作者簡介:田松英(1964—),女,山東諸城人,研究員,主要從事園林綠化工作。中圖分類號:S688文獻標識碼:B文章編號:16749944(2014)05009702
1引言
橡皮樹是桑科榕屬植物,在北方為盆栽觀賞花卉,橡皮樹因管理粗放,適應性強,葉片光亮等優點備受人們喜歡。美國金星大圓葉是中科院篩選的優良橡皮樹品種,其株型美觀,葉橢圓近圓形,葉片橢圓近圓形,長6~8cm,寬5~7cm,深綠色,有光澤。托葉紅色。適于中小型盆栽,是優良的室內觀葉植物。對其擴繁推廣具有較高的經濟效益和社會效益。為此筆者選擇了組培途徑批量生產橡皮樹脫毒種苗,滿足園藝栽培的大量需求。
2材料與方法
2.1實驗材料來源和培養
實驗材料來源于北京中科院種苗,引進的種苗經過1個月的正常管理,生長正常后取其生長飽滿的嫩莖和芽尖做外植體。
2.2外植體的處理方法
用刀片采取外植體后先用清水加洗潔精清洗干凈,再用蒸餾水沖洗5遍,瀝干水后用0.1%氯化汞水溶液消毒5min,用蒸餾水沖洗干凈放入無菌室的超凈工作臺上準備接種。
2.3培養基的篩選
分化培養基的篩選:選用基本培養基MS+蔗糖40g+瓊脂條8g+不同濃度的6-BA+KT+2-4D。
生根培養基的篩選:選用基本培養基1/2MS+20g蔗糖+8g克瓊脂條+不同濃度的IAA和IBA。
2.4試驗流程
母液的配制(大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物、激素)→制培養基→外植體選擇處理→消毒→接種→培養→數據匯總→分析討論。
2.5實驗內容
根據表1和表2的培養基配比進行最佳培養基篩選,篩選出橡皮樹分化和生根的最佳植物激素濃度配比。確定最佳配方后進行增殖繼代培養,繼代苗達到一定數量后可進行批量生根培養,獲得栽培種苗。
表1分化培養基激素濃度(mg/L)配比
配比序號6-BAKT2-4.D10.50.250.121.00.750.131.51.00.140.51.00.151.00.50.161.50.750.1
表2生根培養基激素濃度(mg/L)配比
配比序號IAAIBA10.250.120.50.130.250.240.50.2
3組織培養實驗結果與分析
3.1增殖培養階段
通過多次實驗數據記錄,通過加權平均分析獲得表3,從表中可見配比5應是最佳培養方案,即:MS+蔗糖40g/L+瓊脂條8g/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+2-4D0.1 mg/L 為繼代增殖培養基。培養基pH值6.0。
表3不同激素濃度(mg/L)配比分化效果
培養序號分化程度繼代周期繼代系數1差501.52較好2453一般4044一般3535好2076一般303
3.2誘導生根階段
在生根培養時采用MS(大量元素1/2)+ 20g蔗糖+8g克瓊脂條+不同濃度的IAA和IBA。通過交叉實驗(表4)獲得最佳生根培養基為1/2MS大量元素+IAA05mg/L+IBA01-02mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂8g/L,pH值58~60。
3.2煉苗與移栽階段
生根培養基中的小苗根系發育完好,半數根長達到1.2cm以上時可準備煉苗。將煉苗的試管苗取出,洗凈培養基后移入珍珠巖獲蛭石中培養。初期的試管苗比較嬌嫩,一定要注意溫度、光照和濕度的調節,這一時期是成功的關鍵環節。在珍珠巖(蛭石)培養15~20d后,正式移栽到消毒后的培養基質中進行栽培管理。
表4不同濃度(mg/L2)激素對生根的誘導
IAAIBA生根時間生根率0.250.112700.50.17960.250.210830.50.2795
4結論與討論
通過對不同激素濃度的培養基的實驗對比,篩選出了最佳橡皮樹分化的培養基配方是:MS+2.4-D0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖40g/L+瓊脂條8g/L。pH值為5.8~6.0。培養室溫度18~25°的條件下30d可繼代一次,平均每瓶可繼代5瓶以上。最佳生根的培養基配方是:1/2MS大量元素+IAA0.5mg/L+IBA0.1~0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂8g/L。pH值5.8~6.0。
鐵鹽的配制:在配制鐵鹽時一定注意水浴加熱慢慢融化螯合。
最佳培養流程:母液的配制、培養基的制作(包括培養基的pH值調試)、培養基消毒(消毒后穩定12h以后接種最好)接種室用紫外線消毒20min以上,接種前20min打開超凈工作臺的風機,需接種的外植體在接種后放入緩沖間,然后在培養室內進行分化(生根)培養。
煉苗:組培苗的煉苗方式應該遵循循序漸進式,先打開培養器皿的封口膜,幾小時后用鑷子小心取出植株用清水清洗干凈根部的培養基,再用蛭石或珍珠鹽在栽植育苗盤內,噴水后在實驗室內穩定3~4d,然后放入溫室內煉苗(不能暴曬),兩周后脫毒苗生長正常,可以入消毒后的培養土中正常養護。成活率在95%以上。為了節約成本可以對生根培養基進行回收利用。根據實驗數據分析,經過脫毒的橡皮樹繁殖速度快,根系發達,抗性強,植株整齊,株型美觀,長勢旺盛,且易形成批量生產,生根苗當年生長量在15cm左右,兩年就能成為商品出售。
參考文獻:
[1] 陶秀冬,李康,楊秀文,等.橡皮樹組織培養及快繁技術研究[J].新疆農業科學,1996(6).
[2] 黃毅.食用菌生產理論與實踐[M].
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