雞呼吸道正常菌叢對(duì)抗菌藥物敏感性的研究

龔大春

(長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北 荊州 434025)

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用以及不合理應(yīng)用, 細(xì)菌耐藥性日趨嚴(yán)重, 目前細(xì)菌耐藥性已成為全球關(guān)注的、急需解決的公共衛(wèi)生問(wèn)題，專家估計(jì)細(xì)菌耐藥在21世紀(jì)對(duì)人類生命健康的威脅將不亞于艾滋病、癌癥和心血管疾病[1]。細(xì)菌耐藥不僅給人類健康構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅，而且給畜牧生產(chǎn)造成了巨大的損失。目前有關(guān)雞致病菌的耐藥性已有較多的研究報(bào)道，但有關(guān)正常菌叢的耐藥性報(bào)道較少。為此，筆者對(duì)雞呼吸道正常菌叢對(duì)抗菌藥物的耐藥性進(jìn)行了探討，旨在為獸醫(yī)臨床合理用藥提供理論依據(jù)，減少抗菌藥物對(duì)雞正常菌叢的干擾。

1 材料與方法

1.1 材料

(1)試劑藥品 磺胺嘧啶鈉：三峽獸藥廠生產(chǎn)；蒽諾沙星：吉林四方獸藥廠生產(chǎn)；先鋒氧氟沙星:山東明發(fā)獸藥廠生產(chǎn)；強(qiáng)力霉素：廣東養(yǎng)寶生物制藥有限公司；綠克迪：煙臺(tái)綠葉動(dòng)物保健品公司；大腸桿菌凈：廣州牧馬人動(dòng)物保健有限公司；羅迪米先：廣東省廣昌動(dòng)物保健品公司；先鋒9號(hào)：中國(guó)重慶市獸藥廠；呼瀉凈750：上海諾華動(dòng)物保健有限公司；牛肉膏、蛋白胨、瓊脂粉等由長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院提供。

(2)藥敏紙片 硫酸慶大霉素、氯霉素、煙酸氟哌酸等藥敏紙片均由杭州微生物試劑有限公司生產(chǎn)。

(3)受試菌料 共采集正常健康雞群的雞呼吸道分泌物60份，其中湖北省荊州市某種禽場(chǎng)(A)2個(gè)雞群(A1、A2)各10份、湖北省荊州市某雞場(chǎng)(B)2個(gè)雞群(B1、B2)各10份、湖北省沙市農(nóng)場(chǎng)某雞場(chǎng)(C)2個(gè)雞群(C1、C2)各10份。

1.2 方法

(1) 藥敏紙片與培養(yǎng)基的制備 按文獻(xiàn)[2-3]的方法制備藥敏紙片和培養(yǎng)基。

(2) 雞呼吸道正常菌叢的采取 將雞保定，用無(wú)菌棉簽蘸取滅菌生理鹽水，在雞鼻腔內(nèi)來(lái)回轉(zhuǎn)捻幾次取出，用滅菌剪刀剪下棉簽的棉試部分，貯存于滅菌小瓶中。

(4)耐藥性判斷 按文獻(xiàn)報(bào)道[2，4-7]的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行耐藥(R)、中敏(I)、高敏(S)的判斷。

2 結(jié)果與分析

2.1 3個(gè)雞場(chǎng)不同雞群呼吸道正常菌叢的耐藥情況

由表1可知，同一雞場(chǎng)不同雞群呼吸道正常菌叢對(duì)同一種抗菌藥物的敏感性有的表現(xiàn)為高敏、中敏和耐藥；有的表現(xiàn)為敏感性基本一致，要么為敏感一致，要么為耐藥一致，這可能與不同的技術(shù)員用藥習(xí)慣和雞群的來(lái)源不同有關(guān)。

表1 3個(gè)雞場(chǎng)不同雞群呼吸道正常菌叢藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.2 3個(gè)雞場(chǎng)雞呼吸道正常菌叢的耐藥性比較

由表2可知，3個(gè)雞場(chǎng)雞呼吸道正常菌叢對(duì)同一種抗菌藥物的敏感性有的差異顯著，表現(xiàn)為高敏、中敏和耐藥，如羅迪米先；有的敏感性表現(xiàn)為高敏一致，如呼瀉凈、先鋒氧氟沙星；有的敏感性表現(xiàn)為耐藥一致，如磺胺嘧啶鈉、綠克迪、先鋒9號(hào)等；這可能與不同的雞場(chǎng)選用的藥物種類不同、使用的頻度不同有關(guān)。

表2 3個(gè)雞場(chǎng)雞呼吸道正常菌叢的耐藥性比較

3 討論與小結(jié)

(1) 本試驗(yàn)結(jié)果表明，雞呼吸道正常菌叢對(duì)抗菌藥物的敏感性有明顯的區(qū)域性與區(qū)域差異，這與文獻(xiàn)[8-9]的報(bào)道是一致的，雞呼吸道正常菌叢對(duì)抗菌藥物的敏感性表現(xiàn)為耐藥、中敏和高敏，說(shuō)明不同的雞場(chǎng)、同一雞場(chǎng)的不同雞群、同一雞群的不同個(gè)體其呼吸道正常菌叢可能攜帶的耐藥基因是不同的。這提示廣大的畜牧獸醫(yī)工作者在獸醫(yī)臨床治療細(xì)菌性疾病時(shí)，應(yīng)合理選用抗菌藥物，有條件的最好開(kāi)展藥敏試驗(yàn)，避免盲目用藥，以減少對(duì)雞呼吸道正常菌叢的干擾和破壞，增強(qiáng)其抗病力。

(2)雞呼吸道正常菌叢是由多種細(xì)菌組成的，其耐藥性的產(chǎn)生從理論上分析同致病菌應(yīng)該是一樣的。正常菌叢出現(xiàn)耐藥的原因其一是正常菌叢本身固有的因素，正常菌叢可通過(guò)突變或獲得耐藥質(zhì)粒而產(chǎn)生耐藥性； 其二是抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，正常菌叢長(zhǎng)期棲息在動(dòng)物體內(nèi)，接觸抗菌藥物的機(jī)會(huì)、頻率比致病菌多，特別是低劑量長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗菌藥物， 更易導(dǎo)致正常菌叢耐藥菌株的產(chǎn)生。

(3)關(guān)于正常菌叢耐藥性同致病菌耐藥性的相關(guān)性目前還缺乏有力的證據(jù)，尚需要開(kāi)展進(jìn)一步的研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]張永標(biāo)，張扣興，唐英春.產(chǎn)質(zhì)粒介導(dǎo)AmpC酶和ESBLs細(xì)菌的耐藥性及β-內(nèi)酰胺酶基因型研究[J].中華微生物和免疫學(xué)雜志,2004，24(7)：562-577.

[2]韓文瑜．病原細(xì)菌檢測(cè)技術(shù)[M]．長(zhǎng)春：吉林科技出版社，1992：79-82.

[3]姚火春．獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]．北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002：19-22.

[4]寧鵬，寧順章．幾種細(xì)菌對(duì)環(huán)丙沙星的藥敏試驗(yàn)[J]．中國(guó)獸醫(yī)雜志，1999，25(2)：28.

[5]陳坤永，翁良樹(shù)，吳慕貞，等．深圳地區(qū)奶牛臨床型乳房炎病原菌分離鑒定與藥敏試驗(yàn)[J]．中國(guó)獸醫(yī)科技，1999，29(9)：36-38.

[6]賈俊元，毋艷萍，何虎成．豬源性大腸埃希氏菌對(duì)抗菌藥物的敏感性測(cè)定[J]．中國(guó)獸醫(yī)科技，1999，29(12)：32-33.

[7]龔大春，江濤，程太平.雞直腸正常菌叢對(duì)抗菌藥物敏感性的研究[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)農(nóng)學(xué)卷，2008，5(2)：39-41.

[8]粟艷華，葛平.2010年細(xì)菌耐藥性分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2011,9(9)：110-112.

[9]謝麗明，邱芝青，梁宇鋒.2008-2010年我院抗菌藥物的應(yīng)用情況及細(xì)菌耐藥性分析[J].臨床合理用藥，2010，3(11)：38-39.