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2012—2013年我國中藥及天然藥物資源研究進展與學科建設△

2014-09-26 11:14:04段金廒吳啟南宿樹蘭郭盛嚴輝
中國現代中藥 2014年9期
關鍵詞:中藥資源研究

段金廒,吳啟南,宿樹蘭,郭盛,嚴輝

(南京中醫藥大學 江蘇省中藥資源產業化過程協同創新中心 中藥資源產業化與方劑創新藥物國家地方聯合工程研究中心,江蘇 南京 210023)

專 論

2012—2013年我國中藥及天然藥物資源研究進展與學科建設△

段金廒*,吳啟南,宿樹蘭,郭盛,嚴輝*

(南京中醫藥大學 江蘇省中藥資源產業化過程協同創新中心 中藥資源產業化與方劑創新藥物國家地方聯合工程研究中心,江蘇 南京 210023)

對2012—2013年我國中藥及天然藥物資源研究及學科建設進行歸納整理并報告,本文涉及中藥及天然藥物資源研究思路與方法、中藥資源調查與研究、中藥資源生產現狀與GAP基地建設、中藥及天然藥物資源化學研究進展、資源保護與綜合利用以及學科建設等方面,反映了本領域產-學-研-管理環節的學術成就與科技貢獻,以期對中藥與天然藥物資源的資源科學研究、學科建設、人才培養和產業化發展起到引導和推動作用。

中藥資源;天然藥物資源;科學研究;學科建設;產業發展;人才培養

對2012—2013年我國中藥及天然藥物資源研究進展進行歸納分析與討論,內容包括中藥及天然藥物資源研究思路與方法、中藥資源調查與研究、中藥資源生產現狀與GAP基地建設、中藥及天然藥物資源化學研究進展、資源綜合利用與產業化、資源學科建設等方面,反映了本領域產-學-研-管理環節的學術成就與科技貢獻,并探討該學科的發展方向與發展趨勢,以期對中藥與天然藥物資源的科學研究、學科建設、人才培養和產業發展發揮引導和推動作用。

1 中藥及天然藥物資源研究思路與方法

中藥及天然藥物資源是國家戰略性資源,是中醫藥事業發展的物質基礎,關系到中醫藥事業的可持續發展。近2年來,中藥資源領域代表性事件就是全國第四次中藥資源普查的開展和推進工作。同時,相關領域的廣大專家學者進行著不懈的努力和實踐,推動了學科建設與產學研結合,致力于我國中藥與天然藥物資源研究思路與方法學探索。

黃璐琦等[1]在中藥資源調查情況簡報中指出:第四次全國中藥資源普查試點工作從2009年開始籌備,2011—2012年先后分3批在全國22個省(區、市)啟動了655個縣的中藥資源普查試點。共有8 000多名來自不同學科的專業技術人員組成專業普查隊,按照全國統一普查技術規范和進度要求,開展了廣泛深入的外業實地調查,獲得了大量普查基礎數據。前期啟動的10個省(區、市)已完成70%以上的普查試點任務。據統計,截至2013年5月底,全國中藥資源普查數據庫收集到資源調查樣方套3萬個,涉及藥用物種9 000種,其中普查重點品種429種,采集標本47 665份、藥材樣品2 944份,拍攝藥用植物形態及生態照片54萬張,收集民間和民族傳統醫藥知識500條。于2014年正式啟動我國沿海六省的江蘇省、浙江省、福建省、山東省、遼寧省、廣東省的中藥資源普查工作以及水生、耐鹽特色中藥資源的調查與合理利用研究。至此,全國已啟動28個省(市、區)的中藥資源普查工作。

黃璐琦等[2]根據第四次全國中藥資源普查技術規范設計的過程,在明確普查目的和目標的基礎上,按工作流程對普查任務進行了分解,指出各地中藥資源組織管理、立地環境及中藥資源分布、經濟實力、技術水平、人員積極性及能動性等區域差異是本次普查技術規范設計中最大的難點,提出了中藥資源普查技術方案制定中強制性和靈活性相結合、野外調查和市場調查相結合、計算機輔助和專家經驗相結合的“三結合原則”;并在分析影響普查質量的關鍵環節技術的基礎上,提出第四次全國中藥資源普查的技術規范框架,為本次全國中藥資源普查提供了行動規范,將對我國中藥資源調查和普查技術的推廣、應用起到規范和指引作用。

段金廒等[3-7]通過對銀杏、當歸、菊、薄荷、苦豆子,以及我國藥用棗屬和桑蠶等資源品種的研究與實踐,較為系統地闡述了中藥資源學與資源化學的學科概念與性質、內涵與外延、學科建立背景、學科建設與人才培養、研究方向與目標任務等。從廣義上講,中藥資源與資源化學是一門揭示自然資源中對人類健康及其相關領域具有應用價值或潛在價值的資源性化學成分的性質、分布、積累與消長規律,并通過適宜技術集成以實現資源的合理生產與科學利用的綜合性與應用性特色突出的基礎學科,為進一步豐富和完善中藥資源與資源化學的學科體系建設、人才培養和科學研究提供理論依據和方法學支撐。明確提出了中藥資源化學學科的主要研究方向:(1)基于藥用生物的生長發育過程研究資源生物體化學成分的種類與分布、合成途徑、積累動態與生理生態的關系及其調控機制;(2)基于藥材生產與加工過程研究資源性成分的生物轉化、化學轉化及其變化規律;(3)基于資源開發與綜合利用角度研究藥用資源中各類物質的可利用價值及其資源化過程;(4)基于資源產業化過程研究促進資源性化學成分利用效率的有效提升。

通過國家“十一五”、“十二五”科技支撐計劃項目的研究與實施,形成了以當歸為示范的多元功效物質基礎的多指標評價技術體系,以確定適宜采收期和適宜生產區域布局;圍繞藥材初加工過程中“殺青”、“發汗”、“熏制”等共性關鍵技術進行研究與實踐[7],探討其目的與意義、方法與原理、技術集成,以及對藥材品質的影響等,以期為闡明藥材初加工原理、制定規范合理的藥材加工標準及其標準操作規程(SOP)提供借鑒;建立了大宗常用中藥材品種的規范化種植基地,開展銀杏葉等中藥材品種的質量標準提升和資源綜合利用研究等,為揭示中藥資源生產與資源產業化過程相關科學問題、有效延伸中藥資源經濟產業鏈作出了一定的貢獻。

張永清等[8]介紹了微衛星和群體遺傳學的基本概念和其特點,闡述了微衛星在群體遺傳學中對于居群的遺傳結構和遺傳多樣性研究、基因流分析和進化顯著單元ESU的劃分研究應用,探討了微衛星引入群體遺傳學在道地藥材遺傳成因、栽培起源和產地鑒別等方面的應用前景,為道地藥材的研究提供了新的理論和方法。

以區域特色中藥資源為研究對象,在查閱相關文獻的基礎上,結合目前先進的調查技術,對水生藥材資源調查的理論和實踐進行探討。針對當前缺少適宜于水生藥材資源調查技術方法的現狀,通過對水生生物資源調查相關文獻的整理,如國家林業局《全國濕地資源調查技術規程(試行)》(2008年)、國家環境保護部《全國淡水生物物種資源調查技術規定(試行)》(2010年)等,并經中藥資源學野外實踐教學、暑期社會實踐調查等多種形式進行探索實踐與總結,初步建立適宜于水生藥用生物調查資源的技術方案,為全國第四次中藥資源普查水生類藥材調查的技術規程確立提供了參考[9]。

陳士林等[10-11]對近20年中藥鑒定學研究和應用的新技術、新方法進行了評述,并探討了現代技術在鑒定中的客觀性和準確性。DNA條形碼技術在鑒定沒有背景信息的中藥樣品及在方法通用性、可數字化方面具有優勢,應用前景廣闊。此外,DNA條形碼技術在生物物種鑒定與分類、珍稀瀕危和貴重生物資源保護、海關貿易監控、生物多樣性保護等領域具有廣闊的應用前景[12]。

魏建和等[13]對我國中藥材新品種選育、中藥材新品種認證體系等現狀進行了較為系統的總結分析,并提出在建立種質評價基礎之上,以“選擇育種”為主要育種手段,以培育常規品種為主。開展人工栽培的無良種中藥材的新品種選育研究,并在生產上推廣應用選育的優良品種;開展中藥材的雜交育種以及生物工程育種的探索等;開展品質性狀遺傳規律研究,建立符合藥品特性的中藥材品種選育技術方法和區域基地。創新性提出構建我國藥用植物園體系,有機整合現有藥用植物遷地保護機構和種質資源[14]。

肖小河等[15]提出道地藥材品質辨識及其與生態環境的相關性研究策略,以道地藥材品質評價方法和標準為突破口,從效入手,以效定質,以質論環,建立以“效-質-環”為研究路徑的中藥材道地性評價(道地藥材品質生態學研究)思路和模式,以期為揭示影響道地藥材品質形成的生態環境主導因子、建立道地藥材臨床合理應用劑量換算機制、闡明中藥材道地性的現代科學內涵、解決制約道地藥材生產發展與臨床應用的關鍵問題提供研究基礎。提出構建基于產區相對歷史、產地生態適宜性、商品規格等級、組分黃金比例和生物效(毒)價的中藥材品質數字化、一體化評價控制方法和指標體系(簡稱道地綜合指數,DDI)。DDI指數有助于更全面、更客觀、更有效地評價控制和保證中藥材品質,有望發展成為真正具有中醫藥原創思想且行之有效的中藥品質評價控制標準,同時對中藥“品-質-性-效(毒)-用”一體化與臨床合理用藥等也將具有推動作用[16]。

段金廒等[17]針對中藥資源產業化過程中廢棄的植物根系、地上莖葉、藥渣等造成的嚴重資源浪費和環境污染問題,在對中藥廢棄物的產生、分類及其特點論述的基礎上,探索性提出了“三大利用策略”,即傳統非藥用部位多途徑利用策略、中藥材與中藥飲片加工過程廢棄物回收利用策略、中藥資源深加工過程廢棄物回收利用策略;提出“三類資源化模式”,即粗放低值資源化模式、轉化增效資源化模式及精細高值資源化模式,以期為推動我國中藥資源產業化過程廢棄物的資源化利用提供引導和借鑒,為中藥及天然藥物資源領域推進和逐步實現資源節約型、環境友好型、低碳型循環經濟發展作出應有的貢獻。并進一步針對中藥廢棄物轉化增效的資源化模式,從轉化增效的實現途徑、適宜技術體系、應用實踐等進行了較為系統深入的探討[18],并編著出版《中藥廢棄物的資源化利用》[19]。段金廒等[20]在分析中藥廢棄物來源與主要化學組成的基礎上,提出膜科學技術是中藥廢棄物資源化過程工藝設計的重要選擇之一;并通過探討膜分離及其集成技術用于中藥廢棄物有效組分資源化的原理、方法與應用實踐,描述了膜技術在中藥廢棄物的提取、分離、濃縮、純化工程集成技術中的應用前景,比較系統地論述了膜技術在中藥資源產業化過程中的適宜性和可行性。

江曙等[21]以中藥資源產業化過程中產生的廢棄物為研究對象,應用中藥學、化學、微生物學等多學科知識與方法,通過微生物轉化促進中藥廢棄物中功能性物質、生物質能源、營養基質等資源性物質的轉化與轉移,以提升資源利用效率,延伸資源經濟產業鏈,實現物盡其用、節約資源、保護環境、發展生態型循環經濟產業的目的。

曾建國[22]提出在大健康產業與大中藥開發背景下的中獸藥發展機遇,拓展了中藥資源開發利用,提升利用效率的資源化途徑。龍興超等[23]對中藥行業的成本狀況進行了分析,并對近年來中藥材價格的變化情況,以50個家種中藥材品種和50個野生中藥材品種為例,分別進行了數據匯總和統計。從原料藥、中成藥質量、資源的可持續利用方面,剖析中成藥限價可能產生的衍生問題。提出“中成藥價格可考慮放歸市場經濟,實現可持續發展”的建議。

易瑞灶等[24]對海洋藥物研究現狀進行分析,指出向海洋索取動物蛋白、功能性食品和特殊活性物質,已成為世界沿海國家海洋開發的一項重要內容。并就目前現狀探討發展思路,為我國海洋藥物的產業化開發提供有益借鑒。

2 中藥及天然藥物資源調查與研究

近年來,在國家中醫藥管理局的高度重視和推動下,在國家相關部委的大力支持下,中國中醫科學院牽頭并組織實施的第四次全國中藥資源調查(試點)工作于2011年展開。圍繞常用中藥品種的資源背景、中藥材的生產布局和基地建設、中藥材規范化生產現狀、中藥材種子種苗基地建設、珍稀瀕危中藥資源的保護、民族民間醫藥經驗的挖掘整理等專項工作展開,有效推動了各試點省份資源調查研究工作的布局與實施,其研究成果必將進一步推動我國中藥資源事業的健康可持續發展。

對海南萬寧市黎族傳統藥用植物資源和相關傳統知識進行民族植物學研究,結果表明[25],萬寧市黎族草醫傳統使用的藥用植物資源共有202種,隸屬于80科171屬。草本植物最多(81種,40.1%),其次為灌木(53種,26.2%)、喬木(36種,17.8%)和藤本(32種,15.8%)。內服療法的使用頻次最高(185次,59.7%),其次是冷敷療法(72次,23.2%)、蒸熏療法(29次,9.4%)。葉或枝葉的使用頻次最高(143次,46.3%),其次是根或根莖(73次,23.6%)、全草或全株(56次,18.1%)。用于治療感冒疾病、跌打損傷、風濕關節痛等當地較為常見疾病的藥用植物種類較多,分別為43種(21.3%)、38種(18.8%)和36種(17.8%)。

包玉梅等[26]對云南省大理州蒼山馬龍峰野生中藥資源進行了調查研究,實地調查表明馬龍峰有31科44屬47種野生藥用植物,其中孢子植物4科4屬4種,雙子葉植物23科36屬37種,單子葉植物4科6屬6種;提出馬龍峰野生藥用植物資源貯量較豐富,但部分種類受各種因素影響,貯量已經下降。

張輝等[26]在第四次全國中藥野生資源普查之際,對吉林省敦化中部地區轄黃泥河鎮、秋梨溝鎮、翰章鄉、沙河沿鎮、大石頭鎮5個鄉鎮野生中藥資源情況進行了調查研究。5個鄉鎮共計國家重點普查品種25種,占國家重點普查品種的20.8%;吉林省重點普查品種19種,占省重點普查品種的11.8%;非重點普查品種39種。為合理開發利用當地中藥資源提供了依據。

魯濱等[28]通過對野外調查所采集到的標本進行整理,初步確定永登縣共有藥用植物104科272屬398種,其中真菌類植物有15科16屬20種,占總種數的5.02%;苔蘚類植物有5科5屬5種,占總種數的1.26%;蕨類植物3科4屬5種,占總種數的1.26%;裸子植物有3科6屬8種,占總種數的2.01%;被子植物78科241屬360種,占總種數的90.45%。

王德立等[29]采用第四次全國中藥資源普查中野生重點中藥資源調查方法,對海南省三亞轄區的重點中藥資源進行了調查,并參照《海南省重點中藥材名錄》,共確定三亞轄區分布重點藥用植物69種,隸屬43科。其中真菌類1科1種,蕨類植物3科3種,種子植物39科65種。野生藥材38科63種,大面積栽培類藥材5科6種。海南地方重點藥材15種,隸屬11個科。調查結果為今后開展中藥材資源的合理開發、建立相應的保護機制、實現藥材的可持續發展提供了研究基礎。

海南橡膠林林下有藥用植物102科288屬415種,其中裸子植物1科1屬1種,藥用蕨類植物11科14屬20種,藥用被子植物90科273屬394種;藥用植物中全株可以入藥的植物有331種,占79.8%,清熱藥種類最多,達到163種,占總數的39.3%[30]。海南橡膠林林下藥用植物資源豐富,應結合當地實際情況選擇林藥一體化的種植模式,加大林下藥用植物開發力度,促進南藥產業發展。

對吉林省伊通滿族自治縣為期近1年的持續調查,采用野外踏查和樣地調查相結合的方式獲取相關資料,確定伊通縣有野生藥用植物66科202種,真菌類2科2種,共計220類藥材;明確了伊通縣儲量較豐富的藥材和珍稀瀕危藥材,為合理開發利用提供了重要參考[31]。

通過調查研究拉薩市瀕危藏藥植物種類、含水率、生物量及資源量,確定拉薩市共有37種瀕危藏藥植物,隸屬22科34屬。大部分藏藥植物地上部分的含水率大于地下部分的含水率,整株含水率最高的是馬尿泡Przewalskiatangutica,為91.97%,最低的是梭砂貝母Fritillariadelavayi,僅為25.99%。粉枝莓Rubusbiflorus平均單株生物量最高,為1 830.480 g,冬蟲夏草Cordycepssinensis最低,僅為0.291 g;羊齒天門冬Asparagusfilicinus的根冠比最大,為5.313,最小的是露蕊烏頭Aconitumgymnandrum,為0.286。產量最高的是暗紅小檗Berberisagricola,為18.000 kg·hm-2,最低的是傘梗虎耳草Saxifragapasumensis,僅為0.007 kg·hm-2。拉薩市瀕危藏藥材植物資源儲藏量為15 683.697 t,暗紅小檗儲藏量最高,為7 690.230 t,占49.03%;傘梗虎耳草蘊藏量最小,為2.393 t,僅占0.015%[32]。

通過實地調查和分析[33],摸清了內蒙古九峰山地區生態與藥用植物資源現狀。九峰山地區生態環境特殊,生態系統的主體為天然次森林,藥用植物資源豐富,以高等植物為主,此次調查共記錄藥用植物75科279種,其中以菊科植物最多(25種),豆科次之(23種),薔薇科第三(19種),毛茛科第四(18種),唇形科第五(16種),蓼科第六(12種),桔梗科第七(10種),禾本科與玄參科并列第八(各為8種)。這9科的藥用植物種數為139種,占總藥用植物種數的50%。藥用植物比較集中的類群同時也是該地區生態植被占優勢的類群,群落中各種植物的生長發育隨著季節的演替而有規律地進行。

通過野外考察、標本采集、資料查閱整理及標本鑒定,對烏蒙山山脈藥用植物資源進行調查,結果表明[34],烏蒙山山脈共有藥用植物272科1 189屬3 184種(含變種和亞種),其中地衣植物8科9屬13種、苔蘚植物40科74屬116種、蕨類植物45科108屬358種、裸子植物10科22屬37種、被子植物169科976屬2 660種。

調查表明[35],安徽省分布有茜草屬藥用植物3種,皖北和皖中地區主要分布的是茜草Rubiacordifolia,另有少量東南茜草R.argyi分布,皖南和皖西大別山區主要分布的是東南茜草R.argyi,另有少量的金劍草R.alata。調查研究為該屬植物資源的開發利用提供了參考。通過在全國范圍內對穿心蓮種質資源進行調查、收集和整理,結果表明[36],目前穿心蓮野生資源在我國的分布極其少見;栽培主要集中在廣東、廣西、福建、四川,其中廣西和廣東的栽培面積最大,云南僅有零星種植;同時獲得了穿心蓮不同居群的生態環境、生物學特性、栽培、產銷和使用情況的信息;建議積極推廣規范化種植栽培,加強穿心蓮藥用植物資源的可持續發展和開發利用。

張永清等[37]對全國各地驢的地方品種進行了系統梳理,總結了其分布區域、形態特征、生育特點等,為選育優良品種、實現規范化養殖、提高和穩定驢皮產量與質量、促進驢養殖業及阿膠產業的可持續發展提供了參考。同時,提出應盡快采取有效措施,在對全國驢的種質資源進行廣泛調查的基礎上,搜集保留種質,建立“中國驢種質資源基因庫”,加強對地方優良驢種的保護和擴繁力度,維持驢基因生物多樣性,優化育種工作,培育生長發育快、肉品與驢皮品質優良的品種,大幅度提高驢養殖效益,促進驢養殖與阿膠產業的進一步發展,發揮應有的社會效益與經濟效益。

鐘國躍等[38]以《中國藥典》、《衛生部藥品標準·藏藥分冊》、《藏藥標準》及有關藏藥專著文獻為依據,對文獻中收載的制劑,藏、青、甘、川、滇藏區藏醫醫療機構使用的院內制劑,藏藥制藥企業實際生產的藏成藥制劑等進行調查,對制劑處方中藥材品種、基原及其標準狀況進行統計分析,結果表明,上述標準和專著中收載的439個制劑、所調查的40家藏醫醫療機構和藏藥制藥企業反饋的711個醫院制劑和藏成藥制劑處方中使用的藥材共約502個品種,使用制劑數在10個以上的藥材品種約154個,絕大多數為藏藥特有品種;約416個藥材品種有基原的文獻記載依據,包括植物藥287個、動物藥78個、礦物藥51個,共涉及到基原植物94科261屬643種(含種下等級),基原動物35科52屬61種(含種下等級);中醫與藏醫交叉使用的藥材品種約122個,約80%的藏藥材品種均產自于青藏高原藏區;約293個藥材品種在上述標準中有收載,除《中國藥典》2010年版中作為藏藥材收載的8個品種外,絕大多數品種的標準僅有【性狀】、【鑒別】或【檢查】項。提出藏藥標準工作應以常用藏藥材品種為重點,特別應加強品種及其基原的調查整理、物質基礎研究與民族醫藥術語的規范化整理工作等建議。

3 中藥及天然藥物資源生產現狀及分析

3.1 中藥及天然藥物資源的生產與GAP建設現狀

中藥材是中醫藥事業與中藥工業發展的物質基礎。中藥材質量是生產出來的,不是檢驗出來的。原國家藥品監督管理局于2002年制訂并發布實施《中藥材生產質量管理規范》(GAP),它是藥材生產的正確道路。至2013年全國通過認證的有94家企業82個品種,其中2012—2013兩年內認證通過24家17個品種。具體品種及認證信息見表1。

表1 2012—2013年期間通過認證的中藥品種與GAP種植基地

劉超等[39]提出了中藥材GAP認證的雙軌制模式,將我國中藥企業分為出口型企業和非出口型企業,針對于非出口型企業在保證其藥材安全的前提下,采用梯度GAP認證,適當降低企業成本和認證費用,規范整個中藥行業,提升中藥材GAP的影響力。李永等[40]對中藥材GAP實施10周年進行了回顧,認為中藥材GAP的實施從源頭上控制中藥材的質量,大大提高了中藥材的質量,為促進中藥材更多更好地與國際接軌、進入國際市場、實現中藥現代化起到了強有力的推動作用。但是要真正實現中藥現代化,將中藥材打入國際市場,還有很長一段路要走。中藥材GAP實施10年過程中的經驗和不足之處,在以后的工作中需加以改進,做好中藥材GAP工作,爭取早日將中藥材推向國際市場。

張尚智[41]對中國中藥材GAP基地現狀進行分析,以原國家食品藥品監督管理局2010年11月24日前發布的通過審查認證的10批中國中藥材GAP檢查公告為研究樣本,進行了文獻學特征分析,結果表明,中國有中藥材GAP基地74個,涉及企業44家,分布于21省、118個縣市,有種植區域約244個,種植藥材品種52個。有3個及以上GAP種植區域的縣5個,占中國總數的4.2%;種植藥材品種5個以上的GAP基地有14個,占總數的26.9%;GAP種植區域及品種較多的企業有北京同仁堂藥業、河南南陽張仲景中藥材、四川雅安三九中藥等。總結出中國中藥材GAP種植現狀:企業參與度低但實力強,GAP基地發展勢頭不強,基地分布區域零散、規模化程度低,藥材種植面積小、品種單一等。

在杠板歸資源調查的基礎上,通過茶林-杠板歸、灌叢-杠板歸及喬木林-杠板歸3種撫育模式,以及補種、施肥與輪采撫育關鍵技術的研究與實踐,撫育模式下杠板歸質量均符合標準規定,并可有效提高產量[42]。通過對武陵山片區中藥材GAP認證與生物醫藥產業的研究,提出相應的發展對策[43],建議加強中藥材GAP種植基地建設,加強GAP、GMP、GSP 3種國家藥品認證,重點建設國家地理標志中藥材的GAP生產基地,加強扶貧攻堅規劃中藥材基地的GAP認證,保護與傳承中藥文化遺產,加快中藥材品牌化建設步伐,發展少數民族醫藥與國家地理標志中藥材的生物醫藥產業等,為中藥資源的可持續發展與利用提供支撐。鄧喬華等[44]根據廣州白云山和記黃埔中藥有限公司實施中藥材規范化種植13年來所取得的經驗,總結了中藥材規范化種植過程中普遍存在的14個方面的問題,提出了解決這些問題的7個對策和建議,以期保證中藥材基地GAP建設的健康發展和藥品質量的安全。

3.2 優良種質資源研究

魏建和等[45]通過總結近10年來中藥材新品種選育和推廣、新品種認證體系建設等方面取得的新成績,提出相關建議:亟待加快完成人工栽培中藥材品種選育的全覆蓋,盡快完成中藥材新品種全國認證體系建立,建立全國或省級中藥材新品種區試體系,探索生物技術在中藥材育種領域的應用,開展品質性狀遺傳規律研究等。

利用AFLP標記對來自廣西不同產地的18份草珊瑚(Sarcandraglabra)開展遺傳多樣性分析,采用NTSYS 軟件進行聚類和主坐標分析,結果表明[46],從64對AFLP引物組合中篩選出8對用于擴增,共獲得319條清晰可辨條帶,其中多態性條帶251條,多態性位點百分率為78.68%。聚類和主坐標分析表明廣西草珊瑚種質資源的遺傳基礎存在一定的多樣性,但遺傳相似性系數較大(0.630 3~0.836 6),遺傳距離較近。因此,廣西草珊瑚種質資源的遺傳多樣性偏低,應該采取相應措施對草珊瑚資源進行合理保護。

吳茱萸栽培種種質資源遺傳多樣性ISSR分析表明[47],貴州省吳茱萸居群的遺傳多樣性比江西省石虎居群的遺傳多樣性豐富;貴州省石虎居群的遺傳多樣性較高;吳茱萸藥材3個基原品種群的遺傳多樣性從高到低依次為:吳茱萸、石虎和疏毛吳茱萸;不同產地及不同種群群體分化程度都較大,尤其是不同產地居群間達到了0.816 4,不同品種群間的Gst為0.689 8,而基因流的計算結果剛好相反,不同產地居群Nm小于不同種群,但是兩者的基因流都較弱,可能與吳茱萸的繁殖方式多為扦插繁殖有關,同時生長環境的條件也有一定影響。

吳茱萸種質資源ITS2 DNA條形碼實驗結果發現,ITS2序列長度均為220 bp,共產生了17個單核苷酸(SNP)變異位點,占序列總長的7.73%,其中特異性位點7個。石虎與吳茱萸的種間遺傳距離最近為0.036,疏毛吳茱萸與石虎的種間遺傳距離最遠為0.039。基原物種與楝葉吳茱萸的K2-P距離分布在0.042~0.067,疏毛吳茱萸與楝葉吳茱萸遺傳距離最遠,吳茱萸與楝葉吳茱萸遺傳距離最近。

應用RNA測序技術對機械傷害后的白木香木質部轉錄組進行測序,研究其基因表達譜,挖掘其功能基因。研究共獲得40 295條表達序列標簽,平均長度305 bp。經序列合并拼接獲得22 095條單基因簇。通過核苷酸和蛋白質序列等方面的同源性分析,表明其中61.6%與其他生物的已知基因具有不同程度的同源性。通過功能分類研究和代謝途徑分析獲得參與沉香倍半萜合成的序列26條。這些基因的發現為研究沉香倍半萜化合物的生物合成途徑及傷害誘導沉香形成的分子機制提供了基礎數據[48]。

對國產沉香原植物白木香Aquilariasinensis查爾酮合酶(chalcone synthase,CHS)基因AsCHS1編碼區進行克隆,并對其進行生物信息學分析和表達分析。序列分析表明[49],所克隆的AsCHS1基因編碼區開放閱讀框長為1 194 bp,編碼397個氨基酸殘基。qRT-PCR實驗證明該基因表達量在傷害后12 h最大,說明該基因能夠在早期響應傷害脅迫。

4 中藥及天然藥物資源化學研究進展

對于中藥材不同產地、不同采收期、不同加工方式等影響藥材品質的研究較為活躍,兩年間發表相關論文400余篇。可歸納為以下幾方面:

4.1 生態環境與藥材品質的形成

曾燕等[50]分析了藥用植物生長過程中主要的環境因子對藥用植物皂苷類資源性化學成分的影響。分別從藥材產地、藥材采收期、光照和溫度、栽培措施幾個方面說明各個環境因子對藥用植物皂苷成分的影響,分析其中的機制,尋找相關因子對藥用植物皂苷成分影響的理論依據。藥用植物產地、采收季節、生長年限、生長過程中的光照和溫度及其栽培中的水肥管理等因素對藥用植物皂苷成分都產生了很大的影響。因此,優質藥材的生產需考慮其栽培適宜區,確定合理的采收時間,同時在栽培過程中科學的栽培措施是提高藥材產量和有效成分含量的有效手段。對藥用植物采取適當的短期脅迫是優化栽培條件,提高藥材質量的好方法。

從土壤因子、氣候因子、灌溉水因子和大氣因子對藥材品質的影響概述生態環境要素與藥材質量的相關性,研究表明[51],川芎中阿魏酸含量與產地年均溫存在顯著負相關關系,而多糖含量與產地海拔高度有顯著負相關關系,為中藥品質研究和中藥GAP基地建立提供理論依據。

楊利民等[52]綜述了目前有關中藥材道地性理論,藥效成分形成理論及其生態環境、遺傳特性、采收加工技術等對中藥材質量的影響和控制技術等研究進展。指出認識以次生代謝產物為主體的藥效成分的形成積累規律及其生態學、生理學和分子生物學機制,是實現藥材質量控制的重要基礎,也是目前藥材質量控制技術研究的瓶頸。為此,從多學科的視角開展藥材質量形成、積累、變化的基礎理論研究,通過認識規律闡明機制,推動藥材生產中質量控制技術的創新,實現藥材質量安全、可控、穩定、一致的目的。

4.2 藥材適宜采收期資源性化學成分消長動態

段金廒等[7]運用中藥資源化學的研究思路與方法,通過對當歸不同產地、不同采收期的系統評價,建立了客觀表征植物生長發育與環境條件的物候關系對藥材品質形成與藥用部位生物產量相互關聯的多指標綜合評價模式。首次較為系統地闡述了基于中藥資源化學的理論思想和研究方法,從藥材生產過程中的時、空關系與物質動態積累規律諸方面探討并建立客觀評價和確定藥材適宜采收期的方法學,以期對我國中藥材的規范化生產、保障藥材的質量與產量提供理論指導和方法學支撐。

研究表明[53],博落回根、葉、果的最佳采收期分別為5月下旬、6月及8月下旬至9月上旬,從綜合利用資源的角度出發,可在采集葉、果后再采收根。除博落回根外,不同干燥方式處理的博落回葉、果中各指標成分的含量無明顯差異。博落回根、葉、果的最佳產地初加工工藝流程:最佳或適宜采收期采摘→凈選→清洗或擦凈→根、果莢45~65 ℃烘干、曬干,葉45 ℃烘干、陰干、曬干。

在金銀花不同的發育時期、采收時間,采集不同部位的樣品,測定其生長指標、產量和綠原酸、木犀草苷量,結果表明[54],金銀花不同采收期和忍冬不同采收部位的各項生長指標、產量和綠原酸、木犀草苷量差異顯著。金銀花宜在“二白”至“大白”期采摘;第一茬花產量高、質量好,其次為第二茬花;忍冬枝葉綠原酸和木犀草苷的量較高,可以進行有效成分提取和綜合利用。

通過正交試驗設計,確定青蒿中黃酮類和酚酸類化學成分的最佳提取條件,采用UV法,測定不同采收期青蒿中黃酮和酚酸類動態含量變化,結果表明[55],不同采收期青蒿黃酮和酚酸類含量呈現規律性變化,即營養期>初花期>結實期>盛花期。可見,以黃酮類和酚酸類化學成分作為青蒿藥材質量的指標性成分,則青蒿藥材最佳采收期應為營養期,該結果為青蒿藥材采收期的確定和質量評價提供一定的科學依據。

通過研究不同采收期金蓮花3種碳苷黃酮成分的動態變化,發現其不同時期含量存在差異,均以開花后3~6 d為最高[56],確立金蓮花的最佳采收期為開花后3~6 d,為金蓮花取得最大藥用價值提供了科學依據。考察不同采收期東北鐵線蓮藥材中靈仙新苷(Clematichinenoside AR)含量,研究其動態含量變化和最佳采收期,結果表明[57],靈仙新苷以8月下旬到9月中旬的含量最高,確定東北鐵線蓮藥材的最佳采收期為8月下旬到9月中旬。

采用RP-HPLC測定不同采收期的江西新干和樟樹兩個道地產區枳殼藥材中活性成分(柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、川陳皮素、桔皮素、水合橘皮內酯、橘皮內酯、馬爾敏和葡萄內酯)的含量,結果表明[58],枳殼藥材中活性成分的含量隨采收期的推延總體呈下降趨勢,明確江枳殼在大暑前后采收為最佳。

通過測定不同采收期的薄荷中橙皮苷、香葉木苷、香蜂草苷、蒙花苷4個黃酮苷類化學成分的含量,觀察其動態變化規律,結果表明[59],橙皮苷、香蜂草苷、蒙花苷的含量在7月下旬、9月中旬較高,香葉木苷則在7月上旬、9月下旬較高。

研究表明[60],茅蒼術藥材中蒼術素的含量在10月達到最高,1月最低;而β-桉葉醇的含量在11月最高,6月最低;確定湖北英山地區的茅蒼術藥材的最佳采收期初步確定為11月。研究發現[61],菝葜根莖中總黃酮含量11月中旬以前明顯低于11月中旬以后;10—11月初隨著生育期延長,菝葜根莖中總黃酮含量略有下降,11月份以后菝葜根莖中總黃酮含量不斷積累,至12月底菝葜進入休眠期后菝葜根莖中總黃酮的含量最高,達(3.0%±0.1%)。菝葜根莖藥材中落新婦苷和黃杞苷的總含量大于0.10%,符合《中國藥典》2010年版的規定,在12月底含量達到最大值。因此,菝葜藥材的最佳采收期應為菝葜地上部位落葉枯萎、根莖進入越冬休眠期后。

4.3 藥材加工過程與藥材品質形成

藥材初加工是藥材生產與品質形成的重要環節,長期的生產實踐和經驗積累形成了獨具特色、內容豐富的加工方法和技術體系。干燥是采收后中藥材加工過程的最關鍵環節,是影響中藥材質量和經濟價值的重要環節。在這一過程中化學成分的動態變化及其機制研究顯得尤為重要。段金廒等[7]對藥材初加工環節中的“發汗”方法進行論述,部分根及根莖類、皮類、菌核等藥材在干燥加工過程中采用的獨特處理方法,既有利于藥用部位內部水分向外分布易于干燥,同時又調節和促進著生物組織中的酶系統與微生物群落活力,啟動或加速了初生/次生代謝產物的生物轉化與化學轉化過程,直接影響著藥材品質的形成。對藥材初加工“發汗”方法形成的歷史源流、目的與意義進行了闡述,并對這一獨特過程中可能發生的酶活變化及其物質轉化機制等進行分析探討,以期為闡明藥材初加工“發汗”原理、合理地制定藥材初加工技術標準及其SOP提供科學依據。

周銅水等[62]選用丹參Salviamultirrhiza和黃芩Scutellariabaicalensis為研究對象開展了探索性研究工作,結果發現丹參的主要水溶性活性成分丹酚酸B是在干燥過程中大量形成的,在新鮮藥材中含量甚微,即丹酚酸B是一個采后干燥過程的產物,而非栽培期該植物原始積累的成分。進一步研究表明不僅是丹酚酸B,所有其他丹酚酸類成分也是在干燥過程中伴隨著丹酚酸B的大量形成而產生的。丹參酮IIA和隱丹參酮等丹參酮類成分在新鮮根中有較大含量的積累,但在干燥過程中也增加近一倍以上。這些成分在干燥過程中都呈現倒“V”字形的含量變化曲線,即在干燥過程的早期迅速增加,隨干燥時間的延長而逐步下降,增長曲線中丹酚酸B等成分的含量與樣品水分呈明顯負相關。黃芩藥材中黃芩苷及4種黃酮總量在干燥過程中也呈倒“V”字形變化,在干燥初始階段這些成分的含量可增加1倍以上。可見,采收后干燥早期過程可誘導丹參、黃芩等根類藥材中的活性成分大量形成。

陳隨清等[63]以梓醇、毛蕊花糖苷、總多糖、氨基酸、浸出物等的含量為指標,對懷地黃加工過程中化學成分的變化規律進行了研究。結果表明,梓醇、毛蕊花糖苷、總多糖含量變化較大,梓醇0.47%~2.42%、毛蕊花糖苷0.023%~0.050%、總糖6.94%~21.81%,而氨基酸、醇溶性浸出物和水溶性浸出物的含量變化較小,氨基酸2.66%~3.62%、95%乙醇浸出物4.21%~6.66%、水溶性浸出物74.14%~80.83%。

采用陰干、曬干、低溫干燥法及高溫快速干燥法加工處理淫羊藿藥材,對加工后的藥材分別采用常溫貯藏、常溫避光貯藏及冷藏(溫度4~6 ℃,相對濕度45%~55%)方法,分別貯藏0、1、2、4、6、9、12、15、18、21、24個月,采用HPLC和紫外分光光度法分別測定其中淫羊藿苷和總黃酮。結果表明,淫羊藿藥材的產地加工方法應以140~180 ℃快速鼓風干燥法為宜,淫羊藿苷含有量較傳統的陰干或曬干法提高2~15倍。從活性成分的含量損失、藥材外觀色澤變化及節約生產成本綜合考慮,淫羊藿藥材以常溫避光貯藏不超過18個月為宜[64]。

5 植物化學分類學及親緣學研究

在對甘草屬植物化學成分進行全面總結的基礎上,建立了甘草化合物數據庫,并利用該庫對化學成分重新分類,對各類化合物的分布和藥用甘草的化學成分進行統計。結果顯示[65],至今甘草屬植物共報道化合物422個,按結構可以分為黃酮類、香豆素類、三萜皂苷和苷元類、二苯乙烯類4大類,以及少量其他類型化合物。目前從烏拉爾甘草中分離得到的化合物共170個,光果甘草中共134個,脹果甘草中共52 個,云南甘草中共31個。增加了“二苯乙烯類”的分類類別,并將“二芐甲烷型”歸為查爾酮。

以美洲大蠊(蟑螂)的體內次生代謝物進行研究,通過分離提取、結構表征和對其抗菌活性的測定,集中揭示了昆蟲化學與植物化學之間的生態學相關的信息,闡明植物和昆蟲在自然條件下得以共同進化的原理,研究結果證明[66],昆蟲與植物次生代謝物在生態和生物活性上既具有部分作用或反作用關系,又有與其各自生命活動相關而產生的獨特活性物質的修飾表達和衍生的新化合物,然而化學分類學應用于昆蟲分類仍在探索之中。

利用高效液相色譜技術對24種1變種茶科柃屬植物28份樣品的化學成分進行檢測,并以各樣品中色譜峰的相對保留時間對柃屬植物的特征化學成分進行標記,最終統計到23個特征色譜峰用于化學分類研究。結果顯示,柃屬植物色譜峰在種內穩定出現,在種間則呈現多樣性,可用于物種的鑒別。采用UPGMA法和NJ法對色譜峰進行聚類分析,并根據兩種聚類樹型圖討論了化學成分的分類學意義[67]。

6 中藥資源學科建設發展

6.1 《中藥資源與開發》專業系列教材編寫與出版

2008年7月13日在貴州凱里舉行“2008海峽兩岸CSNR全國第八屆天然藥物資源學術研討會”期間,正式成立了“中藥資源教育研究會”,其中共有包括中醫藥院校、綜合性大學、農業大學等在內的43所院校,以促進中藥資源學科及其相關課程的教學與科學研究。在大會上,理事長單位南京中醫藥大學提出“編寫一套適合于中藥資源與開發專業的系列教材”的建議,得到了與會代表的一致贊同。由南京中醫藥大學段金廒教授任總主編的《中藥資源與開發》專業系列規劃教材已編寫完成并出版,共有12門課程,分別為《中藥資源學》、《藥用植物學》、《藥用植物生理生態學》、《藥用植物栽培學》、《中藥生物技術》、《中藥資源化學》、《植物化學分類學》、《中藥分析學》、《中藥材加工與養護學》、《中藥材商品學》、《中藥資源綜合利用與產品開發》、《本草學》。

6.2 中藥資源學教學與改革

為了適應國家和經濟社會對農科大學生實踐動手能力培養的要求,開展了基于協調模式的中藥資源專業實踐教學體系的研究,在分析以往的實踐教學體系存在弊端基礎上[68],提出了協同模式的實踐教學體系的內涵,包括資源協同、專業協同和崗位協同,并對新型的實踐教學體系進行了闡述,包括基本技能訓練、專業綜合訓練、設計創新訓練。為高等院校的創新型人才培養和實踐教學帶來一些啟發,具有重要的現實意義。

丁常宏等[69]提出了《中藥資源學》教材改革的幾點建議:以可持續發展為主線,強調中藥資源的綜合利用;充實豐富中藥資源調查、中藥開發利用評價、中藥種質資源、生物技術在中藥資源開發中的應用等方面的內容,并引入最新的研究進展;藥用植物標本的采集、中藥資源分布等內容有所刪減,對中藥資源化學等內容應有所保留。

何先元[70]統計了《中國藥典》2010年版一部收載的中藥資源的基本情況,分析了《中國藥典》對中藥發展的現實意義,探討了《中國藥典》對中藥資源教學的指導作用,總結了利用《中國藥典》提高中藥資源教學質量的方法,并對人才培養和資源開發利用提出了思考和建議。

中藥資源學課程理論體系中蘊藏著深厚的哲學思想,因此,在中藥資源學的教學過程中,結合具體理論知識,適時向學生闡明辯證唯物主義觀點,是提高中藥資源學教學質量、幫助學生“活學活用”的一種有效途徑和方法[71]。在中藥資源學教學中,在傳授相關知識的同時,向學生滲透哲學的觀點,并用辯證唯物主義的思維方式去解釋、闡述中藥資源學內容,不但可使學生快速地了解和掌握其中的奧秘,還能使學生更好地認識生命現象的本質規律。

針對網絡直觀生動和方便快捷的實用特點,利用網絡交互教學模式[72],以中藥資源與開發專業核心課程為研究對象,對現有教學模式中存在的問題進行分析,建立中藥資源與開發專業網絡交互教學模式支撐平臺。

此外,尚有學者提出了以促進學生自主創新能力發展為宗旨的“自主創新學習”模式的教學改革與探索[73]。

綜上表明,隨著中藥資源作為國家戰略資源地位的確定,以及以中藥及天然藥物資源為原料的資源產業鏈日益延伸,中藥資源經濟在國民經濟和生物醫藥行業的地位日益凸顯,國內外消費市場對綠色產品的需求不斷提高。科學技術水平的發展和牽引將有利于中藥資源領域的科學研究、學科建設、人才培養和產業化發展,有利于中藥資源的合理采收、加工與深度開發利用,從而形成科學合理的開發利用資源、節約資源,促進循環經濟的可持續發展。

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ResearchProgressandDisciplineConstructionofChineseMedicinalMaterialandNaturalMedicinalResourcesfrom2012to2013

DUAN Jinao*,WU Qinan,SU Shulan,GUO Sheng,YAN Hui

(Jiangsu Collaborative Innovation Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization,and National and Local Collaborative Engineering Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization and Formulae Innovative Medicine,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210023,China)

This paper summarized the progress of Chinese medicinal material and natural medicinal resources research of 2012-2013 in China,which mainly included the research ideas and methods,resources survey and research,production status and GAP base construction,research progress of resources chemistry,conservation and comprehensive utilization,development of the discipline,etc.Through reflecting the academic achievement and the contribution of science and technology in the field of scientific and technical workers,the paper would play a guiding and pushing effect to scientific research,discipline construction,talent cultivation and industrial development for the Chinese medicinal material and natural medicinal resources.

Chinese medicinal material resources; Natural medicinal resources; Scientific research; Discipline construction; Industrial development; Talent cultivation

2014-09-01)

國家“十二五”科技支撐計劃項目(2010BA I04B 03);江蘇省高校中藥資源產業化過程協同創新中心建設專項(2013);江蘇省“333高層次人才工程”第一層次培養對象資助項目(2013)

*

段金廒,教授,博士生導師,南京中醫藥大學副校長,中國自然資源學會中藥及天然藥物資源專業委員會主任委員,國家973計劃首席科學家;Tel:(025)-85811116,E-mail:dja@njutcm.edu.cn

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.09.001

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