老年食管鱗癌患者術(shù)后組織中乙醛脫氫酶1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的臨床意義

馬圣偉 黃江平 崔豐和

(荊州市中心醫(yī)院心胸外科， 湖北 荊州 434020)

食管鱗癌病情進(jìn)展快，預(yù)后差。近來(lái)多項(xiàng)研究顯示患者病變進(jìn)展中多種基因和蛋白出現(xiàn)明顯變化。乙醛脫氫酶(ALDH)1是ALDH家族的重要成員，參與機(jī)體多種組織的分化和基因表達(dá)，也是正常干細(xì)胞分化的重要物質(zhì)〔1〕。近年來(lái)學(xué)者發(fā)現(xiàn)其在惡性腫瘤中表達(dá)明顯升高〔2〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是重要的血管生成促進(jìn)因子，可以引起腫瘤間質(zhì)新生血管的形成〔3〕。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)食管鱗癌中ALDH1和VEGF的表達(dá)及二者的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1臨床資料 收集2010年1月至2012年12月在我院行食管鱗癌根治手術(shù)切除后的新鮮標(biāo)本102例為觀察組，組織于術(shù)后立即取材，并置于-80℃冰箱中凍存。年齡60～81(平均68.1)歲，其中男52例，女50例，患者術(shù)前均未進(jìn)行任何放、化療，病例納入均經(jīng)病理學(xué)主任醫(yī)師再次閱片確診，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。高分化38例，中分化42例，低分化22例。同時(shí)選取經(jīng)病理證實(shí)切端無(wú)癌的正常食管黏膜新鮮組織76例作為對(duì)照組，年齡60～80(平均68.6)歲，其中男40例，女36例。兩組一般臨床資料無(wú)明顯差別(P>0.05)，具有可比性。

1.2流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ALDH1和VEGF的表達(dá) ALDH1和VEGF蛋白的濃縮液均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，按不同比例進(jìn)行稀釋后進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最佳比例進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。取出凍存新鮮組織，立即置于70%酒精中固定，制備單細(xì)胞懸液，應(yīng)用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)用系統(tǒng)自帶的軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.3結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 應(yīng)用熒光指數(shù)(FI)表示蛋白的含量。FI=(腫瘤中蛋白表達(dá)的熒光強(qiáng)度-對(duì)照樣品的平均熒光強(qiáng)度)/對(duì)照樣品的平均熒光強(qiáng)度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組ALDH1和VEGF蛋白表達(dá)量的比較 觀察組中ALDH1(1.32±0.43)和VEGF的表達(dá)(1.49±0.29)明顯高于對(duì)照組(1.00±0.31、1.00±0.28)(t=10.25,P<0.000 1;t=15.53,P<0.000 1)。

2.2觀察組不同臨床特征中ALDH1和VEGF表達(dá)的比較 觀察組ALDH1和VEGF的表達(dá)與腫瘤的最大徑、浸潤(rùn)深度、轉(zhuǎn)移、分化程度、Ki67增殖指數(shù)密切相關(guān)。見(jiàn)表1。

表1 觀察組不同臨床特征中ALDH1和VEGF表達(dá)的比較

2.3觀察組ALDH1和VEGF表達(dá)的關(guān)系 觀察組ALDH1和VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.45，P=0.035 1)。

3 討 論

食管鱗癌在其進(jìn)展過(guò)程中，多種蛋白常出現(xiàn)明顯改變。ALDH1是催化細(xì)胞內(nèi)乙醛氧化為乙酸的細(xì)胞溶質(zhì)酶，參與多種組織的分化與基因表達(dá)，也是正常干細(xì)胞生長(zhǎng)的必要物質(zhì)〔4,5〕。人類的ALDH1基因定位于9q21染色體上，由56 kb堿基對(duì)構(gòu)成，包含13個(gè)外顯子，編碼相對(duì)分子量為54 kD的蛋白。近來(lái)相關(guān)性學(xué)者認(rèn)為ALDH1是干細(xì)胞的標(biāo)志物，也可以作為分離干細(xì)胞的常規(guī)標(biāo)記蛋白〔6,7〕。ALDH1的作用可能具有多向性。VEGF是在干細(xì)胞分化基礎(chǔ)上形成的蛋白，對(duì)腫瘤新生血管形成的作用明顯〔8〕。VEGF對(duì)血管生成的促進(jìn)作用表現(xiàn)為多種方面，主要是對(duì)基質(zhì)中CD34、CD31、CD105陽(yáng)性的血管，腫瘤間質(zhì)血管生成多，使腫瘤的營(yíng)養(yǎng)豐富，氧供豐富，腫瘤生成和代謝快，侵襲能力增加，轉(zhuǎn)移潛能增強(qiáng)。

本實(shí)驗(yàn)提示ALDH1和VEGF在食管鱗癌中具有明顯的協(xié)同作用，即腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)ALDH1的產(chǎn)生，同時(shí)引起VEGF的產(chǎn)生及分泌，促進(jìn)CD34、CD105陽(yáng)性的腫瘤新生血管的生成，加速腫瘤生長(zhǎng)及侵襲作用。食管鱗癌發(fā)生時(shí)ALDH1的表達(dá)增多，對(duì)腫瘤的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移有明顯的促進(jìn)作用〔9,10〕。ALDH1與血管生成有關(guān)，尤其是與VEGF的正向協(xié)同作用，使ALDH1與血管新生密切聯(lián)系在一起〔11〕。VEGF被激活后，促進(jìn)腫瘤內(nèi)及腫瘤周邊血管的新生，加速腫瘤的生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。聯(lián)合檢測(cè)ALDH1和VEGF高表達(dá)提示腫瘤進(jìn)展加速。同時(shí)由于浸潤(rùn)深度、分化程度及細(xì)胞增殖指數(shù)均與患者的預(yù)后相關(guān)，因此聯(lián)合檢測(cè)ALDH1和VEGF的表達(dá)可能對(duì)判斷老年人食管鱗癌的預(yù)后有一定價(jià)值。

4 參考文獻(xiàn)

1吳美華, 黃錦成, 馮振博. 乳腺癌中ALDH1的表達(dá)及其與細(xì)胞凋亡、caspase-3的關(guān)系〔J〕. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2012; 28(7): 737-9.

2黃 華, 章建國(guó), 仇曉軍. 乙醛脫氫酶1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義〔J〕. 山東醫(yī)藥, 2011; 34(49): 45-6.

3Geng L, Chaudhuri A, Talmon G,etal. TGF-beta suppresses VEGFA-mediated angiogenesis in colon cancer metastasis〔J〕. PLoS One, 2013; 8(3): e59918.

4張海濤, 金美善, 石愛(ài)平, 等. 腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物ALDH1在非浸潤(rùn)性膀胱癌組織中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕. 吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版), 2013; 39(2): 326-8.

5Schwartz T, Stark A, Pang J,etal. Expression of aldehyde dehydrogenase 1 as a marker of mammary stem cells in benign and malignant breast lesions of Ghanaian women〔J〕. Cancer, 2013; 119(3): 488-94.

6Zhong Y, Lin Y, Shen S,etal. Expression of ALDH1 in breast invasive ductal carcinoma: an independent predictor of early tumor relapse〔J〕. Cancer Cell Int, 2013; 13(1): 60.

7Wu A, Luo W, Zhang Q,etal. Aldehyde dehydrogenase 1, a functional marker for identifying cancer stem cells in human nasopharyngeal carcinoma〔J〕. Cancer Lett, 2013; 330(2): 181-9.

8Pang L, Zhang Y, Yu Y,etal. Resistin promotes the expression of vascular endothelial growth factor in ovary carcinoma cells〔J〕. Int J Mol Sci, 2013; 14(5): 9751-66.

9黃江生. 膽總管腺癌Musashi-1和ALDH1表達(dá)及其臨床病理意義〔J〕. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2011; 21(35): 4409-11.

10李秀清, 關(guān)艷杰, 呂小明, 等. 腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物ALDH1及CD133在乳腺癌中的表達(dá)及意義〔J〕. 中國(guó)婦幼保健, 2012; 27(26): 4118-20.

11劉愛(ài)東, 龐久玲, 劉士生. 食管鱗癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和CD105表達(dá)關(guān)系的研究〔J〕. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2009; 29(7): 886-7.