隆堯雞腿蔥中3種水溶性維生素含量分析

趙杰，王菁菁，丁利杰，王庭欣，劉崢顥

（河北大學 質量技術監(jiān)督學院，河北 保定 071000）

雞腿蔥是大蔥的一種，它的味道鮮美，少辛辣，多香甜，嚼之清香盈口，是一種較好的調味品.隆堯雞腿蔥是雞腿蔥的一種，不僅具有較高的食用價值［1］，而且還有很高的藥用價值［2－5］：蔥白主治感冒風寒，腹痛尿閉，頭痛鼻塞；蔥葉能消腫解毒；蔥苒能散熱止痛；蔥須能通氣止血；蔥花能治心脾痛、腹脹；蔥實能補中益氣、明目.文獻報道，蔥中含有豐富的蛋白質、糖類、脂肪、維生素和微量元素等等［6－8］.本實驗將采用高效液相色譜方法對隆堯雞腿蔥蔥白部分的3種水溶性維生素（VC，VB1，VB2）的含量進行分析，并以萊蕪雞腿蔥作對比分析，詣在開發(fā)隆堯雞腿蔥的營養(yǎng)價值.

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

高效液相色譜儀：Agilent 1100型，安捷倫科技有限公司；數(shù)控超聲波清洗器：KQ－500DE 型，山東省昆山市超聲儀器有限公司；離心機：TGL－10C型，上海安亭科學儀器廠；料理機：山東九陽股份有限公司；電子天平：AR1140型，梅特勒－托利多儀器（上海）有限公司；超純水儀：NEX UP 1000型，韓國HUMAN 公司.

1.1.2 試劑

VC，VB1，VB2標準品：中國食品藥品檢定所；甲醇為色譜純，磷酸二氫鉀、鹽酸、草酸為優(yōu)級純，均購于天津市科密歐化學試劑有限公司.

1.1.3 樣品

河北隆堯雞腿蔥（LY），由隆堯質監(jiān)局提供；山東萊蕪雞腿蔥（SD），購于萊蕪蔬菜基地.采用蔥白部分進行實驗研究.

1.2 色譜條件

色譜柱：Kromat Universil C184.6 mm×250 mm，5 μm；檢測波長270 nm；流動相A：甲醇，B：0.05mol／L磷酸二氫鉀（pH＝6.0），梯度洗脫，流速1.0 mL／min，進樣體積20μL；柱溫35 ℃；保留時間25min.梯度設定見表1.

表1 梯度設置Tab.1 Setting of gradient

1.3 方法

1.3.1 標準溶液的配制

分別準確稱取標準品VC 15.0mg，VB15.0mg，VB25.0mg，用0.01mol／L鹽酸－0.001mol／L草酸（V:V＝1:1）混合溶液定容至500mL 容量瓶，配制成以下質量濃度的標準品儲備液備用：VC 30mg／L，VB110mg／L，VB210mg／L，將儲備液置于4 ℃條件下避光保存.

分別準確吸取2.5，5，7.5，10，12.5，15 mL 標準儲備液至50 mL 的容量瓶中，用0.01 mol／L 鹽酸－0.001mol／L草酸（V:V＝1:1）混合溶液定容，制成VC 1.5，3，4.5，6，7.5，9mg／L 的標準系列；VB10.5，1，1.5，2，2.5，3mg／L的標準系列；VB20.5，1，1.5，2，2.5，3mg／L的標準系列.

1.3.2 樣品前處理

準確稱取蔥樣品10g，加入0.01mol／L鹽酸－0.001mol／L草酸（V:V＝1:1）混合溶液打漿，再將樣品轉入離心管中，超聲波處理30 min，10 000r／min離心25 min，取上層清液定容至50 mL 容量瓶.將溶液經0.45μm濾膜過濾2次，取20μL進行進樣檢驗.

1.3.3 回收率和精密度的測定

取雞腿蔥樣品2份，按1.3.2的方法進行樣品前處理后，1份加入維生素標準溶液，另1份作為對照.利用高效液相色譜儀測定3種維生素的質量濃度，通過公式分別計算3種維生素的回收率和變異系數(shù).

回收率＝（加標后樣品質量濃度－樣品質量濃度）／加入標品的質量濃度×100%；

變異系數(shù)RSD%＝標準差／樣品質量濃度均值×100%.

2 結果

2.1 標準曲線的繪制

將5組標準系列混合樣品過4.5μm 濾膜過濾，質量濃度由小到大依次進樣，進樣量為20μL，記錄峰面積.分別以峰面積為橫坐標（X）、進樣質量濃度為縱坐標（Y）繪制標準曲線并計算回歸方程，得到3 種維生素的線性范圍和相關系數(shù)等指標，結果見表2.

表2 3種維生素線性范圍和相關系數(shù)Tab.2 Linear ranges and correlation coefficient of three kinds of vitamins

3種維生素在各自的測試質量濃度范圍內都具有良好的線性關系，相關系數(shù)都在0.999 0 以上，標準溶液的液相色譜見圖1.

圖1 3種維生素標準溶液色譜Fig.1 Chromatogram of standard solution of three kinds of vitamins

2.2 精密度

將混合標準溶液按實驗條件，連續(xù)進樣5次，考察方法的變異度，結果如表3所示.可以看出：變異系數(shù)RSD 為1.20%～2.21%，說明此方法的精密度良好，可以進行準確的定量分析.

表3 3種維生素的變異系數(shù)Tab.3 RSD of three kinds of vitamins

2.3 回收率

取一蔥樣品50mL，向其加入已知量的VC，VB1，VB2，充分混勻，按照上述條件進行測定.通過添加標準樣品，按照本方法測定回收率，其結果為85.48%～102.40%，見表4.說明此前處理及測定方法準確可行，可以進行準確的定量分析.

表4 高效液相色譜所測3種維生素的回收率Tab.4 Recovery rate of three kinds of vitamins

2.4 樣品的測定

對樣品進行處理，按照實驗方法提取和測定蔥中各維生素含量，然后根據(jù)標準曲線及回歸方程計算VC，VB1，VB2的含量，結果見表5.

表5 3種維生素的含量Tab.5 Content of three kinds of vitamins

續(xù)表5Continue tab.5

對所得的實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，即求各水溶性維生素的均值和標準偏差，并對2種雞腿蔥進行t檢驗.結果如表6所示.

表6 3種維生素檢測結果（M±SD）Tab.6 Test results of three kinds of vitamins（M±SD）

表6顯示，隆堯雞腿蔥中VC和VB2含量高于萊蕪雞腿蔥，且有統(tǒng)計學差異；而VB1含量二者沒有明顯差異.

3 討論

采用高效液相色譜法檢測雞腿蔥中3 種水溶性維生素的含量.3 種水溶性維生素的檢出限均為0.05mg／L，方法的精密度RSD 為0.96%～1.65%，回收率為85.48%～102.40%，因此可以認為本文所用的方法是準確可靠的，可以用于雞腿蔥中3種水溶性維生素的檢測.

本文在對流動相的選擇方面做了大量研究，用甲醇－水體系、甲醇－醋酸緩沖溶液體系對溶液進行分離，所得色譜峰擴散現(xiàn)象嚴重，分離效果較差；而用甲醇－磷酸二氫鉀緩沖溶液體系進行分離，色譜峰較為集中，分離效果良好，并且能縮短出峰時間.此前曾有利用高效液相色譜測定水溶性維生素的報道［9］，但它的流動相用到了辛烷磺酸鈉離子對試劑，這就大大增加了實驗成本.本文在對樣品處理方法方面同樣做了多項研究，分別用水、鹽酸、乙酸、草酸以及他們的混合溶液作為提取溶液，以保留時間、回收率等作為指標，得出鹽酸－草酸的混合溶液提取效果最佳.

通過對實驗所得結果進行分析，隆堯雞腿蔥中VC和VB2含量高于萊蕪雞腿蔥，且2種蔥具有顯著的統(tǒng)計學差異.由此可見，在水溶性維生素含量方面，隆堯蔥營養(yǎng)價值要高于萊蕪蔥.在此實驗基礎上，可以增加樣本量，通過大量的實驗數(shù)據(jù)來制定隆堯雞腿蔥水溶性維生素的質量標準，以此來鑒別未知種類的蔥是否是隆堯雞腿蔥，對我省隆堯縣這一標志性產品起到保護作用，同時也為隆堯雞腿蔥的開發(fā)利用提供技術支持.

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