 μL，注入超高效液相色譜儀，按色譜條件測定峰面積，以外標(biāo)一點法計算斯皮諾素的量。

圖1 對照品超高效液相色譜圖

圖2 陰性樣品超高效液相色譜圖

2.2.2 芍藥苷的測定方法［8-10］

2.2.2.1 色譜條件 Waters Acquity BEH C18色譜柱 (2.1 mm×50 mm，1.7 μm);流動相乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85);波長檢測230 nm;柱溫30℃;體積流量0.25 mL/min。

2.2.2.2 對照品溶液的制備 稱取芍藥苷對照品適量，精密稱定 (7.00 mg)，置50 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，制成每1 mL含0.14 mg的溶液，0.22 μm微孔濾膜濾過，即得對照品溶液。

圖3 供試品溶液超高效液相色譜圖

2.2.2.3 供試品溶液的制備 取干浸膏適量 (相當(dāng)于處方水提藥材1.65 g)，精密稱定，置10 mL量瓶中，加甲醇8 mL，超聲處理 (功率240 W，頻率45 kHz)30 min，放冷，加甲醇定容至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液過0.22 μm微孔濾膜，即得供試品溶液。自動進(jìn)樣對照品溶液1、2、3、4、5、6 μL，以色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行線性回歸，線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)為:Y=604980X－5984.1，r=0.9998。結(jié)果表明，芍藥苷在0.14～0.84 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系;且專屬性試驗表明，陰性對照無干擾，見圖4～6，供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定 (RSD為1.54%，n=6)，精密度好(RSD為0.38%，n=6)，重復(fù)性好 (RSD為0.65%，n=6)，平均加樣回收率97.3%(RSD為1.93%，n=6)。

2.2.2.4 測定方法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液2 μL，注入超高效液相色譜儀，按色譜條件測定峰面積，以外標(biāo)一點法計算芍藥苷的量。

圖4 對照品超高效液相色譜圖

圖5 陰性樣品超高效液相色譜圖

圖6 供試品溶液超高效液相色譜圖

2.2.3 成分測定結(jié)果 分別測得3批真空干燥、微波干燥、噴霧干燥3種干浸膏中斯皮諾素及芍藥苷的量，取平均值，再換算為每克水提藥材中斯皮諾素及芍藥苷量，結(jié)果見表1。

表1 不同干燥方法制備的干浸膏中斯皮諾素及芍藥苷量(n=3)

2.3 性狀與浸膏得率 結(jié)果見表2。

表2 不同干燥方法制備的干浸膏性狀

2.4 吸濕性 按照臨界相對濕度測定方法測得真空干燥干浸膏、微波干燥干浸膏、噴霧干燥干浸膏的臨界相對濕度(CRH)分別為67%、66%、63%，物料的CRH越小則越易吸濕，反之則不易吸濕。

3 結(jié)論與討論

3.1 以浸膏得率為指標(biāo)，真空干燥收率最高，微波干燥與其差別小，噴霧干燥收率最小;以吸濕性為指標(biāo)，可見噴霧干燥得浸膏粉臨界濕度最小，吸濕性最強;以斯皮諾素量為指標(biāo)，微波干燥浸膏中斯皮諾素量最高 (以原水提藥材計)，真空干燥最低;以芍藥苷量為指標(biāo)，噴霧干燥浸膏中芍藥苷量最高 (以原水提藥材計)，微波干燥浸膏中芍藥苷量與其較為接近，真空干燥最低，綜合分析各種干燥工藝對浸膏得率、吸濕性、指標(biāo)成分的量的影響，結(jié)合性狀確定紫參膠囊干燥工藝為微波干燥。

3.2 3種干燥方法的參數(shù)都已經(jīng)過試驗考察進(jìn)行優(yōu)化篩選，均為最佳工藝參數(shù);且制備稠膏的水提工藝在本制劑注冊申報過程中通過正交試驗進(jìn)行了優(yōu)化，保證了稠膏中指標(biāo)成分的量。

3.3 以每克干浸膏計，其斯皮諾素及芍藥苷量較高，尤其噴霧干燥芍藥苷量明顯多于真空干燥及微波干燥，但制劑生產(chǎn)以浸膏加輔料制成定量顆粒后充填成膠囊，浸膏量的多少直接影響到膠囊內(nèi)容物中指標(biāo)成分的量，所以，本實驗未采用計算轉(zhuǎn)移率的方法比較各干燥方法對指標(biāo)成分的影響，而采用每克水提藥材含指標(biāo)成分的量，對比更為直觀。

3.4 小型噴霧干燥設(shè)備制備干浸膏粉時，部分小顆粒隨熱風(fēng)吹出出風(fēng)口，極大地影響到干浸膏得率。

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