Msi1基因沉默對人肝癌HepG2細胞的影響

王燕，章建國，張曙，靳欽，卞婷婷

（南通大學附屬醫院病理科，江蘇226001）

Msi1基因沉默對人肝癌HepG2細胞的影響

王燕*，章建國，張曙，靳欽，卞婷婷

（南通大學附屬醫院病理科，江蘇226001）

目的：探討siRNA沉默Msi1基因表達后，人肝癌HepG2細胞的增殖與凋亡的情況。方法：設計合成針對Msi1 mRNA序列的siRNA多條序列，分別轉染人肝癌HepG2細胞。使用RT–PCR方法檢測各組細胞Msi1基因表達情況；Western blot法檢測survivin蛋白、caspase3蛋白表達情況；MTT法、平皿克隆實驗檢測HepG2細胞增殖情況；流式細胞術檢測各組HepG2細胞凋亡情況。結果：（1）RT-PCR結果：轉染后24 h后，序列a,b,c轉染效率分別為65%，64%及62%。其抑制率分別是Msi1 siRNAa(68%)、Msi1 siRNAb(56%)、Msi1 siRNAc(35%)。（2）流式細胞術檢測各組細胞凋亡：空白組、陰性組、脂質體組、Msi1 siRNAa組凋亡率分別為（4.14±0.26）%、（4.51±0.78）%、（4.19±1.21）%，（16.8±0.26）%，Msi1 siRNAa組與空白對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)。（3）Msi1 siRNAa最能有效抑制肝癌HepG2細胞中Msi1表達，與空白對照組比較，Msi1 siRNAa組HepG2細胞生長、增殖速度明顯減緩(P＜0.05)；survivin蛋白表達水平顯著下調(P＜0.05)，而caspase3蛋白表達水平上調(P＜0.05)；Msi1 siRNAa組凋亡率增高(P＜0.05)。結論：沉默Msi1可抑制人肝癌HepG2細胞的增殖，誘導其凋亡。

原發性肝癌；Msi1基因；RNAi；凋亡；增殖；HepG2細胞；逆轉錄聚合酶鏈反應；Western blot檢測；流式細胞術

目前，肝癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，在中國原發性肝癌病死率高。而其錯綜復雜的發病機制一直以來被廣大學者廣泛研究。可喜的是腫瘤干細胞和腫瘤標記物的作用及研究越來越深入，人類對其認識越來越清楚。目前有研究發現，Msi1基因可以作為腫瘤干細胞和(或)祖細胞的標記物[1]。不僅如此，它在腫瘤的發生發展中的作用巨大，很可能作為主要調節者[2]影響腫瘤的發生與發展。……