蝙蝠葛堿對阿爾茨海默病小鼠海馬組織Aβ水平的影響

費洪新等

摘 要：目的：研究中藥提純成分蝙蝠葛堿對阿爾茨海默病小鼠海馬組織Aβ水平的影響。方法：阿爾茨海默病小鼠隨機分成對照組、模型組、治療組、蝙蝠葛堿組。給予蝙蝠葛堿灌胃，觀察小鼠Aβ的變化。結果：與模型組比較后，蝙蝠葛堿組Aβ水平明顯降低。結論：蝙蝠葛堿能降低Aβ水平，對阿爾茨海默病小鼠具有一定的海馬組織保護作用。

關鍵詞：蝙蝠葛堿；阿爾茨海默病；小鼠

蝙蝠葛堿（Dauricine，DAU）是祖國醫藥北豆根植物的提純有效成分單體，具有廣泛的藥理作用，包括抗氧化作用[1]、腦缺血保護作用[2-3]等。基于此實驗開展DAU對腦部疾病阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD）海馬組織密切相關的因子、淀粉樣斑塊核心成分、即β-淀粉樣蛋白（Amyloid beda，Aβ）[4]的研究，研究DAU對AD小鼠Aβ的影響作用。

1 實驗材料

1.1 實驗動物

3月齡標準體重APP/PS1雙轉基因小鼠和同月齡、同背景C57小鼠，常溫、常濕、自由攝取食物，飼養在黑龍江中醫藥大學實驗動物中心。

1.2 藥物

西藥陽性對照吡拉西坦購于湖南迪諾制藥有限公司（批號130325）；DAU購于MUST公司，批號MUST-13010313，純度為98.66%；Aβ酶聯免疫試劑盒（批號20140401），南京建成生物工程研究所生產。

2 方法

2.1 分組

AD小鼠共18只，隨機分為3組，其中模型組6只、治療組6只、DAU組6只；另設定對照組6只。

2.2 給藥

實驗動物對照組小鼠6只給予生理鹽水灌胃；模型組6只給予生理鹽水灌胃；治療組6只給予吡拉西坦（0.62gokg-1·d-1）灌胃；DAU組6只給予DAU（20mgokg-1·d-1）灌胃，灌胃時間為2周。

2.3 Aβ檢測

小鼠斷頭、取海馬組織、勻漿、靜置、離心、分裝、-20℃低溫保存備用。按Aβ酶聯免疫試劑盒說明書操作進行，450nm波長處測定各孔OD值，記錄并且分析數據。

2.4 統計學分析

實驗采用SPSS19.0軟件分析處理，單因素方差分析實驗的原始數據。

3 結果

3.1 動物海馬組織Aβ的檢測

DAU對AD小鼠海馬Aβ影響的結果采用x±s表示，單位pg/ml。實驗中與對照組（260.6825±40.3829）比較的過程中，模型組小鼠海馬組織Aβ的含量（410.0873±36.4436）較高（P<0.05），說明模型建立成功，模型穩定；經過治療后與模型組比較，治療組（280.7222±44.0904）、DAU組（310.6429±29.8401）小鼠海馬組織Aβ的含量較低（P<0.05），說明DAU對AD小鼠的AD癥狀顯著改善，提示DAU對AD的治療效果較好；治療組（280.7222±44.0904）與DAU組（310.6429±29.8401）比較，小鼠海馬組織Aβ的含量相當（P>0.05），差異無統計學意義，說明西藥吡拉西坦與中藥的提純成分DAU二者比較無顯著差異。

4 討論

AD是一種進行性腦組織功能減退的、腦組織迅速老化的神經系統疾病，表現為患者記憶力的下降，認知能力的下降，在老年人的人群中高發，其主要的病理改變在腦組織老年斑的沉積，在老年斑中的核心成分主要是Aβ的沉積、神經元數量的減少、神經原纖維纏結進而形成老年斑[5]。人的年齡在不斷增長，老化大腦出現神經元數目減少的區域主要集中在海馬、皮質等區域[6]。

實驗主要對AD密切相關的因子、AD發病中心環節、老年斑的核心成分Aβ進行了檢測。實驗結果顯示，實驗中與對照組比較的過程中，模型組小鼠海馬組織Aβ的含量（410.0873±36.4436）較高（P<0.05），說明模型建立成功，模型穩定；經過治療后與模型組比較，治療組、DAU組小鼠海馬組織Aβ的含量較低（P<0.05），說明DAU對改善AD小鼠的AD癥狀顯著，提示DAU對AD治療效果較好；治療組與DAU組比較，小鼠海馬組織Aβ的含量相當（P>0.05），說明西藥吡拉西坦與中藥的提純成分DAU二者比較無顯著差異。

綜上所述，DAU可以降低Aβ的水平，減輕AD患者的臨床癥狀，從而保護AD小鼠的海馬組織結構，延緩機體的老化，延長人們的壽命。

參考文獻

[1]何麗婭，李立中，吳基良.蝙蝠葛堿的抗氧化實驗研究[J].中草藥，1997，28（8）：479-481.

[2]李艷紅，黃向江，盧浩浩.蝙蝠葛堿對大鼠局灶性腦缺血及線粒體氧化損傷的保護作用[J].華中科技大學學報（醫學版），2005，34（3）：270-273.

[3]李艷紅，龔培力.蝙蝠葛堿對實驗小鼠腦缺血的保護作用[J].中國藥理學通報，2004，20（5）：564-567.

[4]Wu Y L，Xin X J，Xin X L，et al.Research progress about the regulation of GXXXG structures in the Alzheimer-related protein[J].Chin Pharmacol Bull，2011，27（1）：1-4.

[5]Mohandas E，Rajmohan V，Raghunath B.Neurobiology of Alzheimer's disease[J].Indian Journal of Psychiatry.2009，51（1）：55-61.

[6]Rossi L，Mazzitelli S，Arciello M，et al.Benefits from dietary polyphenols for brain aging and Alzheimer's disease[J].Neurochem Res，2008，33（12）：2390-2400.

作者簡介：費洪新（1978-），男，黑龍江佳木斯人，在讀博士，講師，從事癡呆、痛風、腫瘤研究。

通訊作者：周忠光（1957-），男，黑龍江哈爾濱人，博士，教授，博導，從事癡呆、痛風、腫瘤研究。