銀杏達莫注射液對實驗性2型糖尿病大鼠肝臟GLP-1表達的影響

王加良 張艷麗 梁春娥 王桂云 劉 星 任鳳云

(牡丹江醫(yī)學院紅旗醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157011)

糖尿病性肝病主要是指由糖尿病(DM)引發(fā)的肝功能和肝臟組織學變化。DM與肝病的關(guān)系非常密切，在引起脂肪肝(FL)的所有病因中，DM占第3位，僅次于肥胖與飲酒。這是因為2型糖尿病(T2DM)患者常伴有肥胖和高脂血癥，導致其更容易發(fā)生FL，而研究同樣發(fā)現(xiàn)FL患者中有4%～46%發(fā)生糖耐量減低或顯性DM〔1〕。本實驗通過探討銀杏達莫注射液對T2DM肝病大鼠肝臟GLP-1基因表達的影響，研究銀杏達莫注射液對DM肝病的治療作用及機制。

1 材料與方法

1.1材料 銀杏達莫注射液夠于貴州益佰制藥股份有限公司；鏈脲佐菌素(STZ)購自美國Sigma公司產(chǎn)品。

1.2實驗方法 隨機選取80只健康Wistar大鼠，體重180～200 g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w。隨機取20只作為正常組給予常規(guī)飲食，另外60只作為模型組給予高脂飲食飼養(yǎng)。8 w后，腹腔一次性注射STZ注射劑15 mg/kg，宰殺大鼠并進行指標檢測。正常組20只給予常規(guī)飼料喂養(yǎng)，8 w后注射相同體積的檸檬酸鈉-檸檬酸緩沖液。模型組大鼠注射STZ 12 w之后出現(xiàn)典型的T2DM特點。將造模成功的T2DM大鼠隨機選取40只分成對照組和治療組各20只，治療組以0.5 ml/kg銀杏達莫注射液腹腔注射對大鼠進行治療，對照組繼續(xù)給予高脂飲食，8 w后處死大鼠〔2,3〕。成模大鼠體毛雜亂且反應(yīng)遲緩，明顯的多尿、多食、體重減輕。

1.3指標檢測 采用全自動生化分析儀檢測血糖、血脂及肝功的變化。RT-PCR法檢測GLP-1 mRNA表達。

2 結(jié) 果

2.1實驗大鼠葡萄糖耐量變化 模型組大鼠糖耐量出現(xiàn)明顯異常，與正常組比較差異顯著(P<0.01)，見表1。

表1 正常大鼠與模型大鼠糖耐量的變化±s,nmol/L)

2.2治療后各組大鼠血糖及肝功變化 與模型組相比，治療組空腹血糖谷丙轉(zhuǎn)氨酶(FBG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)含量顯著降低(P<0.01)。見表2。

表1 銀杏達莫注射液對大鼠FBG、肝功的影響±s,n=20)

2.3治療后各組大鼠肝功的變化 與模型組相比，治療組三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)含量降低，高密度脂蛋白(HDL)含量升高(P<0.01)，見表3。

表3 銀杏達莫注射液對大鼠血脂的影響±s,n=20,mmol/L)

2.4銀杏達莫注射液對T2DM大鼠肝組織GLP1 模型組的GLP-1基因表達量(0.045 8±0.005 2)最高，經(jīng)銀杏達莫注射液治療后，治療組GLP-1基因表達量(0.024 3±0.004 3)較糖尿病組明顯下降(P<0.01)，但仍略高于正常組(0.017 6±0.004 8)。

3 討 論

胰島功能受損和胰島素抵抗是T2DM發(fā)病機制中的兩個重要因素。在DM發(fā)生前胰島素抵抗往往已經(jīng)存在。本模型是對健康大鼠進行誘導，使之產(chǎn)生胰島素抵抗。因大鼠胰島代償能力增強，單純嚴重的胰島素抵抗不足以引起DM。此時給予小劑量STZ使β細胞受損，致使胰島素分泌相對減少，此時，即使胰島素水平仍高于正常范圍，但仍不能有效代償外周胰島素抵抗，從而引發(fā)DM。糖尿病肝病的發(fā)生機制可能與以下幾方面關(guān):(1)長期高血糖造成肝糖原大量沉積，并使載脂蛋白糖基化，過量的糖被轉(zhuǎn)化為脂質(zhì)貯存，加重了肝臟的脂肪變性；(2)高胰島素血癥激活羥甲基戊二酸單酰CoA還原酶(HMGCoA還原酶)的活性，使膽固醇合成量增加；(3)脂肪代謝異常，可能是胰島素抵抗引起糖代謝障礙，脂肪動員增加，從而導致肝組織中游離脂肪酸和甘油三酯含量增加；(4)DM患者微循環(huán)障礙，毛細血管基底膜增厚，使氧彌散能力下降，肝組織缺氧引起肝細胞壞死，出現(xiàn)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活力增高，尤其是合并糖尿病酮癥酸中毒時更易發(fā)生肝臟損害，并發(fā)微血管病變〔4〕。

GLP-1是一種受進食刺激后，小腸內(nèi)細胞所分泌的一種腸道激素 。其主要作用是刺激葡萄糖依賴的胰島素分泌，抑制餐后胰高血糖素的釋放，延緩胃的排空，并對胰島細胞有誘導增殖作用〔5〕。GLP-1類藥物通過胰腺、肝臟、腦及胃排空等多重作用調(diào)節(jié)血糖，同時近幾年越來越多研究發(fā)現(xiàn)其通過減輕胰島素抵抗、增強肝臟脂質(zhì)代謝能力、減少肝臟脂質(zhì)含量發(fā)揮治療非廣西精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用〔6〕。本實驗結(jié)果顯示，銀杏達莫注射液能有效地改善T2DM大鼠血糖、血脂情況，并能對肝功能起到改善作用，證實了銀杏達莫注射液可以有效地保護和治療T2DM大鼠肝臟的損傷。

4 參考文獻

1李改華.肝臟在糖尿病發(fā)病中的地位〔J〕.大同醫(yī)學專科學校學報，2006;26(2)：40-1.

2欒海燕，隋洪玉，張雪松,等.桔?？傇碥諏?型糖尿病肝病大鼠的干預作用〔J〕，中國老年學雜志，2013；3(33)：1094-5.

3任鳳云，宋秋穎，張增雷,等.銀杏達莫注射液對實驗性2型糖尿病大鼠腎臟轉(zhuǎn)化生長因子-β1表達的影響[J].中國老年學雜志，2013;7(33)：3370-2.

4董艷麗.淺析肝臟疾病與糖尿病的關(guān)系〔J〕. 中國實用醫(yī)藥，2008;3(21):119-20.

5田 峰.GLP- 1 受體激動劑與非酒精性脂肪性肝病〔J〕. 深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013;(1)23:5-57.

6朱大龍.基于GLP-1治療策略對糖尿病伴脂肪肝的療效評價〔J〕.中華醫(yī)學會第十二次全國內(nèi)分泌學學術(shù)會議論文匯編，2013：48-9.