艾滋病患者血樣臨床假性血小板減少原因的探討

汪林芬， 喬金麗

(云南省中醫中藥研究院， 云南 昆明 650023)

本科自2009年接收院內中醫藥治療艾滋患者的臨床血液分析工作以來，發現有一部份患者的血小板減少，但臨床上沒有血小板減少的癥狀。經過觀察分析，少部分是真實減少，大部分是假性減少。

為使臨床檢驗工作提高到一個新的水平，提高檢驗結果的準確性。本文通過對標本采取各環節及非技術因素的干擾等進行分析，將導致本院中醫藥治療艾滋病人的假性血小板減少的各種原因進行探討，旨在提高血小板計數的準確性，為臨床提供可靠的診斷依據。細胞分析儀測定血小板時常會出現假性減少，檢驗工作者必須具有高度責任心，對血小板數量減少及體積異常的標本，應極為重視，注意儀器的提示，及時與臨床醫生聯系溝通，妥善處理，現總結如下。

1 實驗前因素的影響

1.1 實驗前采血是否順利 中醫藥治療的艾滋患者中，吸毒人員靜脈血管長期、反復受損，導致靜脈血很難采集，采血時采血時間過長，導致采血試管中微小凝血塊的形成，在血常規檢測過程中，血小板記數可呈假性減少。

1.2 血小板抗凝是否合適 中醫藥治療的艾滋病患者的臨床血液分析，目前用全自動血液分析儀時，最廣泛采用的抗凝劑是被國際血液學標準化委員會(TCSH)認定的EDTA-2K鹽作為血常規檢測的抗凝劑。采血時，是否保證血液和抗凝劑的恰當比例至關重要，血量過多會引起抗凝劑力度不足，血小板凝集，計數結果減少。血量過少，偏多的抗凝劑會干擾分析過程，使攜帶污染率增加。在本實驗室接受的中醫藥治療艾滋病標本中，采血量超出試管標示范圍常有發生。選擇優質的EDTA-2K鹽，按試管標示體積采血至關重要。

1.3 采血時標本混勻是否徹底 本實驗室接受的中醫藥治療艾滋病患者的標本，每次采血管數2～3管，且采血體積量過大，匆忙中易出現混勻不徹底的現象，至試管中形成微小凝聚塊，導致血小板記數時假性減少。

1.4 儲存溫度及時間 血小板標本應于室溫保存，低溫可激活血小板，被活化的血小板半衰期很短，并且最先從循環中清除，迅速滅活。血小板標本儲存最佳時間應為5～30 min，最長不超過4 h。立即檢測時血小板會減少。這是由于血管壁受損后會暴露出內皮細胞表面，并被活化釋放出顆粒中的物質，活化血小板表面糖蛋白，糖蛋白構象發生變化，引起血小板聚集，血液分析儀誤將一堆血小板計數成一個血小板。另有一部分血小板聚集體積超出血小板閾值上限之外，被誤當紅細胞計數，導致血小板計數結果假性偏低。若放置時間過長，血小板隨著時間的延長遭到破壞的程度越來越大，則導致血小板假性減少。在本室檢驗的中醫藥治療的艾滋病患者標本，多為外地、批量采血，標本到達實驗室時，采血時間已超過4 h。所以受檢標本應嚴格控制在一定時間內檢測，否則會引起結果差異，失去臨床參考價值。

2 血小板假性減少類型

2.1 乙二胺四乙酸(EDTA)誘導的血小板凝集引起血小板假性減少 中醫藥治療的艾滋病患者中，有小部分患者血小板計數減少，但臨床上沒有血小板減少的癥狀。本實驗室采集沒有EDTA-2K抗凝劑的全血標本，用同臺血液分析儀，在同一時間段進行快速檢測矯正時，血小板計數的結果在臨床正常參考范圍內，其原因如下。

EDTA·K2作為血常規檢驗的血標本抗凝劑已被國際血液學標準委員會(IC-SH)認定，在臨床上廣泛應用。但由于EDTA·K2有時能引起血小板(PLT)凝集，形成直徑大的血小板團塊，或凝集成帶狀而不被自動血細胞分析儀計數，導致用EDTA·K2作為抗凝劑出現假性血小板偏低現象，即EDTA依賴性血小板假減少癥(PTCP)。原因系個別患者血小板在EDTA作為抗凝劑時，血中可出現免疫介導的冷抗血小板自身抗體，血小板這種自身抗體FC端可與單核細胞或淋巴細胞膜上的FC受體結合，導致血小板互相凝集，而使血小板計數結果數值偏低。血小板能完成上述功能是由于其膜表面具有能結合黏附性糖蛋白(GP)膜表面的受體(GPⅡb/Ⅲa)，而GPⅡb/Ⅲa受體是血小板特異性的。此外，除血小板互相凝集成塊的現象外，部分患者血小板尚可黏附在成熟中性多核細胞周圍呈衛星狀分布，形成血小板衛星現象，而導致血小板計數結果數值假性偏低。

2.2 血小板體積所致的假性血小板減少 正常人血小板大小、形態之間變異較大。臨床正常血小板參考值，平均直徑范圍：1.5～3 μm，平均體積范圍：6.5～12.5 fl。但有些患者，血小板體積較大，直徑在4.2～7.5 μm的稱為大血小板，直徑>7.5 μm的稱為巨大血小板。血細胞分析儀在2～30 fl范圍內分析血小板(電阻抗法)，大或巨大血小板過多時，易被漏檢，而導致血小板計數結果數值假性減少。

2.3 血小板冷凝集引起的假性血小板減少 中藥治療的艾滋病患者標本在運送時，用冰袋直接放在標本管周圍，局部溫度過低，可致局部標本溫度過低，導致血小板假性減少。冬天氣溫過低，采血室、實驗室無空調設備亦會導致血小板假性減少。其原因是出現了冷凝集反應：冷凝集反應是指在較低的溫度下血細胞發生凝集，好發冬季，一般在0℃、4℃最強，37℃可消失。出現這種情況通常存在“血小板冷凝集素”，出現的凝集塊加熱不但不能散開反而使凝集加劇，有的標本在室溫下也發生凝集，而不被血細胞計數儀計數(電阻抗法)。當凝集塊的直徑達到紅細胞體積(平均直徑為7.2 μm)時被當成紅細胞計數，達到白細胞體積(如中性分葉核粒細胞直徑多在10～15 μm)而被當白細胞計數。由于冷凝集使血小板計數結果偏低而紅細胞或白細胞結果偏高。

2.4 異常蛋白血癥引起的血小板假性減少 中藥治療的艾滋病患者，隨病程進展，其肝臟功能異常逐漸明顯，常表現為脂肪代謝異常，白蛋白降低，免疫球蛋白升高，白球比倒置等的異常蛋白血癥。異常蛋白血癥嚴重時可重度損傷血管壁內

皮細胞的結構和功能，釋放出組織因子，啟動外源性凝血系統，使血小板活性增高，出現血小板聚集。同時，因內皮細胞表面ADP酶生成減少，使ADP滅活減少，促進血小板凝集，部分患者出現常規血液分析時假性血小板計數減少。

3 討論

綜上所述，中醫藥治療艾滋病患者臨床過程中，其血小板減少，究其原因是復雜的。有患者自身的特異性、實驗前和實驗中各環節的影響，還有分析方法的局限性。全自動血液分析儀法檢測血小板，是目前主要檢測儀器，但儀器計數血小板可引起的假性血小板減少，原因是復雜的，有些方面還需進一步探討。在中醫藥治療的艾滋病患者中，如遇到靜脈抗凝血血液分析儀測得血小板明顯減少，而臨床又不支持時應立即考慮血小板假性減少的可能，要仔細分析，查找引起血小板減少的各種原因，并采取相應措施進行糾正，必要時通過普通光學顯微鏡或相差顯微鏡直接計數法復查校正。并及時與臨床醫生聯系溝通，妥善處理。以保證檢測結果的真實性，給臨床提供可靠的診斷治療依據。