結核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）臨床安全性的研究

張延煬 肖占沛 王長雙 馬雅婷 路明霞 張肖肖

結核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）臨床安全性的研究

張延煬 肖占沛 王長雙 馬雅婷 路明霞 張肖肖

目的 評價結核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）的臨床安全性。方法 隨機選取50例健康志愿者，對其皮內注射0．1 mL TB-PPD 試劑，注射結束后分別于30 min、24 h、48 h、72 h和7 d觀察其不良反應發生率，評價其安全性。結果 不良反應主要表現為發熱、接種部位疼痛、硬結等，未發現嚴重不良反應。結論 TB-PPD具有較好的臨床安全性。

結核菌素純蛋白衍生物；結核病；結核菌素試驗；安全性

結核病是至今仍然危害人民群眾身心健康的慢性傳染病，是全球關注的公共衛生問題和社會問題，是我國重點控制的重大疾病之一[1-2]。衛生部2011年3月公布我國肺結核疫情現狀，目前我國結核病年發病人數約為130萬，位居全球第2位[3]。新生兒卡介苗預防接種是我國目前結核病預防的一種重要措施，為了考核卡介苗免疫接種效果，目前多采用結核菌素純蛋白衍生物(TB-PPD)做結核菌素試驗，以使結核菌素的效價更穩定，反應更具特異性，但隨著臨床的廣泛應用，文獻報道PPD試驗不良反應亦隨之增加[4]。為研究和評價結核菌素純蛋白衍生物(TBPPD)的臨床安全性，本研究選擇河南省新鄉市為研究現場，于2013年1月～2013年5月對TB-PPD進行了臨床觀察和評價，結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 依照知情同意、自愿參加的原則，在新鄉市選擇≥3歲健康者50例，選擇標準為無肺內、外結核病，無呼吸道癥狀及全身不適癥狀者，無各種急、慢性疾病，無急性傳染病，無皮膚病或各種原因引起的皮膚過敏者，無結核病密切接觸史者，胸片證實無結核病病灶者，且皮試前7 d各項指標體檢正常。體檢項目包括：血、尿常規和生化檢查；拍攝胸片；心電圖檢查；基本體征檢查：心率、血壓、體溫等；腫瘤標志物檢查：甲胎蛋白和癌胚抗原兩項。

1.2 產品與注射方法

1.2.1 結核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）由北京祥瑞生物制品有限公司生產，為液體劑型，規格為50 IU/mL，批號為2013年1月1日（原液批號為：20120701），有效期至2014年1月30日。成品經中國藥品生物制品檢定所注冊檢定，其質量符合《中華人民共和國藥典》（三部2010版）的要求。

1.2.2 經體檢符合受試要求的觀察對象在簽署知情同意書后，于其左側前臂掌側前1/3處，經75%酒精消毒，待皮膚微干后，用1 mL注射器(25-26號針頭)皮內注射TB-PPD 0.1 mL，針頭斜面向上成5°刺入皮內，注射深度要合適，使局部出現一圓形隆起的皮丘。

1.3 安全性評價 對每個觀察對象皮試后留觀30 min，記錄局部和全身反應情況。接種后24 h、48 h、72 h、7 d采用米尺測量并記錄變態反應原所致皮膚硬結的2個直徑（最大徑和最大徑的垂直徑），以及局部(皮疹、疼痛、瘙癢、淋巴結病變等)和全身(發熱、心動過速或過緩、高血壓、低血壓等)反應，對有反應的觀察對象，追蹤至反應消失。相關反應分級標準見表1、表2。

表1 局部反應分級

表2 生命體征分級

對于上面分級表中未涉及的臨床異常情況，按照下列標準對不良反應進行強度分級評估：0級，未出現；1級，輕度，短時間的不適（＜48 h），無需醫療；2級，中度，輕度～中度，需要日常限制日常活動，不需要或只需要少量的醫療干預；3級，重度，顯著地限制日常活動，生活需要照顧，需要醫療，可能需要住院；4級，危及生命，極度限制日常活動，日常生活顯著地需要照顧，需要醫療和住院。從皮試起詳細記錄7 d內出現的局部或全身不良反應，如皮試7 d后體檢異常，于皮試后14 d再復查1次。

1.4 統計學方法 采用EpiData 3.02雙份錄入數據，由2人分別獨立完成，采用SPSS 17.0軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 基本情況 共有50名受試者參加TB-PPD皮試，12人中止了實驗。其中，因違背實驗方案1人，失訪2人，ST-T異常1人，AST異常1人，血紅蛋白異常1人，心肌供血不足1人，白細胞分類中中性粒細胞高1人，胸片提示異常4人。38名成功受試者中，年齡21～54歲，平均年齡（40.42±8.029）歲，平均體質量（68.76±11.015）kg，平均身高（166.08±7.899）cm；男女比例1.24∶1（見表3）。

表3 研究對象的基本情況

2.2 安全性研究

2.2.1 38名觀察對象TB-PPD皮試后30 min內未觀察到即時反應。

2.2.2 在TB-PPD后皮試24 h內，2人（5.3%）出現了異常的硬結現象，1人（2.6%）出現了異常的紅腫現象，但均無臨床意義；體溫均正常，最高體溫為：36.9℃；心率均正常，最低為59次/min，最高為96次/min；收縮壓和舒張壓各有1人出現輕度異常，分別為148 mmHg和92 mmHg，但均無臨床意義。

2.2.3 在TB-PPD皮試后48 h內，1人（2.6%）出現了異常的硬結現象，3人（7.9%）出現了異常的紅腫現象，但均無臨床意義；有1人（2.63%）出現水泡現象，反應分級是3級；體溫均正常，最高體溫為：36.9℃；收縮壓和舒張壓各有1人出現輕度異常，分別為149 mmHg和94 mmHg，但均無臨床意義。

2.2.4 在TB-PPD皮試后72 h內，1（2.6%）人出現了異常的紅腫現象，但無臨床意義；體溫均正常，最高體溫為：36.8℃；舒張壓有2人出現輕度異常，分別為93 mmHg和100 mmHg；有1人出現水泡，反應分級是5級；但此接種TB-PPD的反應者未經任何處理，水泡于72 h內消失。

2.2.5 在TB-PPD皮試后7 d的安全性體檢，38名受試者體征全部正常。

3 討論

近年來，世界結核病疫情均呈上升趨勢，我國結核病疫情在全球屬于高流行地區，是全球22個結核病高負擔國家之一，位居第2位[3]。該病具有發病率高、致死率高、傳染率高等特點。據統計，全球每年大約有200萬人死于結核病。導致該病的死亡率居高不下的主要原因是缺乏快速有效的檢測方法，未及時發現的患者一般病變嚴重，菌量較多，體質較差，失去了最佳的治療時期，影響療效，同時也必然導致結核菌的繼續傳染[5]，早發現早治療對控制結核病疫情有重要意義。

結核菌素蛋白純化衍生物(TB-PPD)是將結核桿菌培養于由甘油、天門冬素和枸櫞酸鹽等組成的培養基6～8周后經分離獲得的純結核菌蛋白質，皮下注射可引起特異的皮膚變態反應，目前主要用于機體免疫功能評價。結核菌素試驗是基于四型變態反應原理的一種皮膚試驗，用來檢測機體有無感染過結核桿菌。凡感染過結核桿菌的機體，會產生相應的致敏淋巴細胞，具有對結核桿菌的識別能力，當再次遇到少量的結核桿菌或結核菌素時，致敏T淋巴細胞受相同抗原再次刺激會釋放出多種可溶性淋巴因子，導致血管通透性增加，巨噬細胞在局部集聚。約在48～72 h內，局部出現紅腫、硬節的陽性反應。若受試者未感染過結核桿菌，則注射局部無變態反應發生[6]。

安全性評價內容主要是觀察TB-PPD皮試后的全身反應、局部反應和由TB-PPD皮試引起的其它不良事件。PPD試驗不良反應發生與多因素有關，如患者年齡、體質、精神因素等，故應注意PPD合理保存和正確使用，在做PPD試驗前應當注意個體差異，詳細詢問其過敏史，對發熱、體弱、嚴重衰竭者以及對其他預防免疫注射有過過敏者禁作該試驗[7]；同時，患急性傳染病(麻疹、百日咳、流行性感冒、肺炎等)、急性眼結膜炎、急性中耳炎、廣泛皮膚病患者及過敏體質者也不宜使用[8]；本次TB-PPD皮試后的局部反應發生率較低，僅為2.63%，且為輕度反應（水泡），未觀察到重度反應和其它不良事件。TB-PPD皮試引起的局部反應未經任何處理均在72 h內消失，同時引起的局部反應均無臨床意義，這說明TB-PPD具有較好的臨床安全性，也再次證明了TB-PPD純度高，性質穩定，不良反應少，只要早期發現，不良反應預后良好，一般不會發生死亡事件[4]。

[1] 張立新．依法控制結核,防治結核蔓延[J]．中國防癆雜志,1999, 21(3)：36．

[2] 馮淑范,吳建林．四川省結核病控制項目社會經濟學評價[J]．預防醫學情報雜志,2002,18(5)：403-404．

[3] 衛生部疾病預防控制局．衛生部介紹全國肺結核預防現狀[EB/OL]．2011-03-21．

[4] 王瑜,吳逢波,代國友．PPD致不良反應文獻分析[J]．現代預防醫學,2007,34(5)：942-945．

[5] 譚云洪,成詩明,楊華林,等．肺結核病人延誤及其影響因素分析[J]．實用預防醫學,2007,14(3)：965-968．

[6] 馬玙,朱莉貞,潘毓萱．結核病[M]．北京：人民衛生出版社,2006．

[7] 鄭桃英,沈小花．結核菌素試驗引起全身過敏性皮疹2例報告[J]．浙江預防醫學,2003,15(12)：74．

[8] 楊光華．病理學[M]．北京：人民衛生出版社,2001：355-356．

Objective To evaluate the safety of TB-PPD in humans. Methods A randomized clinical trial was conducted in 50 healthy volunteers. The subjects were intradermal injected with TB-PPD (0.1 mL). The adverse events following immunization (AEFIs) were observed after 30 minutes, 24 hours, 48 hours, 72 hours and 7 days of inoculation. Safety was evaluated by observing adverse reaction after inoculation. Results The main AEFIs were fever, local pain and scleroma. There were no other severe AEFIs. Conclusion The TB-PPD has good safety.

TB-PPD; Tuberculosis; Tuberculin test; Safety

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.29.089

2011年度河南省衛生廳政策研究重點課題 （YWZYZ 2011018）

河南 450016 河南省疾病預防控制中心 （張延煬 肖占沛王長雙 馬雅婷 路明霞 張肖肖）