腦膠質瘤CT灌注成像時腦血流容積值與術后組織中癌胚抗原相關細胞黏附分子、神經纖毛蛋白和血管內皮生長因子表達的關系

葉春濤 嵇 鳴 王 臣

(復旦大學附屬華東醫院放射科(MR室),上海 200040)

腦膠質瘤病變發生過程中血管增生明顯，且對病變進展有重要意義，目前學者發現了多種腫瘤血管生成的促進物質，也證實了其以腫瘤進展的促進作用。腦灌注成像技術是通過無創分析腦腫瘤的血管生成及血流情況，對判斷腫瘤的性質有一定價值〔1〕。癌胚抗原相關細胞黏附分子(CEACAM)6、神經纖毛蛋白(NRP)2和血管內皮生長因子(VEGF)均為與腦膠質瘤生物學行為和預后相關的蛋白，三者對促進腫瘤性病變進展有重要價值〔2～4〕。本研究觀察腦膠質瘤患者應用CT灌注成像技術時腦血流容積值(rCBV)與術后組織中CEACAM6、NRP2和VEGF表達的關系。

1 資料和方法

1.1臨床資料 我院于多層螺旋(MS)CT灌注檢查后1個月內行腫瘤切除手術的腦膠質瘤患者98例，均經術后病理確診，分類及分級均符合世界衛生組織(WHO)的診斷標準。排除標準：①伴有嚴重內臟器官疾病；②伴有其他器官惡性腫瘤；③有精神系統疾病史；④有頭顱損傷或手術病史。男58例，女40例，年齡52～85(平均65.2)歲。

1.2MSCT灌注成像檢查方法 應用GE Lightspeed 16iMSCT機，先定位，再進行灌注掃描。經肘前靜脈快速團注對比劑，3.5 ml/s，總劑量50 ml，延遲時間5 s，總掃描時間50 s。應用Perfusin2軟件進行灌注成像，選取流入動脈和流出靜脈，計算并顯示灌注圖像，顯示CBV灌注圖像，找出CBV值最大區域，計算rCBV值。

1.3術后組織中CEACAM6、NRP2和VEGF檢測 CEACAM6、NRP2和VEGF 3種抗體濃縮液均購自武漢博士德生物工程公司，依不同比例進行稀釋后行預實驗，觀察最理想的表達，應用該濃度進行正式實驗。應用免疫組化SP法，均由同一病理主管技師完成，嚴格質量控制。

1.4統計學方法 采用SAS6.12軟件進行t檢驗、線性相關性分析。

2 結 果

2.1不同分級膠質瘤患者rCBV的比較 Ⅰ～Ⅱ級膠質瘤患者rCBV值(n=46,4.84±1.22)較Ⅲ～Ⅳ級(n=52,7.52±2.13)明顯低(t=6.75，P=0.029 3)。

2.2不同分級膠質瘤患者術后組織中CEACAM6、NRP2和VEGF表達 不同分級分組中CEACAM6、NRP2和VEGF表達的陽性率差別顯著(P<0.001)，即高分級患者CEACAM6、NRP2和VEGF表達的陽性率高。見表1。

2.3膠質瘤患者rCBV值與CEACAM6、NRP2、VEGF表達的關系 rCBV與CEACAM6(r=0.46,P=0.043 2)、rCBV與NRP2(r=0.43,P=0.025 3)、rCBV與VEGF(r=0.56,P=0.010 9)的表達均正相關。

表1 不同分級膠質瘤患者術后組織CEACAM6、NRP2和VEGF陽性表達的比較〔n(%)〕

3 討 論

膠質瘤進展過程中，血管增生活躍。膠質瘤的血管生成不僅是腫瘤生長的重要支持成分，也是腫瘤分級的重要病理基礎。腦CT灌注成像是腦功能成像的重要方法之一，通過觀察腦組織或局部腫瘤組織的血液灌注狀態及血管化的程度，無創性地判斷病變程度〔5,6〕。其理論基礎是核醫學的放射性示蹤劑稀釋理論和中心容積定律。CT灌注成像各參數反映了腫瘤組織的微血管分布和血流灌注的改變〔7〕。近年學者關注膠質瘤病變發展過程中伴隨多種癌基因及血管生成因子的狀態〔8,9〕。CEACAM6是機體內免疫球蛋白超家族的重要成員，是細胞表面存在的一種糖蛋白，通過糖基磷脂酰肌醇連接在局部的細胞膜上〔10〕。CEACAM6分布在上皮細胞和血管內皮細胞上，在促腫瘤因素的作用下，CEACAM6的表達可以升高，使腫瘤細胞增殖活性提高，腫瘤細胞的生長加速，侵襲能力增強〔11〕。學者〔12〕認為CEACAM6可以促進腫瘤血管生成，因此CEACAM6的作用可能具有多元性。當CEACAM6被激活后，可促進腫瘤內及腫瘤周邊血管的新生，加速腫瘤的生長，促進腫瘤轉移〔13〕。NRP2是從乳腺癌細胞系中純化得到的〔14〕，其與血管的關系密切，也有學者〔15〕將NRP2作為VEGF的新型受體，即一個潛在的血管生成促進因子，因此NRP2與VEGF可能有明顯的協同作用。VEGF與腫瘤的生長伴隨發生，是在干細胞分化的基礎上形成的蛋白質，其高表達對腫瘤的血管生成有重要影響〔16〕。研究〔17〕認為VEGF高表達時可以促進CD34、CD31、CD105陽性的血管內皮細胞標志物的生成，從多元角度促進腫瘤間質的血管新生。

本實驗結果提示rCBV值可以在一定程度上反映腫瘤的分級。理論上講，低級別膠質瘤的微循環主要是在腦組織已有的血管上，此時血管屏障并未受到破壞，當腫瘤在促瘤因素的作用下，血管屏障功能受到影響，通透性增強，成熟的血管和未成熟的血管均明顯增多，血流增加，此時檢測的rCBV值明顯升高。術后檢測CEACAM6、NRP2和VEGF的表達可以在一定程度上輔助分級。CEACAM6、NRP2和VEGF的表達可能在一定程度上判斷腫瘤患者的預后。CEACAM6、NRP2和VEGF均具有血管成生作用，尤其是VEGF，NRP2也具有直接的血管生成作用，但是其作用程度較弱于VEGF，CEACAM6可以通過促進VEGF而發揮血管生成的作用。rCBV和CEACAM6、NRP2三者具有協同作用，由于VEGF是直接的血管生成因子，因此，CEACAM6、NRP2作為不同通路的癌相關蛋白，二者可通過促進VEGF的表達發揮血管生成的作用。由于三者均與腫瘤的生物學行為及預后相關，因此，術前無創性測定rCBV值可以初步判斷腫瘤的生物學行為及預后。

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