馬鈴薯立枯絲核菌致病力及其生物防治初探

楊月+郭春蘭+王介夫+肖亞靜+孫冬梅

摘要：選取2種馬鈴薯立枯絲核菌，分別對7個不同馬鈴薯品種的塊莖進行致病率試驗，研究了不同生防菌對病原菌的抑制能力。結果表明，馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強；7個品種的馬鈴薯中，早大白與K18對供試病原菌比較敏感，興佳2、中暑5抗病性比較強。接菌前噴7種生防菌劑對病原菌有一定抑制作用，但7種生防菌劑的抑病率稍有差別，2種混菌發酵液的抑病效果要好于單菌發酵液的抑病效果，3種混菌發酵液的效果最好。接完絲核菌菌絲塊2 d后再進行噴菌處理雖有一定抑菌作用，但當病原菌已侵入后再進行抑菌治療不能起到明顯效果。

關鍵詞：立枯絲核菌；馬鈴薯；生物防治

中圖分類號：S435.32 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0129-02

絲核菌是一類在自然界中廣泛存在的真菌，在全世界的耕作、非耕作土壤中均有分布，許多絲核菌很容易從染病植株及土壤中分離得到。絲核菌的寄主范圍極廣，可侵染43科200余種植物^[1]。絲核菌是一種土傳植物病原真菌，容易引起植物爛種、苗期猝倒。絲核菌在土壤中的腐生競爭力強，存活時間長，被認為是最具破壞力的土傳植物病原菌之一^[2]。絲核菌在菌絲分枝發生點附近縊縮，分枝點附近形成隔膜，菌絲經常呈直角或銳角分枝。生物防治主要是利用微生物之間的拮抗作用，選擇對農作物不造成危害的微生物抑制病原菌的生長^[3]。細菌、放線菌、真菌在植物病害生物防治中開發應用前景良好，生防菌劑的研究及開發有著重要的現實意義^[4]。微生物源農藥是目前應用最廣、發展最快、最有前途的一類生物農藥，是解決我國當前農業環境問題的主要突破口之一^[5-6]。

1 材料與方法

1.1 材料

2種馬鈴薯立枯絲核菌、細菌、放線菌、霉菌均由筆者所在實驗室提供。早大白、尤金、興佳2、中暑5、荷蘭十五、K18、K13等7個馬鈴薯品種購自本地市場。供試培養基：馬鈴薯培養基（PDA）、查氏培養基、牛肉膏蛋白胨培養基、高氏1號培養基。

1.2 方法

1.2. 1 試驗菌種準備

將馬鈴薯立枯絲核菌接種于PDA培養基中，置28 ℃恒溫箱中活化并擴大培養3 d，至菌落滿皿，在菌落同心圓環處用解剖刀切取大小相等的菌絲塊，備用。

1.2.2 馬鈴薯塊莖的準備

將7個馬鈴薯品種均切成2 cm厚的塊莖切片，備用。

1.2.3 馬鈴薯塊莖接種

將切好的菌絲塊置于馬鈴薯切片中心，每處理重復10次，置于28 ℃恒溫箱中培養，接種3 d后記錄病級。

1.2.4 馬鈴薯塊莖病斑的分級標準

0級：沒有暈圈；1級：有淺色的暈圈，或褐色小暈圈；2級：出現顏色稍深暈圈，暈圈較小，有淺色水珠；3級：出現褐色大暈圈；4級：出現褐色暈圈，且有褐色水珠，出現腐爛現象。

1.2.5 生防菌發酵液的獲得

以牛肉膏蛋白胨培養基為液體培養基，分裝于250 mL錐形瓶中，將供試細菌接于液體培養基中，置于搖床搖2 d，發酵液待用。以查氏培養基為液體培養基，250 mL錐形瓶中裝液量為100 mL，孢懸液濃度為 106個/mL 接種5 mL，將供試霉菌接于液體培養基中，置于搖床搖7 d，發酵液待用。以高氏1號培養基為液體培養基，分裝于250 mL錐形瓶中，將供試放線菌接于液體培養基中，置于搖床搖7 d，發酵液待用。

1.2.6 不同施用方法對立枯絲核菌的防治效果

噴霧后接種的防治效果：采用細菌、放線菌、霉菌的單菌發酵液，兩兩混菌發酵液及3種菌混合發酵液7種生防菌劑分別對早大白、K18這2個馬鈴薯品種的塊莖進行定量噴霧，隨后立即接絲核菌菌絲塊，每處理重復3次，置于28 ℃恒溫箱中培養，以只接病原菌不噴生防菌劑的馬鈴薯切片為對照，以只噴生防菌劑的馬鈴薯切片為參考，3 d后觀察并記錄病級。接菌2 d后噴霧的防治效果：對早大白、K18這2個不同馬鈴薯品種的塊莖接完絲核菌菌絲塊后，28 ℃ 培養2 d，再用7種生防菌劑分別進行定量噴霧處理，每處理重復3次，以只接病原菌不噴生防菌劑的馬鈴薯切片為對照，以只噴生防菌劑的馬鈴薯切片為參考，培養1 d后觀察并記錄病級。

2 結果與分析

2.1 立枯絲核菌對馬鈴薯塊莖的致病率

由表1可知馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強，馬鈴薯絲核菌2對馬鈴薯塊莖的致病力稍弱。7個馬鈴薯品種中，早大白與K18的抗病性比較弱，興佳2、中暑5抗病性比較強。

3 結論與討論

本研究表明，馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強；7個品種的馬鈴薯中，早大白與K18對供試病原菌比較敏感，興佳2、中暑5抗病性比較強，應選擇抗病性較強的馬鈴薯品種進行栽種。用7種不同的生防菌劑分別對早大白與K18這2個馬鈴薯品種的塊莖進行定量噴霧處理后馬上接絲核菌菌絲塊，接菌前噴用7種生防菌劑對病原菌有一定的抑制作用，但7種生防菌劑的抑病率稍有差別，2個混菌發酵液的抑病效果要好于單菌發酵液的抑病效果，3種混菌發酵液的效果最好。2個不同馬鈴薯品種的塊莖接種絲核菌菌絲塊培養2 d后，用7種不同生防菌劑分別進行定量噴菌處理，再培養1 d，結果表明，接完絲核菌菌絲塊2 d后再進行噴菌處理雖有一定的抑菌作用，但當病原菌已侵入后再進行抑菌治療不能起到明顯的效果。

參考文獻：

[1]Suwannarach N，Kumla J，Bussaban B，et al. Biocontrol of rhizoctonia solani AG-2，the causal agent of damping-off by Muscodor cinnamomi CMU-Cib 461[J]. World Journal of Microbiology & Biotechnology，2012，28（11）：3171-3177.

[2]劉 力，葛起新. 華東地區立枯絲核菌融合群鑒定[J]. 浙江農業大學學報，1987，13（3）：3-9.

[3]張天曉，張志光. 立枯絲核菌Rhizoctonia solani Kühn的研究[J]. 湖南師范大學自然科學學報，1986，9（1）：76-82.

[4]郝建軍，康宗利，于 洋，等. 植物生理學實驗技術[M]. 北京：化學工業出版社，2007：98-101.

[5]陳立杰，董 健，朱曉峰，等. 生防放線菌Snea253代謝產物的理化性質[J]. 農藥，2010，49（1）：26-28.

[6]周德慶. 微生物學實驗手冊[M]. 上海：上?？茖W技術出版社，1986：342-345.

摘要：選取2種馬鈴薯立枯絲核菌，分別對7個不同馬鈴薯品種的塊莖進行致病率試驗，研究了不同生防菌對病原菌的抑制能力。結果表明，馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強；7個品種的馬鈴薯中，早大白與K18對供試病原菌比較敏感，興佳2、中暑5抗病性比較強。接菌前噴7種生防菌劑對病原菌有一定抑制作用，但7種生防菌劑的抑病率稍有差別，2種混菌發酵液的抑病效果要好于單菌發酵液的抑病效果，3種混菌發酵液的效果最好。接完絲核菌菌絲塊2 d后再進行噴菌處理雖有一定抑菌作用，但當病原菌已侵入后再進行抑菌治療不能起到明顯效果。

關鍵詞：立枯絲核菌；馬鈴薯；生物防治

中圖分類號：S435.32 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0129-02

絲核菌是一類在自然界中廣泛存在的真菌，在全世界的耕作、非耕作土壤中均有分布，許多絲核菌很容易從染病植株及土壤中分離得到。絲核菌的寄主范圍極廣，可侵染43科200余種植物^[1]。絲核菌是一種土傳植物病原真菌，容易引起植物爛種、苗期猝倒。絲核菌在土壤中的腐生競爭力強，存活時間長，被認為是最具破壞力的土傳植物病原菌之一^[2]。絲核菌在菌絲分枝發生點附近縊縮，分枝點附近形成隔膜，菌絲經常呈直角或銳角分枝。生物防治主要是利用微生物之間的拮抗作用，選擇對農作物不造成危害的微生物抑制病原菌的生長^[3]。細菌、放線菌、真菌在植物病害生物防治中開發應用前景良好，生防菌劑的研究及開發有著重要的現實意義^[4]。微生物源農藥是目前應用最廣、發展最快、最有前途的一類生物農藥，是解決我國當前農業環境問題的主要突破口之一^[5-6]。

1 材料與方法

1.1 材料

2種馬鈴薯立枯絲核菌、細菌、放線菌、霉菌均由筆者所在實驗室提供。早大白、尤金、興佳2、中暑5、荷蘭十五、K18、K13等7個馬鈴薯品種購自本地市場。供試培養基：馬鈴薯培養基（PDA）、查氏培養基、牛肉膏蛋白胨培養基、高氏1號培養基。

1.2 方法

1.2. 1 試驗菌種準備

將馬鈴薯立枯絲核菌接種于PDA培養基中，置28 ℃恒溫箱中活化并擴大培養3 d，至菌落滿皿，在菌落同心圓環處用解剖刀切取大小相等的菌絲塊，備用。

1.2.2 馬鈴薯塊莖的準備

將7個馬鈴薯品種均切成2 cm厚的塊莖切片，備用。

1.2.3 馬鈴薯塊莖接種

將切好的菌絲塊置于馬鈴薯切片中心，每處理重復10次，置于28 ℃恒溫箱中培養，接種3 d后記錄病級。

1.2.4 馬鈴薯塊莖病斑的分級標準

0級：沒有暈圈；1級：有淺色的暈圈，或褐色小暈圈；2級：出現顏色稍深暈圈，暈圈較小，有淺色水珠；3級：出現褐色大暈圈；4級：出現褐色暈圈，且有褐色水珠，出現腐爛現象。

1.2.5 生防菌發酵液的獲得

以牛肉膏蛋白胨培養基為液體培養基，分裝于250 mL錐形瓶中，將供試細菌接于液體培養基中，置于搖床搖2 d，發酵液待用。以查氏培養基為液體培養基，250 mL錐形瓶中裝液量為100 mL，孢懸液濃度為 106個/mL 接種5 mL，將供試霉菌接于液體培養基中，置于搖床搖7 d，發酵液待用。以高氏1號培養基為液體培養基，分裝于250 mL錐形瓶中，將供試放線菌接于液體培養基中，置于搖床搖7 d，發酵液待用。

1.2.6 不同施用方法對立枯絲核菌的防治效果

噴霧后接種的防治效果：采用細菌、放線菌、霉菌的單菌發酵液，兩兩混菌發酵液及3種菌混合發酵液7種生防菌劑分別對早大白、K18這2個馬鈴薯品種的塊莖進行定量噴霧，隨后立即接絲核菌菌絲塊，每處理重復3次，置于28 ℃恒溫箱中培養，以只接病原菌不噴生防菌劑的馬鈴薯切片為對照，以只噴生防菌劑的馬鈴薯切片為參考，3 d后觀察并記錄病級。接菌2 d后噴霧的防治效果：對早大白、K18這2個不同馬鈴薯品種的塊莖接完絲核菌菌絲塊后，28 ℃ 培養2 d，再用7種生防菌劑分別進行定量噴霧處理，每處理重復3次，以只接病原菌不噴生防菌劑的馬鈴薯切片為對照，以只噴生防菌劑的馬鈴薯切片為參考，培養1 d后觀察并記錄病級。

2 結果與分析

2.1 立枯絲核菌對馬鈴薯塊莖的致病率

由表1可知馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強，馬鈴薯絲核菌2對馬鈴薯塊莖的致病力稍弱。7個馬鈴薯品種中，早大白與K18的抗病性比較弱，興佳2、中暑5抗病性比較強。

3 結論與討論

本研究表明，馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強；7個品種的馬鈴薯中，早大白與K18對供試病原菌比較敏感，興佳2、中暑5抗病性比較強，應選擇抗病性較強的馬鈴薯品種進行栽種。用7種不同的生防菌劑分別對早大白與K18這2個馬鈴薯品種的塊莖進行定量噴霧處理后馬上接絲核菌菌絲塊，接菌前噴用7種生防菌劑對病原菌有一定的抑制作用，但7種生防菌劑的抑病率稍有差別，2個混菌發酵液的抑病效果要好于單菌發酵液的抑病效果，3種混菌發酵液的效果最好。2個不同馬鈴薯品種的塊莖接種絲核菌菌絲塊培養2 d后，用7種不同生防菌劑分別進行定量噴菌處理，再培養1 d，結果表明，接完絲核菌菌絲塊2 d后再進行噴菌處理雖有一定的抑菌作用，但當病原菌已侵入后再進行抑菌治療不能起到明顯的效果。

參考文獻：

[1]Suwannarach N，Kumla J，Bussaban B，et al. Biocontrol of rhizoctonia solani AG-2，the causal agent of damping-off by Muscodor cinnamomi CMU-Cib 461[J]. World Journal of Microbiology & Biotechnology，2012，28（11）：3171-3177.

[2]劉 力，葛起新. 華東地區立枯絲核菌融合群鑒定[J]. 浙江農業大學學報，1987，13（3）：3-9.

[3]張天曉，張志光. 立枯絲核菌Rhizoctonia solani Kühn的研究[J]. 湖南師范大學自然科學學報，1986，9（1）：76-82.

[4]郝建軍，康宗利，于 洋，等. 植物生理學實驗技術[M]. 北京：化學工業出版社，2007：98-101.

[5]陳立杰，董 健，朱曉峰，等. 生防放線菌Snea253代謝產物的理化性質[J]. 農藥，2010，49（1）：26-28.

[6]周德慶. 微生物學實驗手冊[M]. 上海：上?？茖W技術出版社，1986：342-345.

摘要：選取2種馬鈴薯立枯絲核菌，分別對7個不同馬鈴薯品種的塊莖進行致病率試驗，研究了不同生防菌對病原菌的抑制能力。結果表明，馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強；7個品種的馬鈴薯中，早大白與K18對供試病原菌比較敏感，興佳2、中暑5抗病性比較強。接菌前噴7種生防菌劑對病原菌有一定抑制作用，但7種生防菌劑的抑病率稍有差別，2種混菌發酵液的抑病效果要好于單菌發酵液的抑病效果，3種混菌發酵液的效果最好。接完絲核菌菌絲塊2 d后再進行噴菌處理雖有一定抑菌作用，但當病原菌已侵入后再進行抑菌治療不能起到明顯效果。

關鍵詞：立枯絲核菌；馬鈴薯；生物防治

中圖分類號：S435.32 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0129-02

絲核菌是一類在自然界中廣泛存在的真菌，在全世界的耕作、非耕作土壤中均有分布，許多絲核菌很容易從染病植株及土壤中分離得到。絲核菌的寄主范圍極廣，可侵染43科200余種植物^[1]。絲核菌是一種土傳植物病原真菌，容易引起植物爛種、苗期猝倒。絲核菌在土壤中的腐生競爭力強，存活時間長，被認為是最具破壞力的土傳植物病原菌之一^[2]。絲核菌在菌絲分枝發生點附近縊縮，分枝點附近形成隔膜，菌絲經常呈直角或銳角分枝。生物防治主要是利用微生物之間的拮抗作用，選擇對農作物不造成危害的微生物抑制病原菌的生長^[3]。細菌、放線菌、真菌在植物病害生物防治中開發應用前景良好，生防菌劑的研究及開發有著重要的現實意義^[4]。微生物源農藥是目前應用最廣、發展最快、最有前途的一類生物農藥，是解決我國當前農業環境問題的主要突破口之一^[5-6]。

1 材料與方法

1.1 材料

2種馬鈴薯立枯絲核菌、細菌、放線菌、霉菌均由筆者所在實驗室提供。早大白、尤金、興佳2、中暑5、荷蘭十五、K18、K13等7個馬鈴薯品種購自本地市場。供試培養基：馬鈴薯培養基（PDA）、查氏培養基、牛肉膏蛋白胨培養基、高氏1號培養基。

1.2 方法

1.2. 1 試驗菌種準備

將馬鈴薯立枯絲核菌接種于PDA培養基中，置28 ℃恒溫箱中活化并擴大培養3 d，至菌落滿皿，在菌落同心圓環處用解剖刀切取大小相等的菌絲塊，備用。

1.2.2 馬鈴薯塊莖的準備

將7個馬鈴薯品種均切成2 cm厚的塊莖切片，備用。

1.2.3 馬鈴薯塊莖接種

將切好的菌絲塊置于馬鈴薯切片中心，每處理重復10次，置于28 ℃恒溫箱中培養，接種3 d后記錄病級。

1.2.4 馬鈴薯塊莖病斑的分級標準

0級：沒有暈圈；1級：有淺色的暈圈，或褐色小暈圈；2級：出現顏色稍深暈圈，暈圈較小，有淺色水珠；3級：出現褐色大暈圈；4級：出現褐色暈圈，且有褐色水珠，出現腐爛現象。

1.2.5 生防菌發酵液的獲得

以牛肉膏蛋白胨培養基為液體培養基，分裝于250 mL錐形瓶中，將供試細菌接于液體培養基中，置于搖床搖2 d，發酵液待用。以查氏培養基為液體培養基，250 mL錐形瓶中裝液量為100 mL，孢懸液濃度為 106個/mL 接種5 mL，將供試霉菌接于液體培養基中，置于搖床搖7 d，發酵液待用。以高氏1號培養基為液體培養基，分裝于250 mL錐形瓶中，將供試放線菌接于液體培養基中，置于搖床搖7 d，發酵液待用。

1.2.6 不同施用方法對立枯絲核菌的防治效果

噴霧后接種的防治效果：采用細菌、放線菌、霉菌的單菌發酵液，兩兩混菌發酵液及3種菌混合發酵液7種生防菌劑分別對早大白、K18這2個馬鈴薯品種的塊莖進行定量噴霧，隨后立即接絲核菌菌絲塊，每處理重復3次，置于28 ℃恒溫箱中培養，以只接病原菌不噴生防菌劑的馬鈴薯切片為對照，以只噴生防菌劑的馬鈴薯切片為參考，3 d后觀察并記錄病級。接菌2 d后噴霧的防治效果：對早大白、K18這2個不同馬鈴薯品種的塊莖接完絲核菌菌絲塊后，28 ℃ 培養2 d，再用7種生防菌劑分別進行定量噴霧處理，每處理重復3次，以只接病原菌不噴生防菌劑的馬鈴薯切片為對照，以只噴生防菌劑的馬鈴薯切片為參考，培養1 d后觀察并記錄病級。

2 結果與分析

2.1 立枯絲核菌對馬鈴薯塊莖的致病率

由表1可知馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強，馬鈴薯絲核菌2對馬鈴薯塊莖的致病力稍弱。7個馬鈴薯品種中，早大白與K18的抗病性比較弱，興佳2、中暑5抗病性比較強。

3 結論與討論

本研究表明，馬鈴薯立枯絲核菌1對馬鈴薯塊莖的致病力最強；7個品種的馬鈴薯中，早大白與K18對供試病原菌比較敏感，興佳2、中暑5抗病性比較強，應選擇抗病性較強的馬鈴薯品種進行栽種。用7種不同的生防菌劑分別對早大白與K18這2個馬鈴薯品種的塊莖進行定量噴霧處理后馬上接絲核菌菌絲塊，接菌前噴用7種生防菌劑對病原菌有一定的抑制作用，但7種生防菌劑的抑病率稍有差別，2個混菌發酵液的抑病效果要好于單菌發酵液的抑病效果，3種混菌發酵液的效果最好。2個不同馬鈴薯品種的塊莖接種絲核菌菌絲塊培養2 d后，用7種不同生防菌劑分別進行定量噴菌處理，再培養1 d，結果表明，接完絲核菌菌絲塊2 d后再進行噴菌處理雖有一定的抑菌作用，但當病原菌已侵入后再進行抑菌治療不能起到明顯的效果。

參考文獻：

[1]Suwannarach N，Kumla J，Bussaban B，et al. Biocontrol of rhizoctonia solani AG-2，the causal agent of damping-off by Muscodor cinnamomi CMU-Cib 461[J]. World Journal of Microbiology & Biotechnology，2012，28（11）：3171-3177.

[2]劉 力，葛起新. 華東地區立枯絲核菌融合群鑒定[J]. 浙江農業大學學報，1987，13（3）：3-9.

[3]張天曉，張志光. 立枯絲核菌Rhizoctonia solani Kühn的研究[J]. 湖南師范大學自然科學學報，1986，9（1）：76-82.

[4]郝建軍，康宗利，于 洋，等. 植物生理學實驗技術[M]. 北京：化學工業出版社，2007：98-101.

[5]陳立杰，董 健，朱曉峰，等. 生防放線菌Snea253代謝產物的理化性質[J]. 農藥，2010，49（1）：26-28.

[6]周德慶. 微生物學實驗手冊[M]. 上海：上海科學技術出版社，1986：342-345.