口蹄疫基因工程疫苗研究進展

宋昌霖

摘要：口蹄疫是感染偶蹄動物的急性、熱性、高度接觸性傳染病，預防的該病的首要方式為疫苗接種。傳統口蹄疫疫苗存在長期帶毒、毒力返強等不安全因素，因此新型疫苗的研制迫在眉睫。就新型口蹄疫疫苗的研究進展進行了綜述。

關鍵詞：口蹄疫；新型疫苗；構建；效力

中圖分類號：S851.3文獻標識碼：B文章編號：1007-273X（2014）05-0073-01

口蹄疫（Foot and mouth disease，FMD）是豬、牛、羊等主要家畜和其他家養、野生偶蹄動物共患的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，曾多次在世界范圍內暴發流行，造成巨大政治、經濟損失。鑒于此，世界動物衛生組織（OIE）將其列為A類傳染病之首。疫苗接種是預防口蹄疫的重要手段，安全、高效的疫苗是預防口蹄疫發生先決條件。傳統口蹄疫疫苗多為滅活疫苗和弱毒疫苗，但此類疫苗由于面臨長期帶毒、毒性較大、產生抗體緩慢和毒力返強等不安全因素，國內外研究者致力于研究新型疫苗以解決傳統口蹄疫所產生的問題。本文就新型口蹄疫苗研究進展作詳細闡述。

1活載體疫苗

口蹄疫活載體疫苗是利用基因雜交技術將FMDV的主要抗原基因插入某種缺陷病毒的基因組中構建而成的重組病毒，該重組病毒能在動物細胞內表達FMDV抗原蛋白，刺激機體產生免疫反應。如腺病毒、痘病毒以及由痘病毒衍生而來的非復制型載體[1]。因為口蹄疫病毒是通過呼吸道感染的，而且容易形成持續感染，所以研制黏膜免疫疫苗也是重點，例如沙門氏菌、分枝結核桿菌作載體的活載體疫苗?；钶d體疫苗是近年口蹄疫新型疫苗研究的熱點之一。

1.1口蹄疫重組腺病毒載體疫苗

賈俊濤等[2]等究選擇O型FMDV VPI基因上保守序列作為可能的干擾位點，合成了siRNA，重組表達載體pShuttle-VPl。將rAdeno-VPl感染IBRS-2細胞后，12 h后再加入100 TCID50的FMDVO/HKN/2003。結果顯示，重組腺病毒能夠抑制FMDV的復制。盧曾軍分別構建了FMDV O、A型P1-2A和3C編碼區基因重組腺病毒，O/Ad5-P12X3C免疫豚鼠后獲得較好的保護性免疫反應，免疫豬28d后用同型的FMDV攻擊，免疫豬的保護率為75%。

1.2口蹄疫重組痘病毒載體疫苗

金明蘭等[4]對FMDV衣殼蛋白前體P1-2A和蛋白酶3C基因重組痘病毒在豚鼠、仔豬體內的毒性、分布及抗體消長規律進行了研究，結果表明，FMD重組雞痘病毒免疫的動物在整個試驗期間，未表現出明顯的臨床癥狀和不良反應，病理組織切片檢測無明顯的組織學變化；PCR、RT—PCR檢測各主要臟器內檢測到FPV DNA和FMDV DNA，且在大部分組織能存在3 d左右；FMD重組雞痘病毒均可誘導免疫動物產生較高水平的抗FMDV特異性抗體和中和抗體。Ma等[5]用雞痘病毒作載體構建了表達FMDV P1-2A、3C和IL-18基因的重組疫苗，進一步證明了該重組疫苗的免疫效果。在攻毒試驗中，免疫豬保護率可達到80%。

1.3口蹄疫重組沙門氏菌載體疫苗

劉明秋等[6]將口蹄疫病毒疫苗基因的真核表達質粒pB01電轉化到減毒的豬霍亂沙門菌C3500中，構建成抗O型口蹄疫病毒的重組活菌苗pB01/S.cho.血清凝集實驗顯示即具有免疫原性.采用口服方式免疫家兔，檢測重組菌在家兔體內誘導的免疫應答。

2合成肽疫苗

口蹄疫合成肽肽疫苗是利用化學合成法人工根據抗原表位的氨基酸序列合成抗原決定簇的小肽，再鏈接到大分子載體，并加入佐劑制成的疫苗。合成的小肽由多個B細胞和T細胞抗原表位決定，具有高純度和穩定的特性。我國已研制出了豬用O型口蹄疫合成

摘要：口蹄疫是感染偶蹄動物的急性、熱性、高度接觸性傳染病，預防的該病的首要方式為疫苗接種。傳統口蹄疫疫苗存在長期帶毒、毒力返強等不安全因素，因此新型疫苗的研制迫在眉睫。就新型口蹄疫疫苗的研究進展進行了綜述。

關鍵詞：口蹄疫；新型疫苗；構建；效力

中圖分類號：S851.3文獻標識碼：B文章編號：1007-273X（2014）05-0073-01

口蹄疫（Foot and mouth disease，FMD）是豬、牛、羊等主要家畜和其他家養、野生偶蹄動物共患的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，曾多次在世界范圍內暴發流行，造成巨大政治、經濟損失。鑒于此，世界動物衛生組織（OIE）將其列為A類傳染病之首。疫苗接種是預防口蹄疫的重要手段，安全、高效的疫苗是預防口蹄疫發生先決條件。傳統口蹄疫疫苗多為滅活疫苗和弱毒疫苗，但此類疫苗由于面臨長期帶毒、毒性較大、產生抗體緩慢和毒力返強等不安全因素，國內外研究者致力于研究新型疫苗以解決傳統口蹄疫所產生的問題。本文就新型口蹄疫苗研究進展作詳細闡述。

1活載體疫苗

口蹄疫活載體疫苗是利用基因雜交技術將FMDV的主要抗原基因插入某種缺陷病毒的基因組中構建而成的重組病毒，該重組病毒能在動物細胞內表達FMDV抗原蛋白，刺激機體產生免疫反應。如腺病毒、痘病毒以及由痘病毒衍生而來的非復制型載體[1]。因為口蹄疫病毒是通過呼吸道感染的，而且容易形成持續感染，所以研制黏膜免疫疫苗也是重點，例如沙門氏菌、分枝結核桿菌作載體的活載體疫苗?；钶d體疫苗是近年口蹄疫新型疫苗研究的熱點之一。

1.1口蹄疫重組腺病毒載體疫苗

賈俊濤等[2]等究選擇O型FMDV VPI基因上保守序列作為可能的干擾位點，合成了siRNA，重組表達載體pShuttle-VPl。將rAdeno-VPl感染IBRS-2細胞后，12 h后再加入100 TCID50的FMDVO/HKN/2003。結果顯示，重組腺病毒能夠抑制FMDV的復制。盧曾軍分別構建了FMDV O、A型P1-2A和3C編碼區基因重組腺病毒，O/Ad5-P12X3C免疫豚鼠后獲得較好的保護性免疫反應，免疫豬28d后用同型的FMDV攻擊，免疫豬的保護率為75%。

1.2口蹄疫重組痘病毒載體疫苗

金明蘭等[4]對FMDV衣殼蛋白前體P1-2A和蛋白酶3C基因重組痘病毒在豚鼠、仔豬體內的毒性、分布及抗體消長規律進行了研究，結果表明，FMD重組雞痘病毒免疫的動物在整個試驗期間，未表現出明顯的臨床癥狀和不良反應，病理組織切片檢測無明顯的組織學變化；PCR、RT—PCR檢測各主要臟器內檢測到FPV DNA和FMDV DNA，且在大部分組織能存在3 d左右；FMD重組雞痘病毒均可誘導免疫動物產生較高水平的抗FMDV特異性抗體和中和抗體。Ma等[5]用雞痘病毒作載體構建了表達FMDV P1-2A、3C和IL-18基因的重組疫苗，進一步證明了該重組疫苗的免疫效果。在攻毒試驗中，免疫豬保護率可達到80%。

1.3口蹄疫重組沙門氏菌載體疫苗

劉明秋等[6]將口蹄疫病毒疫苗基因的真核表達質粒pB01電轉化到減毒的豬霍亂沙門菌C3500中，構建成抗O型口蹄疫病毒的重組活菌苗pB01/S.cho.血清凝集實驗顯示即具有免疫原性.采用口服方式免疫家兔，檢測重組菌在家兔體內誘導的免疫應答。

2合成肽疫苗

口蹄疫合成肽肽疫苗是利用化學合成法人工根據抗原表位的氨基酸序列合成抗原決定簇的小肽，再鏈接到大分子載體，并加入佐劑制成的疫苗。合成的小肽由多個B細胞和T細胞抗原表位決定，具有高純度和穩定的特性。我國已研制出了豬用O型口蹄疫合成

摘要：口蹄疫是感染偶蹄動物的急性、熱性、高度接觸性傳染病，預防的該病的首要方式為疫苗接種。傳統口蹄疫疫苗存在長期帶毒、毒力返強等不安全因素，因此新型疫苗的研制迫在眉睫。就新型口蹄疫疫苗的研究進展進行了綜述。

關鍵詞：口蹄疫；新型疫苗；構建；效力

中圖分類號：S851.3文獻標識碼：B文章編號：1007-273X（2014）05-0073-01

口蹄疫（Foot and mouth disease，FMD）是豬、牛、羊等主要家畜和其他家養、野生偶蹄動物共患的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，曾多次在世界范圍內暴發流行，造成巨大政治、經濟損失。鑒于此，世界動物衛生組織（OIE）將其列為A類傳染病之首。疫苗接種是預防口蹄疫的重要手段，安全、高效的疫苗是預防口蹄疫發生先決條件。傳統口蹄疫疫苗多為滅活疫苗和弱毒疫苗，但此類疫苗由于面臨長期帶毒、毒性較大、產生抗體緩慢和毒力返強等不安全因素，國內外研究者致力于研究新型疫苗以解決傳統口蹄疫所產生的問題。本文就新型口蹄疫苗研究進展作詳細闡述。

1活載體疫苗

口蹄疫活載體疫苗是利用基因雜交技術將FMDV的主要抗原基因插入某種缺陷病毒的基因組中構建而成的重組病毒，該重組病毒能在動物細胞內表達FMDV抗原蛋白，刺激機體產生免疫反應。如腺病毒、痘病毒以及由痘病毒衍生而來的非復制型載體[1]。因為口蹄疫病毒是通過呼吸道感染的，而且容易形成持續感染，所以研制黏膜免疫疫苗也是重點，例如沙門氏菌、分枝結核桿菌作載體的活載體疫苗?；钶d體疫苗是近年口蹄疫新型疫苗研究的熱點之一。

1.1口蹄疫重組腺病毒載體疫苗

賈俊濤等[2]等究選擇O型FMDV VPI基因上保守序列作為可能的干擾位點，合成了siRNA，重組表達載體pShuttle-VPl。將rAdeno-VPl感染IBRS-2細胞后，12 h后再加入100 TCID50的FMDVO/HKN/2003。結果顯示，重組腺病毒能夠抑制FMDV的復制。盧曾軍分別構建了FMDV O、A型P1-2A和3C編碼區基因重組腺病毒，O/Ad5-P12X3C免疫豚鼠后獲得較好的保護性免疫反應，免疫豬28d后用同型的FMDV攻擊，免疫豬的保護率為75%。

1.2口蹄疫重組痘病毒載體疫苗

金明蘭等[4]對FMDV衣殼蛋白前體P1-2A和蛋白酶3C基因重組痘病毒在豚鼠、仔豬體內的毒性、分布及抗體消長規律進行了研究，結果表明，FMD重組雞痘病毒免疫的動物在整個試驗期間，未表現出明顯的臨床癥狀和不良反應，病理組織切片檢測無明顯的組織學變化；PCR、RT—PCR檢測各主要臟器內檢測到FPV DNA和FMDV DNA，且在大部分組織能存在3 d左右；FMD重組雞痘病毒均可誘導免疫動物產生較高水平的抗FMDV特異性抗體和中和抗體。Ma等[5]用雞痘病毒作載體構建了表達FMDV P1-2A、3C和IL-18基因的重組疫苗，進一步證明了該重組疫苗的免疫效果。在攻毒試驗中，免疫豬保護率可達到80%。

1.3口蹄疫重組沙門氏菌載體疫苗

劉明秋等[6]將口蹄疫病毒疫苗基因的真核表達質粒pB01電轉化到減毒的豬霍亂沙門菌C3500中，構建成抗O型口蹄疫病毒的重組活菌苗pB01/S.cho.血清凝集實驗顯示即具有免疫原性.采用口服方式免疫家兔，檢測重組菌在家兔體內誘導的免疫應答。

2合成肽疫苗

口蹄疫合成肽肽疫苗是利用化學合成法人工根據抗原表位的氨基酸序列合成抗原決定簇的小肽，再鏈接到大分子載體，并加入佐劑制成的疫苗。合成的小肽由多個B細胞和T細胞抗原表位決定，具有高純度和穩定的特性。我國已研制出了豬用O型口蹄疫合成