微小染色體維持蛋白7和活化蛋白激酶C受體在非小細胞肺癌中的表達及意義

鐘云華 宋 波 劉 俊 鄭 梅 陳 滟 叢樹園 孫 睿

(云南省第一人民醫院內科干部保健科，云南 昆明 650032)

非小細胞肺癌發生發展過程中多種基因和蛋白異常表達，使腫瘤的侵襲性增加。微小染色體維持蛋白7(MCM7)屬于MCM蛋白家族，是啟動DNA復制起始點的復制準許因子之一，參與DNA的合成，促進細胞的增殖〔1〕。活化蛋白激酶C受體-1(RACK1)屬于天冬氨酸/色氨酸-40結構域蛋白家族成員，能與多種重要的細胞內蛋白質和信號分子形成協同作用，調節信號轉導、周期演進、細胞生長和運動等功能〔2〕。本文關注MCM7和RACK1在非小細胞肺癌中的作用及二者的關系。

1 材料與方法

1.1臨床資料 選取2011年1月至2012年12月在我院確診為非小細胞肺癌的患者98例作為觀察組，均行手術治療，術后標本均應用甲醛溶液固定。均符合WHO中非小細胞肺癌的診斷標準。男50例，女48例，年齡52～73(平均67.5)歲。選取70例腫瘤切除后肺組織的切緣組織作為對照組，并嚴格經病理醫師證實為正常的肺組織，男35例，女35例，年齡53～72(平均66.7)歲。

1.2MCM7和RACK1蛋白檢測 MCM7和RACK1蛋白的濃縮液均購自北京中杉金橋生物技術公司，按不同比例進行稀釋進行預實驗，選擇最理想的濃度進行正式實驗。蛋白的檢測應用免疫組化SP法、DAB染色，嚴格質量控制，減少各種誤差。

1.3結果判定標準 MCM7陽性部位為細胞核，RACK1陽性部位為細胞質和(或)細胞膜，以出現棕黃色顆粒為陽性反應細胞，選擇10個400倍視野并計數，以陽性率≥25%為陽性，以陽性率<25%為陰性。

1.4統計學方法 應用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗或相關分析。

2 結 果

2.1MCM7和RACK1在觀察組與對照組中表達陽性率的比較 MCM7和RACK1在觀察組中表達的陽性率明顯高于對照組(P<0.01)，見表1。

表1 MCM7和RACK1在兩組中表達陽性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中MCM7和RACK1的表達在不同臨床病理特征中的關系 觀察組中MCM7和RACK1的表達均與腫瘤的最大徑、胸膜侵犯、臨床分期、淋巴結轉移、脈管浸潤密切相關(P<0.05)，見表2。

表2 觀察組中MCM7和RACK1的陽性表達

2.3觀察組中MCM7和RACK1表達的相關性分析 觀察組中MCM7和RACK1(r=0.48，P=0.041 0)的表達具有正相關性。

3 討 論

非小細胞肺癌發展過程中可以表現出明顯的侵襲和轉移，多種蛋白的變化促進了此過程。在真核細胞中，DNA復制合成起始于一個特定的起始復制點，這個位點是保證基因組在每個細胞周期僅復制1次的必要條件〔3〕。正常情況下MCM7參與完成正常的準許功能，當MCM7表達失調時可以引起染色體的缺損，促使腫瘤發生〔4〕。當腫瘤發生后，MCM7的異常表達還可以破壞細胞骨架和改變細胞凋亡等參與腫瘤的進展〔5〕。RACK1含有7個高度保守的結構域，作為活化蛋白激酶(PKC)的錨定蛋白，能將PKC從胞質轉位到胞膜而發揮對PKC的調節作用〔6，7〕。有學者認為RACK1表達上調時可導致腫瘤的化療受阻，其機制是定位于溶酶體的RACK1與PKC結合，使真核細胞翻譯起始因子磷酸化，再使細胞生長因子與生存的蛋白因子翻譯，引起化療的抵抗〔8，9〕。因此RACK1不僅對腫瘤的發生發展有影響，還對治療有明顯的影響。

本實驗結果提示MCM7和RACK1在腫瘤的形成和進展中具有重要作用。在此過程中MCM7異常表達使細胞正常復制的位點發生變化，引起腫瘤的失控性增生。而且MCM7可以調節細胞因子、生長因子和連接蛋白，調節生長因子的生物利用度，使腫瘤細胞具有侵襲性。RACK可通過調節細胞代謝而影響細胞之間的信息傳遞〔10〕。RACK還可以調節細胞分化及遷移，進而可能影響腫瘤的生物學行為，這與Nagashio等〔11〕認為RACK1是肺癌新的重要生物標志物的結論相同。本實驗結果提示MCM7和RACK1可能具有通路作用，由于RACK1/MCM7在腫瘤中表達增高，其促癌作用明顯，此過程活化后，可以激活其相應的靶蛋白，引起腫瘤的快速生長、侵襲和轉移。本實驗結果提示MCM7和RACK1參與腫瘤的浸潤、脈管侵犯和淋巴累犯。由于以上因素均與預后相關，因此應用免疫組化檢測MCM7和RACK1的表達可能對判斷非小細胞肺癌的預后有一定臨床意義。

4 參考文獻

1李書勤，倪觀太，孔麗娜，等.微型染色體維持蛋白7在宮頸癌早期診斷和預防中的價值〔J〕.中國實用婦科與產科雜志，2012；28(1)：34-6.

2Wang Z，Zhang B，Jiang L,etal.RACK1，an excellent predictor for poor clinical outcome in oral squamous carcinoma，similar to Ki67〔J〕.Eur J Cancer，2009；45(3)：490-6.

3史 琳，張安文,羅 宇，等.甲狀腺癌中MCM7和P27的表達及臨床意義〔J〕.實用腫瘤雜志，2011；26(4)：390-2.

4任占平,石 吉，張 芫.子宮內膜樣腺癌組織中P27、MCM7蛋白的表達及意義〔J〕.腫瘤防治雜志，2011；38(1)：73-5.

5張文蘋，王貴吉，吳晶晶，等.MCM7、MCM5及cyclin E在直腸癌中的表達及臨床意義〔J〕.第三軍醫大學學報，2011；33(5)：527-9.

6Cao XX，Xu JD，Xu JW,etal.RACK1 promotes breast carcinoma migration/metastasis via activation of the RhoA/Rho kinase pathway〔J〕. Breast Cancer Res Treat，2011；126(3)：555-63.

7Cao XX，Xu JD，Liu XL,etal.RACK1：a superior independent predictor for poor clinical outcome in breast cancer〔J〕.Int J Cancer，2010；127(5)：1172-9.

8朱 薇，賀修強，肖志強，等.RACK1在大腸癌癌變過程中的表達和意義〔J〕.國際病理科學和臨床雜志，2013；33(1)：22-5.

9Bourd-Boittin K，Le Pabic H，Bonnier D,etal.RACK1，a new ADAM12 interacting protein.Contribution to liver fibrogenesis〔J〕.J Biol Chem，2008；283(38)：26000-9.

10Cao XX，Xu JD，Xu JW,etal.RACK1 promotes breast carcinoma proliferation and invasion/metastasis in vitro and in vivo〔J〕.Breast Cancer Res Treat，2010；123(2)：375-86.

11Nagashio R，Sato Y，Matsumoto T,etal.Expression of RACK1 is a novel biomarker in pulmonary adenocarcinomas〔J〕.Lung Cancer，2010；69(1)：54-9.