四氫胡椒堿對辣椒堿軟膏透皮滲透性的影響

師伯省劉永新彭麗華付建明

四氫胡椒堿對辣椒堿軟膏透皮滲透性的影響

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目的 評價四氫胡椒堿等透皮滲透劑對辣椒堿軟膏體外透皮作用的影響。方法 分別制備含95%乙醇的辣椒堿軟膏及以2%四氫胡椒堿乙醇溶液，2%二甲基亞砜乙醇液和2%二甲基亞砜乙醇液為透皮滲透劑的辣椒堿軟膏。采用Franz擴散池，用離體小鼠皮膚為透皮屏障，以高效液相色譜法測定體外接受液中辣椒堿的含量，計算其累計透過量（Q），將數(shù)據(jù)進行釋放動力學模型擬合。結(jié)果 樣品辣椒堿軟膏體外釋藥符合Higuchi方程，含95%乙醇的辣椒堿軟膏有一定的促滲作用，含透皮滲透劑的辣椒堿軟膏具有促滲作用，效果最佳的是四氫胡椒堿，其次是氮酮，最后為二甲基亞砜。結(jié)論 以2%四氫胡椒堿為透皮滲透劑的辣椒堿軟膏的透皮促進效果更佳，可促進藥物有效成分快速有效地滲透。

四氫胡椒堿；辣椒堿；氮酮；二甲基亞砜；促滲劑；經(jīng)皮滲透

四氫胡椒堿是由生物堿胡椒堿（piperine）氫化而來。四氫胡椒堿除確定的抗驚厥、抗癲、鎮(zhèn)痛以及抗蠅蟲作用外，還可促進天然成分快速有效滲透，使皮膚組織對功效成分的吸收利用得到顯著改善和促進，可協(xié)助藥品、化妝品功效成分快速滲透皮膚。同時也是制藥行業(yè)中多種藥物必需的原料和中間體。是目前唯一從植物中提取出來具有強效促滲透作用的安全、高效、天然的促滲成分。辣椒堿是辣椒堿軟膏的主要活性成分，是一種天然的植物堿，主要用于鎮(zhèn)痛、止癢、活血等，其鎮(zhèn)痛強度與嗎啡等同，但較嗎啡作用持久，且不成癮。作為第一推薦的外用鎮(zhèn)痛藥物，其半衰期較短，且具有較強的首過效應(yīng)，在大鼠體內(nèi)，辣椒堿的半衰期為7.06 min，在治療慢性疼痛臨床上一般需要用藥約一周以上才有明顯的效果，因此辣椒堿不適合口服或注射給藥，而較適合透皮給藥。本文研究了四氫胡椒堿等不同滲透劑對辣椒堿軟膏透皮滲透性的影響，觀察了三種促滲劑對其體外透皮的促滲作用，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 辣椒堿軟膏（長春普華制藥股份有限公司）、四氫胡椒堿（河南倍特生物科技有限公司）、氮酮（天津市巴斯夫化工有限公司）、二甲基亞砜（天津市富宇精細化工有限公司）、辣椒堿對照品（中國藥品生物制品檢定所），重蒸餾水，色譜純甲醇，其他試劑為分析純。

1.2 動物 190～230 g雄性大鼠（河南中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供）。

1.3 儀器 Lc-10AT vp plus高效液相色譜儀（日本島津）；SPD-1OA vp plus檢測器；RYJ-6B型藥物透皮擴散實驗儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；LG16-W離心機（北京醫(yī)用離心機廠）

2 方法與結(jié)果

2.1 辣椒堿軟膏的制備 樣品A：取市售辣椒堿軟膏1 g，加95%乙醇0.5 ml攪拌均勻即可，作空白對照；樣品B：取市售辣椒堿軟膏1 g，加2%四氫胡椒堿乙醇溶液0.5 ml，攪拌均勻；樣品C：取市售辣椒堿軟膏1 g，加2%氮酮乙醇溶液0.5 ml，攪拌均勻；樣品D：取市售辣椒堿軟膏1 g，加2%二甲基亞砜乙醇溶液0.5 ml，攪拌均勻。

2.2 離體鼠皮的制備 取事先準備好的試驗鼠，用乙醚麻醉后固定四肢，用電動剃毛剪除腹部毛，剪下腹部皮膚，除去皮下脂肪層和血管及殘留物，用0.9%氯化鈉注射液洗凈，檢查其完整性，置于冰箱中保存，備用。

2.3 高效液相色譜法（HPLC）測定辣椒堿[1-2]

2.3.1 色譜條件 色譜柱為C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相為甲醇:水:磷酸（65.0:35.0:0.1）；柱溫30 ℃；流速為1.0 ml/min；檢測波長為280 nm；進樣量為10 μl。

2.3.2 制備標準曲線 對照品25 mg精密稱取置于25 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，放置，即為標準儲備液。然后分別取標準儲備液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml稀釋至25 ml，進樣，測定。以測得峰面積Y為縱坐標，辣椒堿的質(zhì)量濃度X為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程Y=7 826.2+219 370.9X，r=0.9995，表明辣椒堿在0.2～1.0 μg/ml與峰面積成良好的線性關(guān)系。

2.3.3 制備供試品溶液 于4 ml離心管中加入接收液，4 000 r/min（離心半徑r=4 200 mm），離心10 min即得。

2.3.4 透皮滲透實驗 從冰箱中取出鼠皮，恢復至室溫，0.9%氯化鈉注射液沖洗，用濾紙吸干表面液體，將其固定于Franz擴散池的兩個半池之間，角質(zhì)層面向供給池，真皮層面向接受池。分別準確稱取以上4種樣品0.4 g，均勻涂于鼠皮皮膚表面，擴散池有效面積為2.83 cm2，擴散池容積為7 ml。在接受池內(nèi)置一磁力攪拌棒，接受池置磁力攪拌器上，在恒溫（37.1 ±1.1）℃、恒速（3 000 r/min，離心半徑r=4 200 mm）下不斷攪拌。于涂藥后0、15、30、60、120、180、240、300、360 min分別定時從接受池取樣4 ml（接受液為0.9%氯化鈉注射液），取樣后立即補充同體積的接受液，于280 nm處測定取出接受液的峰面積（Y），將其代入標準曲線方程，計算辣椒堿質(zhì)量濃度。

一定時間單位面積的累計透過量Q（μg/cm2）按下式計算：

式中Qs為第n次取樣時的累積滲透量；V是接受液體積；Vi為第i次取樣的體積；S是擴散面積；Ci為第i次取樣測得的接受液中辣椒堿的質(zhì)量濃度。

圖1 3種不同促滲劑對辣椒堿軟膏經(jīng)皮滲透的影響

結(jié)果見圖1，可見3種促滲劑對辣椒堿軟膏都有一定的促進作用，作用效果最佳的是四氫胡椒堿，其次為氮酮，最后是二甲基亞砜。

3 討論

滲透劑對藥物經(jīng)皮滲透的影響受藥物理化性質(zhì)、載體、促滲劑濃度以及其他多種因素的影響，其中促滲劑的影響較為顯著，因此促滲劑對經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的研制具有相當大的影響。透皮滲透劑通過打開新的滲透途徑，增進類脂骨架無序性而增加皮膚的非均勻性，從而促進藥物滲透。四氫胡椒堿可以促進藥物有效成分快速有效的滲透，其作用機制是通過干擾皮膚角質(zhì)層的細胞間脂質(zhì)，增加脂質(zhì)雙層的流動性，這種增強的流動性可促進藥物分子和活性物分子擴散通過脂質(zhì)雙層的碳氫化合物部位，增加藥物分子/營養(yǎng)物質(zhì)和細胞膜的親和能力。

實驗選用的促滲劑四氫胡椒堿、氮酮、二甲基亞砜，均具有不同的促滲機制。其中四氫胡椒堿不溶于水，為得到均勻的促滲劑溶液，選用95%的乙醇作溶劑，而95%的乙醇也有一定的促滲作用，因此實驗采用95%乙醇作為對照。

考查透皮促滲劑的促滲作用采用體外透皮實驗，以離體皮膚為屏障，考察藥物的累計透過量，這種實驗方法可以排除體內(nèi)多種因素的干擾，重復性好，易于分析。但體外透皮實驗結(jié)果的真實性和實驗結(jié)論的可靠性有待研究。體外透皮實驗體現(xiàn)不了機體完整統(tǒng)一的內(nèi)環(huán)境和體液調(diào)節(jié)，研究結(jié)果與整體藥效的相關(guān)性，也需要進一步考察[3]。本課題為選用促滲劑，開發(fā)辣椒堿經(jīng)皮制劑提供實驗依據(jù)，具有重大的社會效益和經(jīng)濟效益。

[1] 張鵬威.辣椒堿透皮微乳的研究[D].天津:天津大學,2009: 169-172.

[2] 張鵬威,張莉,徐貴華,等.促滲劑對辣椒堿經(jīng)皮滲透的影響[J].海南醫(yī)學院學報,2010,16(8):964-970.

[3] 顧圣瑩,丁雪鷹,高靜,等.透皮促滲劑對雙烏跌打損傷藥方體外透皮吸收和體內(nèi)藥效的影響[J].中國藥學雜志,2009,44(8):607-611.

R97

A

1673-5846(2014)07-0021-02

1鄭州市中醫(yī)院，河南鄭州 450007

2河南倍特生物科技有限公司，河南鄭州 450007