色譜-質譜聯用在藥物代謝動力學研究中的應用

易 嘯 張開蓮

（瀘州醫學院藥學院 四川 瀘州 646000）

藥物代謝動力學（Phar macokinetic）是定量研究藥物在生物體內吸收、分布、代謝和排泄規律，并運用數學原理和方法闡述血藥濃度隨時間變化的規律的一門學科。隨著新型分析技術的發展，藥代動力學分析手段日趨多樣化。其中，色譜-質譜聯用已成為較為先進且應用廣泛的分析手段，主要包括氣相色譜串聯質譜和液相色譜串聯質譜法。本文主要介紹目色譜-質譜聯用技術在藥物代謝動力學方面的應用。

1 高效液相色譜串聯質譜法

液質聯用（LC-MS）又叫液相色譜-質譜聯用技術，它以液相色譜作為分離系統，質譜為檢測系統。樣品在質譜部分和流動相分離，被離子化后，經質譜的質量分析器將離子碎片按質量數分開，經檢測器得到質譜圖。液質聯用體現了色譜和質譜優勢的互補，在藥動學研究中到了廣泛的應用，主要有以下優點：

1.1 提高了對目標物的分析靈敏度和專屬性：以質譜儀作為檢測系統，特定選擇離子作為信號記錄對象，使其對目標物的響應更高，有更低的檢出限，而特定檢測離子選擇條件，使得其對該目標物的檢測專屬性更強，因此在藥動學研究中備受青睞，成為體內藥物分析研究中不可或缺的有效工具［1］。洪馨等［2］在國［作者簡介：易嘯，男，1986年，學士學位，助理工程師，主要從事色譜檢測方面工作。］內首次采用了LC-MS聯用技術對血漿中的雙氫青蒿素進行了測定，其日內、日間精密度均小于10%，回收率在98.14%～101.19%之間，方法靈敏度高，可用于雙氫青蒿素的藥代動力學及生物利用度的研究。楊波等［3］，采用液質連用法，測定人血漿中的艾芬地爾，其工作曲線的線性范圍為0.25～50g／L，日內、日間精密度分別小于2.7%和6.5%，平均回收率為101.3%～105.0%，檢測限為0.08g／L。該方法靈敏度高，特異性好，可以用于臨床試驗的血漿樣品的檢測。第四軍醫大學的喬逸［4］等，利用LC-MS／MS測定美多拉宗的血藥濃度，其高靈敏度得到很好驗證。

1.2 極大提高了分析效率。質譜儀對碎片離子的篩選，使得一部分極性相當的物質可以被輕易的區別開來，使得分析人員在分離極性相似的物質的時候，可以相同色譜條件條件，在分離度不佳的情況下分析出在高效液相色譜儀中無法祛除干擾的樣品，極大提高了分析效率，同時，隨著儀器的不斷改進，實現了高度自動化，減輕了分析人員的工作量，提高了工作效率。

從上述結果可以看出，液質聯用，既保留了液相色譜分離好、分析時間短、被測組分不受沸點影響，適用范圍廣的特點，更加突出了質譜靈敏度高，抗干擾能力強的特點，將是未來大有前途的一種分析方法。但由于該法方儀器價格昂貴，保養費用高，使得該法的推廣受到一定的限制，但隨著科技的發展，液質聯用法，必將成為藥代動力學領域最廣泛采用的分析手段。

2 氣相色譜串聯質譜法

氣相色譜串聯質譜法，簡稱氣質聯用法，是將氣相色譜（GC）與質譜檢測器串聯起來的分析方法。其原理是將樣品氣化后，以載氣（通常為氦氣）為載體進入色譜柱進行分離后，進入質譜儀，由質譜儀將被測組分電離后進入特定電場，檢測其離子碎片。氣質聯用法，有以下優點。

2.1 分離效果好，可用于組分復雜血液樣品的分析：氣質聯用，繼承了氣相色譜分離效果好的特點，更兼顧了質譜儀專屬性強的特點，可以在血液中干擾物質多的情況下進行多組分的分析。金永春［5］等，利用氣質聯用對人體血液樣本中10種常見毒品進行了分離分析，有著良好的效果，氣質聯用對于復雜樣品的多組分分析，有得天獨厚的優勢。

2.2 較高的靈敏度及專屬性：早在1985年李 銳［6］等，利用氣質聯用法，對青蒿酯鈉在體內的代謝進行研究，對該藥物用藥提供了實際指導意義。蔡葵花［7］等，采用氣質聯用法，測定血中嗎啡的濃度，標準曲線在1.0～60ng／ml之間呈良好的線性關系，日間日內RSD＜9.0%，回收率達96%。并進行了8例腫瘤病人口服30 mg嗎啡控釋片、普通片的藥代動力學的研究。為該藥的臨床研究提供了依據。

2.3 可用于未知物質的分析：氣質聯用儀通過對電離后的離子碎片的比對分析，可以進入相應譜庫進行檢索，按離子碎片組成比較進行相似度比較，從而找出與當前分析物質離子碎片相似的已知物質名稱，為未知物的鑒定提供參考依據。當前，一些知名大品牌儀器商的譜庫中，已包含5000多種常見化合物，可以滿足日常分析的需求。

但是，氣質聯用法，也有其先天不足，如分析溫度高，只使用于沸點較低，熱穩定性較好的物質的分析，對于不易揮發，不易氣化的物質不適用的缺點，而且，分析儀器價格較為昂貴，也是其廣泛使用的一大障礙。

綜上，隨著色譜分析技術的發展，藥代動力學可采用的方法更加豐富。各種方法互有優勢與缺點，可相互補充。氣相色譜質譜法和液相色譜質譜法，都有靈敏度高，抗干擾強，專屬性好的優點。液質聯用由于不受被測組分沸點的影響，適用范圍較氣質聯用更廣。氣質聯用，雖然受被測組分沸點、熱穩定性影響，應用收到局限，但較液質法而言，有分離更好，可以對未知組分進行鑒別的功能。因此，在日常科研活動中，可以采取多種手段相互補充的方式進行研究，對藥代動力學的推進，有積極的影響。

［1］ 張廣洲等液相色譜-質譜聯用技術在體內藥物分析中的應用進展［J］，齊魯藥事，2006年，第25卷 第4期：236-237

［2］ 洪馨等，高效液相色譜-質譜聯用技術測定人血漿中雙氫青蒿素的含量［J］，分析測試學報，2005，24（1）：46～48

［3］ 楊波等，液相色譜電噴霧串聯質譜法測定人血漿中的艾芬地爾［J］，色譜，2008年5月，322-326

［4］ 喬逸等，LC-MS／MS法測定美托拉宗血藥濃度及其藥物動力學研究［J］，中國藥師2011年，第14卷第5期：606-609

［5］ 金永春等，人血中10種常見毒品的GC-MS同時檢測方法研究［J］，分析測試學報，2007，26：151-155

［6］ 李銳等，應用氣-質聯用等法對青蒿酯鈉體內命運的研究［J］，藥學學報，1985，20（7）：485-490

［7］ 蔡葵花等，氣質聯用（GC／MS）研究嗎啡控釋片的藥代動力學［J］，《藥物分析雜志》，1996年02期：89-91