牛膝多糖對(duì)兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎修復(fù)的影響※

方 芳 鄒來(lái)勇 湯群珍

(江西省撫州市婦幼保健醫(yī)院藥械科，江西 撫州 344000)

牛膝多糖對(duì)兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎修復(fù)的影響※

方 芳 鄒來(lái)勇1湯群珍1

(江西省撫州市婦幼保健醫(yī)院藥械科，江西 撫州 344000)

目的觀察牛膝多糖對(duì)兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎修復(fù)的影響。方法將48只新西蘭大白兔隨機(jī)分為2組，各24只。采用改良Hulth模型建造兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎模型。治療組予牛膝多糖2 g/kg灌胃治療，對(duì)照組予0.9%氯化鈉注射液2 mL/kg灌胃對(duì)照。每日1次，連續(xù)灌胃3個(gè)月。觀察比較2組治療前后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度及數(shù)字化X線攝影(DR)影像學(xué)分級(jí)。結(jié)果對(duì)照組治療前后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療組治療后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且與對(duì)照組治療后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度明顯增加；2組治療前DR影像學(xué)分級(jí)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2組治療后DR影像學(xué)分級(jí)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(u=2.33，P<0.05)，治療組能夠明顯修復(fù)膝關(guān)節(jié)炎性改變。結(jié)論牛膝多糖治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎能夠改善周?chē)浗M織腫脹情況，減少關(guān)節(jié)間隙的變窄，縮小關(guān)節(jié)面的變化及減輕骨贅情況的發(fā)生，增加膝關(guān)節(jié)屈伸最大角度，改善膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度，從而有利于骨性關(guān)節(jié)炎的修復(fù)。

骨關(guān)節(jié)炎，膝；疾病模型，動(dòng)物；兔

骨性關(guān)節(jié)炎是中老年人群常見(jiàn)的慢性進(jìn)行性關(guān)節(jié)疾患，其診斷及治療方法尚缺乏明確的結(jié)論，主要依靠其影像學(xué)表現(xiàn)做出診斷及評(píng)價(jià)[1]。牛膝多糖是從中藥牛膝中分離提純出的一種中藥活性成分，具有提高巨噬細(xì)胞吞噬功能、增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞活性、提高免疫力、抗炎、抗腫瘤、抗凝血等作用[2]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分析膝骨關(guān)節(jié)炎兔模型的數(shù)字化X線攝影(DR)影像學(xué)檢查結(jié)果及膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度等指標(biāo)，探討牛膝多糖對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎修復(fù)的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)健康6個(gè)月齡新西蘭大白兔48只，雌雄各半，體質(zhì)量1.8～2.5 kg，由南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)部提供，動(dòng)物合格證號(hào)：江西醫(yī)動(dòng)證字第02146-02號(hào)。

1.1.2 藥物 牛膝由江西中醫(yī)藥高等專科學(xué)校附屬醫(yī)院中藥房提供，牛膝多糖的提取工藝由江西中醫(yī)藥高等專科學(xué)校附屬藥廠完成。牛膝多糖經(jīng)乙醇及蒸餾水提取后，經(jīng)透析脫鹽，減壓濃縮，冷凍干燥，得白色凍干粉牛膝多糖純化物。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模及分組 將48只大白兔隨機(jī)分為對(duì)照組(24只)和治療組(24只)。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)采用改良Hulth模型造模[4]：采用3%戊巴比妥鈉對(duì)新西蘭大白兔耳緣靜脈注射麻醉后，動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上，左膝關(guān)節(jié)局部脫毛，備皮，無(wú)菌消毒，于關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)處行長(zhǎng)約4 cm縱切口，切斷家兔內(nèi)側(cè)副韌帶，摘除內(nèi)側(cè)半月板，切斷前交叉韌帶，保留后交叉韌帶，勿損傷關(guān)節(jié)軟骨面，徹底止血，沖洗關(guān)節(jié)腔，抽屜試驗(yàn)陽(yáng)性后，逐層縫合，包扎傷處，不予固定。術(shù)后連續(xù)3 d肌肉注射青霉素40萬(wàn)U，預(yù)防感染。根據(jù)臨床上超疲勞活動(dòng)容易提前出現(xiàn)骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病特點(diǎn)，術(shù)后1周每日強(qiáng)迫模型兔活動(dòng)30 min，3個(gè)月后可獲得穩(wěn)定的膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎模型。

1.2.2 給藥方法 從造模成功后第1 d開(kāi)始進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，治療組予牛膝多糖2 g/kg灌胃治療，對(duì)照組予0.9%氯化鈉注射液2 mL/kg灌胃對(duì)照。每日1次，連續(xù)灌胃治療3個(gè)月。日常觀察大白兔全身總體狀況，定期測(cè)量體質(zhì)量，并做相關(guān)記錄。動(dòng)物飼養(yǎng)安排在清潔級(jí)兔類實(shí)驗(yàn)室，溫度(25.0±2.0)℃，每組在同一籠內(nèi)自由活動(dòng)、進(jìn)食及飲水。

1.3 觀察指標(biāo)及方法 觀察比較2組治療前后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度及DR影像學(xué)分級(jí)。采用量角器測(cè)量膝關(guān)節(jié)屈伸最大角度，每個(gè)膝關(guān)節(jié)測(cè)量3次，取其平均值得膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度。麻醉后行DR影像學(xué)檢查周?chē)浗M織、關(guān)節(jié)間隙、關(guān)節(jié)面的變化及骨贅情況，并進(jìn)行分級(jí)判斷。X線分級(jí)參照Kellgren-Lawrence的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)制訂：Ⅰ級(jí)：輕微骨贅，關(guān)節(jié)間隙可疑變窄；Ⅱ級(jí)，明顯的骨贅，關(guān)節(jié)間隙可疑變窄；Ⅲ級(jí)：中等量骨贅，關(guān)節(jié)間隙中度變窄，軟骨下骨硬化；Ⅳ級(jí)：大量骨贅，關(guān)節(jié)間隙明顯變窄，嚴(yán)重軟骨下骨硬化及明顯畸形[3]。

2 結(jié) 果

2.1 2組治療前后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度比較 見(jiàn)表1。

由表1可見(jiàn)，對(duì)照組治療前后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療組治療后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且與對(duì)照組治療后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度明顯增加。

表1 2組治療前后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度比較 ±s

與本組治療前比較，*P<0.05；與對(duì)照組治療后比較，△P<0.05

2.2 2組治療前后DR影像學(xué)分級(jí)比較 見(jiàn)表2。

表2 2組治療前后DR影像學(xué)分級(jí)比較 只

經(jīng)Ridit分析，2組治療前DR影像學(xué)分級(jí)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，2組治療后DR影像學(xué)分級(jí)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(u=2.33，P<0.O5)，治療組能夠明顯修復(fù)膝關(guān)節(jié)炎性改變。

3 討 論

骨性關(guān)節(jié)炎的概念最早于1890年由Garrod提出，1909年Nichols和Richardson研究后認(rèn)為骨性關(guān)節(jié)炎的病理特征為非炎癥性病變，骨性關(guān)節(jié)炎主要病理變化是關(guān)節(jié)軟骨的損傷，關(guān)節(jié)軟骨損傷缺失，膠原纖維變性，導(dǎo)致骨質(zhì)暴露，關(guān)節(jié)面之間的摩擦增加，軟骨面逐漸粗糙、軟化、碎裂，關(guān)節(jié)邊緣代償性增生，然后出現(xiàn)反應(yīng)性的骨質(zhì)增生，形成骨贅，當(dāng)膝關(guān)節(jié)原有的力學(xué)平衡被破壞，隨著關(guān)節(jié)的不斷活動(dòng)，必然又會(huì)損傷關(guān)節(jié)軟骨，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)間隙的改變，故稱之為退行性關(guān)節(jié)病變更能體現(xiàn)該病的臨床病理特征[4]。通過(guò)影像學(xué)檢測(cè)骨贅及關(guān)節(jié)間隙對(duì)評(píng)價(jià)療效具有可行性及實(shí)用性。

骨性關(guān)節(jié)炎屬中醫(yī)學(xué)痹證范疇。目前中醫(yī)治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的方法較多，多以活血化瘀，解痙通絡(luò)，緩解病態(tài)發(fā)展，改善肌萎縮及肌張力低下，增加膝關(guān)節(jié)穩(wěn)定性及提高膝關(guān)節(jié)功能為目的，均取得了一定成果[5-6]。牛膝味苦酸，性平，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、活血祛瘀、疏經(jīng)通絡(luò)的功效。牛膝多糖是從牛膝中提取的活性成分，相對(duì)分子質(zhì)量小，水溶性好，藥源廣泛，既可口服，又可注射。有研究表明，牛膝多糖具有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用，對(duì)熱刺激和醋酸所導(dǎo)致的小鼠疼痛具有顯著的抑制作用，對(duì)二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹法和醋酸引起的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加也具有顯著的抑制作用[7]；牛膝多糖還具有免疫調(diào)節(jié)功能，能提高正常及免疫低下小鼠的紅細(xì)胞免疫功能[8]。

本研究結(jié)果表明，牛膝多糖治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎能夠改善周?chē)浗M織腫脹情況，減少關(guān)節(jié)間隙的變窄，縮小關(guān)節(jié)面的變化及減輕骨贅情況的發(fā)生，增加膝關(guān)節(jié)屈伸最大角度，改善膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度，從而有利于骨性關(guān)節(jié)炎的修復(fù)。

[1] 張晉華.關(guān)節(jié)鏡治療不同嚴(yán)重程度膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎療效分析[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2011，5(9)：3-4.

[2] 鄭海南.牛膝多糖的研究進(jìn)展[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2008，8(6):93-94.

[3] Kellgren JH，Lawrence JS．Radiological assessment of osteo-arthrosis[J].Ann Rheum Dis，1957，16(4)：494-502．

[4] Gardner DL.The nature and causes of osteoarthrosis[J].Br Med J (Clin Res Ed)，1983，286(6363):418-424.

[5] 盧笛，徐衛(wèi)星，郭峭峰，等.針刀配合透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)內(nèi)注射治療膝骨性關(guān)節(jié)炎療效觀察[J].全科醫(yī)學(xué)臨床與教育，2010，8(3):299-301.

[6] 王世彪，郁俊文，張建軍，等．骨痹威靈丸治療骨性關(guān)節(jié)炎臨床研究[J]．中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志，2004，12(3)：41-42.

[7] 李偉平，何良艷，馬哲龍，等.土牛膝多糖抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2012，30(4):747-749.

[8] 邵樹(shù)軍，買(mǎi)玲，陳瑛．牛膝多糖對(duì)小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響[J]．中國(guó)藥物與臨床，2002，2(5)：281-282．

(本文編輯：石 康)

Effectofachyranthanontherepairofrabbitkneeosteoarthritis

FANGFang*，ZOULaiyong，TANGQunzhen.

*DrugandEquipmentSection，MaternalandChildHealthHospitalofFuzhouCityinJiangxiProvince，Jiangxi，F(xiàn)uzhou344000

ObjectiveTo study the effect of achyranthan on the repair of rabbit knee osteoarthritis. Methods 48 New Zealand white rabbit were randomly divided into two groups，each only 24. Using improved Hulth model to build the rabbit model of knee osteoarthritis. Treatment group

lavage treatment according to the achyranthan，2 g/kg，and control group received lavage treatment of 0.9% sodium chloride injection 2 mL/kg. 1 times a day，continuous lavage treatment for 3 months. Knee joint mobility and DR imaging classification were compared before and after the treatment in two groups.ResultsThere was no difference between before and after treatment in control group on knee joint mobility (P>0.05). There was significant difference between before and after treatment in treatment group on knee joint mobility (P<0.05). There was significant difference between two groups on knee joint mobility after treatment (P<0.05). There was no difference between two groups on DR imaging classification before treatment (P>0.05). There was significant difference between two groups on DR imaging classification after treatment (u=2.33，P>0.05). The treatment group can repair knee joint inflammatory change obviously.ConclusionAchyranthan for the treatment of knee osteoarthritis can improve soft tissue swelling，reduce joint space narrowing，reduce changes in the articular surface and mitigate osteophytes situation，increase the maximum angle of knee flexion，improve knee range of motion，thus is conducive to restoration of osteoarthritis.

Osteoarthritis; Knee; Disease models; Animal; Rabbit

※ 項(xiàng)目來(lái)源：2012年江西省衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科研基金課題(編號(hào)：2012A048)

1 江西中醫(yī)藥高等專科學(xué)校醫(yī)療系，江西 撫州 344000

方芳(1968—)，女，主管藥師，學(xué)士。從事藥械科工作。研究方向：中藥制劑。

R446-33；R684.3

A

1002-2619(2014)05-0749-03

2013-05-06)