黃連爐甘石洗劑鹽酸小檗堿含量測定的研究

朱銳金 陳小銳 潘瑋瑋

黃連爐甘石洗劑鹽酸小檗堿含量測定的研究

朱銳金 陳小銳 潘瑋瑋

目的 建立黃連爐甘石洗劑鹽酸小檗堿含量的質量控制標準。方法 采用高效液相色譜法測定處方中鹽酸小檗堿的含量。結果 建立高效液相色譜法測定處方中的鹽酸小檗堿含量的方法。鹽酸小檗堿的進樣量在10～100 μg/ml范圍內呈良好的線性關系（R2=0.9996），平均回收率為102.01%，RSD為0.49%（n=6）。結論 本方法專屬性強、準確、重現性好，可用于黃連爐甘石洗劑鹽酸小檗堿含量的質量控制標準。

黃連爐甘石洗劑；鹽酸小檗堿；高效液相色譜法

黃連爐甘石洗劑是由爐甘石、鹽酸小檗堿、氧化鋅、甘油、薄荷腦等制成，具有消炎、保護皮膚、止癢與輕度收斂的作用。此洗劑是清遠市慢性病防治醫院常用制劑[1]，為將其作為醫院的注冊制劑，必須制定質量標準。本實驗采用高效液相色譜法（HPLC）測定處方中的鹽酸小檗堿的含量[2]，以對該制劑中鹽酸小檗堿的含量進行質量控制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 安捷倫1020高效液相色譜儀。

1.2 試藥 黃連爐甘石洗劑3批（清遠市慢性病防治醫院，批號：20130322、20140501、20140829）。鹽酸小檗堿對照品（批號：110713-200911）由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent C18（4.6 mm× 250.0mm，粒直徑5 μm）；流動相：以磷酸鹽緩沖液[0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.05 mol/L庚烷磺酸鈉溶液（1:1），含0.2%三乙胺，并用磷酸調節pH至3.0]-乙腈（60:40）；檢測波長：263 nm；流速：1.0 ml/min；進樣量：20 μl；柱溫：20 ℃；理論板數按鹽酸小檗堿計算應不低于2 500。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸小檗堿對照品0.01076 g（批號：110713-200911，純度：86.8%），置100 ml容量瓶中，用沸水溶解，放冷，用水定量稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。精密量取對照品貯備液5 ml，至10 ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 精密稱取混懸液2 g，置100 ml容量瓶中，加沸水適量水浴30 min，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，靜置，精密量取上清液5 ml，置25 ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得，作為供試品溶液。

2.4 陰性對照溶液的制備 按處方比例與工藝制成缺鹽酸小檗堿的陰性樣品，同供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。

2.5 方法學考察

2.5.1 專屬性試驗 分別吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液20 μl，照上述色譜條件注入色譜儀，測定，記錄色譜圖。供試品色譜中，在與對照品溶液中鹽酸小檗堿色譜峰對應的位置上，有相同保留時間的色譜峰，供試品鹽酸小檗堿與相鄰雜質分離度大于1.5，理論塔板數不小于2500，且陰性對照色譜圖在此保留時間無干擾，表明陰性對照對試驗無干擾（圖1～3）。

2.5.2 線性關系考察 精密量取對照品儲備液1.25、 2.50、5.00、7.50、10.00 ml，分別置10 ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，按含量測定方法測定，以峰面積A與濃度C繪制標準曲線，得回歸方程：y=0.0110x+2.0181，R2=0.9996，表明本品濃度在10～100 μg/ml范圍內與峰面積呈良好線性關系（圖4）。

圖1 供試品溶液色譜圖

圖2 對照品溶液色譜圖

圖3 陰性對照色譜圖

圖4 標準曲線

2.5.3 精密度試驗 取2.2項下制備的對照品溶液，連續進樣6次，每次進樣20 μl，對峰面積進行考察，記錄鹽酸小檗堿面積。各為：4 078.69482、4 074.12134、4 064.35059、4 061.34790、4 061.34790、4 056.94780。計算峰面積RSD值為0.21%。

2.5.4 重復性試驗 取同一批樣品（批號：20130322）6份，分別按2.3項下制備的供試品溶液，按上述色譜條件分別測定含量。結果分別為9.8181、9.7792、9.8487、9.8164、9.8454、9.7689 mg/g，RSD為0.34%。表明該方法重復性較好。

2.5.5 穩定性考察 取同一供試品溶液于0、2、4、 8、10、12 h按上述色譜條件測定鹽酸小檗堿峰面積。分別為8 310.43848、8 324.13574、8 299.73633、8 297.72949、8 303.95117、8 300.52539，RSD為0.12%。表明供試品溶液在12 h內基本穩定。

2.5.6 加樣回收試驗 精密量取已知含量的樣品混懸液1 g（批號：20130322）6份，分別精密加入已知鹽酸小檗堿對照品貯備液適量，按2.3項下方法提取并進樣測定。回收率RSD結果見表1。

2.5.7 樣品含量測定 取樣品3批（批號：20130322、201405010、20140829），按上述色譜條件測定鹽酸小檗堿的含量，分別為9.583、9.630、9.504 mg/g。

表1 加樣回收試驗結果

3 討論

本實驗采用的薄層色譜鑒別的方法對黃連爐甘石洗劑中薄荷腦進行鑒別[3]，結果表明供試品色譜中在與對照品色譜相應的位置上，顯現相同顏色的斑點，陰性對照無其他成分無干擾；專屬性強、重現性好。采用高效液相色譜法對鹽酸小檗堿進行含量測定[4]，鹽酸小檗堿的進樣量在10～100 μg/ml范圍內呈良好的線性關系（R2=0.9996），平均回收率為102.01%。因此，所建立的方法可作為黃連爐甘石洗劑的質量控制標準。

[1] 劉慧,孫志強,王徽.爐甘石臨床應用研究進展[J].齊魯藥事, 2010,29(8):489-490.

[2] 中華人民共和國國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010版(一部)[M].北京:中國醫藥科技出版社,2010:354,640.

[3] 胡亞非,魏元鋒.消炎退熱貼梔子、荊芥及薄荷腦的薄層鑒別[J].湖北中醫雜志,2007,29(8):60-60.

[4] 石雪蓉,郭力.HPLC測定黃連爐甘石洗劑中小檗堿的含量[J].華西藥學雜志,1998,13(3):192-195.

Study on the determination of berberine Calamine Lotion berberine hydrochloride

Zhu Ruijin Chen Xiaorui Pan Weiwei

Objective To establish the quality control standard of Rhizoma Coptidis Calamine Lotion berberine hydrochloride.Methods The contents were determined by high performance liquid chromatography in the prescription of berberine hydrochloride.Results The method to determine the content of berberine hydrochloride in the preparation by HPLC was established.Sample amount of berberine hydrochloride was linear in the range of 10～100 μg/ml(R2=0.9996),the average recovery was 102.01%,RSD was 0.49%(n=6).Conclusion This method is specific,accurate,reproducible,and can be used for quality control of Rhizoma Coptidis Calamine Lotion standard of the content of berberine hydrochloride.

Calamine Lotion Coptis;Berberine hydrochloride;HPLC

R284;R96

A

1673-5846(2014)08-0020-03

清遠市食品藥品檢驗所，廣東清遠 511517

朱銳金（1980-），主管藥師。研究方向：藥品檢驗、藥品監督

陳小銳（1981-），主管中藥師。研究方向：中藥學、藥品檢驗。Tel：13726973777/0763-3111219，E-mail：379943030@qq.com