評價肺炎鏈球菌疫苗免疫效果的功能性抗體檢測方法的建立

李江姣 杜慧竟 石繼春 徐苗 葉強

[摘要] 目的 建立肺炎球菌疫苗免疫效果評價的功能性抗體滴度檢測方法。 方法 參考美國阿拉巴馬大學(xué)的多重調(diào)理吞噬實驗（MOPA）方法，構(gòu)建并鑒定HL-60效應(yīng)細胞庫、肺炎球菌工作菌種庫和補體；在此基礎(chǔ)上對5份血清樣本進行調(diào)理吞噬活性檢測。 結(jié)果 HL-60細胞分化后表面標志表達量CD35為71.78%，CD71為10.97%，活細胞比例為72.96%。13個血清型的肺炎鏈球菌工作菌種的凍存復(fù)活率均高于90%；抗生素抗性與敏感性與預(yù)期結(jié)果一致；工作稀釋度均≥1000。補體的非特異性殺菌率均≤70%。血清樣本的殺菌曲線均為標準的S型，平行孔間的差異不超過3倍。 結(jié)論 效應(yīng)細胞、工作菌種、補體及血清樣本的檢測結(jié)果均符合阿拉巴馬大學(xué)參考方法的標準要求，成功建立了基于MOPA的功能性抗體檢測方法。

[關(guān)鍵詞] 肺炎鏈球菌；疫苗；功能抗體；調(diào)理吞噬試驗

[中圖分類號] R392 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）07（b）-0004-05

肺炎鏈球菌可以引起肺炎、菌血癥、腦膜炎、中耳炎等疾病，是兒童和老年人獲得性感染的主要病原菌[1]；接種肺炎鏈球菌疫苗可以有效預(yù)防肺炎鏈球菌感染[2]。為了保證疫苗質(zhì)量，所有肺炎鏈球菌疫苗上市前均需對其免疫保護效力進行測定。目前針對該疫苗，普遍采用的體外效力檢測方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），利用抗原-抗體的特異性結(jié)合特性對待測血清中的抗體水平進行檢測[3]；但該類方法只能檢測抗體的總含量，無法將功能性抗體甄別出來，不能真實反映疫苗的免疫保護效果。……