HPLC法測定枸地氯雷他定顆粒的含量

任亞東，施猛，孫秋艷，劉志強 （揚子江藥業集團廣州海瑞藥業有限公司，廣東 廣州 510663）

枸地氯雷他定 （Desloratadine Citrate Disodium）為長效三環類抗組胺藥，起效快，作用強，主要用于治療過敏性鼻炎，以及慢性特發性蕁麻疹等瘙癢性皮膚病。枸地氯雷他定為氯雷他定的主要活性代謝產物，起效更快，生物利用度更優，具有強大的、選擇性的拮抗外周H受體作用和抗炎作用［1］。有實驗表明，枸地氯雷他定比氯雷他定治療慢性蕁麻疹 （Chronic urticaria，CU）患者的療效更安全、有效，值得進一步推廣使用［2］。現擬建立枸地氯雷他定顆粒HPLC含量測定方法，為枸地氯雷他定顆粒的進一步研究提供可靠的分析方法和理論依據。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

地氯雷他定對照品，來源于中國食品藥品檢定研究院，枸地氯雷他定顆粒及空白輔料，由揚子江藥業集團廣州海瑞藥業有限公司提供；乙腈 （色譜純）、磷酸二氫鉀 （分析純）、磷酸 （分析純）、三乙胺（分析純）。

1.2 儀器

Agilent 1260型高效液相色譜儀，Agilent 1260VWD紫外吸收檢測器，XS 205電子天平。

2 含量測定方法

2.1 色譜條件

依照高效液相色譜法 （中國藥典2010年版二部附錄VD［3］），以十八烷基鍵合硅膠柱 （5μm，150mm×4.6mm）為色譜柱，以乙腈－0.01mol／L磷酸二氫鉀緩沖鹽溶液 （取磷酸二氫鉀1.37g，溶于900ml水中，加入三乙胺2.5ml，用磷酸調pH至2.5，用水定容至1000ml）（22∶78）為流動相；檢測波長為282nm，柱溫為35℃，流速為1.0ml／min，進樣量為10μl。

2.2 樣品配制

供試品溶液：取本品內容物10包，研細，取粉末適量 （約相當于枸地氯雷他定2.2mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相適量使溶解，用流動相定容，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

對照品溶液：取地氯雷他定對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋成濃度為0.025mg／ml的溶液，作為對照品溶液。

2.3 含量測定

系統適用性試驗：照高效液相色譜法，精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，注入色譜儀，記錄色譜圖；主峰按地氯雷他定計，塔板數不低于2500，主峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。

樣品測定：精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，注入色譜儀，記錄色譜圖；按外標法以峰面積計算，即得。

3 方法學研究

3.1 輔料干擾試驗

按處方比例稱取空白輔料適量，按2.2項下供試品溶液配制，作為空白輔料溶劑；以流動相為空白溶劑；精密量取空白溶劑、空白輔料溶劑及2.2項下的供試品溶液各10μl，注入色譜儀，記錄圖譜。結果顯示，空白輔料溶液在供試品溶液的主峰位置無干擾峰，輔料對含量測定無干擾。

3.2 線性與范圍

取地氯雷他定對照品適量，按2.2項下對照品溶液配制方法配制成濃度分別為5、10、20、30、40μg／ml的地氯雷他定溶液，按含量測定方法測定峰面積，數據見表1。

表1 含量測定地氯雷他定線性試驗結果

以進樣濃度為橫坐標，地氯雷他定峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，結果顯示，地氯雷他定在5.375～43.000μg／ml的濃度范圍內與其峰響應值呈線性關系，線性方程為Y＝0.0558X－0.0025，相關系數為r＝0.9999 （n＝5）。

3.3 準確度

按處方比例取空白輔料，再分別稱取地氯雷他定對照品17、22、27mg，精密稱定，分別置于10ml量瓶中，加流動相適量溶解并定容至刻度，搖勻，濾過；分別量取續濾液1ml于50ml量瓶中，用流動相定容，配制成濃度分別為80%、100%、120%的供試品溶液，每個濃度各配制3份。照含量測定方法測定，記錄色譜圖，計算其回收率，結果見表2。

結果顯示，枸地氯雷他定的含量測定加樣回收率均在99%～101%之間，平均回收率為100.2%，RSD為0.6% （RSD≤2%），符合要求，說明該方法具有良好的準確度。

表2 含量測定的回收率試驗結果

3.4 精密度

精密量取2.2項下的供試品溶液10μl，注入色譜儀，連續進樣6次，測定峰面積，結果見表3。結果顯示，各峰面積的RSD為0.2% （RSD≤2%），該含量測定方法的精密度良好。

表3 含量測定的精密度結果

3.5 重復性

按2.2項下的方法平行配制供試品溶液6份，對照品溶液1份，按含量測定項下方法測定峰面積，結果見表4，結果顯示，6份樣品的測定結果均在93.0%～107.0%之間，且RSD為0.3% （RSD≤2%），該含量測定方法具有良好的重復性。

表4 含量測定的重復性結果

3.6 溶液穩定性

取2.2項下的供試品溶液1份，分別于配樣后0、1、2、4、8、12、24h進樣，測定峰面積，結果見表5。結果表明樣品溶液至少在24h內穩定 （RSD≤2%）。

表5 含量測定的溶液穩定性試驗結果

4 結語

取對照品溶液在200～400nm波長范圍內進行光譜掃描，結果在最大吸收波長為282nm，且在此波長下空白輔料無干擾，故選擇282nm作為枸地氯雷他定顆粒的檢測波長。

綜上所述，本方法測定結果準確，精密度高，可以作為枸地氯雷他定顆粒的含量測定方法。

［1］羅建華，肖漢龍，王軍 .復方甘草酸苷聯合枸地氯雷他定治療慢性蕁麻疹 ［J］.實用醫藥雜志，2011，28（8）：697.

［2］趙靜，石慶，柳兵 .枸地氯雷他定和氯雷他定片治療慢性蕁麻疹的療效比較 ［J］.中國醫藥導刊，2012，14（4）：636，607.

［3］中華人民共和國藥典委員會 .中華人民共和國藥典·二部 ［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010.