藥物支架系統(tǒng)藥物含量測(cè)試方法研究報(bào)告

慈洪麗姜啟鳳滕 娟

藥物支架系統(tǒng)藥物含量測(cè)試方法研究報(bào)告

慈洪麗1姜啟鳳2滕 娟2

目的為流通池法測(cè)定體外釋放度提供含量測(cè)試的方法驗(yàn)證。方法使用含0.2%的吐溫20的PBS（PH=7.4）溶液作為介質(zhì)劑，雷帕霉素在該介質(zhì)劑中的含量測(cè)試的方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果準(zhǔn)確度、專屬性、線性和范圍、精密度、檢測(cè)限和定量限均可滿足中國(guó)藥典要求，且在（37±2）℃時(shí)的穩(wěn)定性較好。結(jié)論雷帕霉素含量測(cè)定可以采用含0.2%的吐溫20的PBS（PH=7.4）溶液作為介質(zhì)，進(jìn)行流通池法體外釋放度的測(cè)試。

雷帕霉素；藥物體外釋放；流通池；體外釋放度

雷帕霉素是一種免疫抑制劑，主要作用是抑制血管內(nèi)皮增生，起到防止血管再狹窄的作用[1]。目前國(guó)內(nèi)外藥物支架多采用該藥物與載體結(jié)合，在血管內(nèi)有一個(gè)逐漸釋放的過(guò)程，因而釋放度是保證產(chǎn)品安全有效性的一項(xiàng)重要檢測(cè)[2]。到目前為止，國(guó)內(nèi)對(duì)支架中使用此類藥物仍未建立起統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析檢測(cè)方法，藥物涂層支架的體外釋放測(cè)試方法一般為靜態(tài)條件下，用25%的乙醇溶液作為釋放介質(zhì)[3]，筆者認(rèn)為該方法的缺陷在于介質(zhì)的選擇上，乙醇是一種有機(jī)溶劑，雷帕霉素在乙醇中易溶，乙醇溶液的濃度對(duì)雷帕霉素的溶解度有很大的影響。因此配制乙醇溶液的準(zhǔn)確度是非常關(guān)鍵的，所操作過(guò)程中易造成一定的誤差，而釋放介質(zhì)采用與人體血液酸堿度比較接近的PBS溶液相對(duì)來(lái)說(shuō)是比較合理的。

1 儀器與材料

1.1 儀器島津2550UV恒溫水浴箱。

1.2 材料雷帕霉素對(duì)照品（Lot No.HBHX200917，純度96.8%）、雷帕霉素（Lot No.090401由華北制藥集團(tuán)新藥研究開(kāi)發(fā)責(zé)任有限公司生產(chǎn)）。介質(zhì)為含0.2%的吐溫20的PBS（PH=7.4）緩沖溶液，以下稱PBS溶液。

2 驗(yàn)證過(guò)程

2.1 溶液的制備因雷帕霉素不能直接溶于PBS溶液中，所有樣品制備時(shí)需先用大約0.5ml的無(wú)水乙醇進(jìn)行溶解，然后再加入PBS溶液即可。測(cè)試結(jié)果表明，14天內(nèi)在（37±2）℃的條件下，雷帕霉素在PBS溶液中是穩(wěn)定的。

2.2 方法適應(yīng)性

2.2.1 專屬性取PBS溶液作為空白液，雷帕霉素PBS溶液作為樣品液，在200～350nm下進(jìn)行紫外掃描，雷帕霉素在278nm下有最大吸收，空白液無(wú)吸收。

2.2.2 線性和范圍標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：精密稱取5mg雷帕霉素對(duì)照品，用PBS溶液做溶劑，使成濃度為50μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液適量于具塞試管中，加入適量的PBS溶液，制成濃度為0、2.5、5、10、15、20、25、30μg/ml的雷帕霉素標(biāo)準(zhǔn)液。標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=0.0556x-0.0019相關(guān)系數(shù)R2=0.9999。測(cè)試結(jié)果：在0～30μg/ml的雷帕霉素濃度范圍內(nèi)，吸光度-濃度的線性關(guān)系良好，由此可知，此定量分析方法是可行的。

2.2.3 準(zhǔn)確度通過(guò)測(cè)試已知量雷帕霉素的回收率來(lái)評(píng)價(jià)測(cè)試方法準(zhǔn)確度，用PBS溶液配制3個(gè)濃度（每個(gè)濃度3個(gè)樣品）的雷帕霉素溶液，測(cè)試樣品的濃度，計(jì)算回收率及其RSD。結(jié)果：平均回收率為96.5%，RSD為0.42%，均符合要求。

2.2.4 精密度（重復(fù)性）連續(xù)6次測(cè)試10.19μg/ml雷帕霉素標(biāo)準(zhǔn)液的濃度，測(cè)試結(jié)果是9.76、9.80、9.83、9.78、9.76、9.79（μg/ml），相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為0.24%。

2.2.5 檢測(cè)限和定量限檢測(cè)限（DL）和定量限（QL）是根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差（σ）和標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率（S）來(lái)計(jì)算的。通過(guò)幾份空白樣品的分析，然后計(jì)算其響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差，測(cè)出分析背景響應(yīng)值的大小。測(cè)得的空白樣品響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差為0.0023。

用該方法進(jìn)行雷帕霉素含量測(cè)試的檢測(cè)限為0.14（μg/ml），定量限為0.41（μg/ml）。

2.3 穩(wěn)定性取濃度約為19.56μg/ml的雷帕霉素的PBS溶液于具塞玻璃容器中，置入（37±2）℃恒溫水浴中，分別在0天、1天、2天、7天、14天測(cè)試溶液的濃度，測(cè)試結(jié)果分別為19.51、19.42、19.49、19.30、19.44（μg/ml），濃度無(wú)變化，RSD為0.42%，符合要求。

3 結(jié)論

采用PBS溶液做介質(zhì)，進(jìn)行體外釋放測(cè)試方法是穩(wěn)定的、適用的，專屬性、線性關(guān)系良好、精密度、準(zhǔn)確度均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典二部ISBN978-7-75067-4438-6附錄XIX A藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社出版,2010.

[2] 李昕躍,馬斌.金屬支架藥物涂層釋放量的比較[J].大連大學(xué)學(xué)報(bào),2004,25(6).

[3] 陳玉成,熊素彬,幸浩洋,等.雷帕霉素緩釋涂層支架在模擬心臟泵血狀態(tài)下的體外釋藥研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2008(09).

R927.2

A

1673-5846(2013)02-0069-02

1 威海市立醫(yī)院，山東威海 264209

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