Rho激酶抑制劑與芪藶強心膠囊對慢性心力衰竭患者細胞因子的影響

陳 華 呂妍琨 杜榮品

(河北省人民醫(yī)院心臟三科，石家莊，050051)

學(xué)科研究——絡(luò)病學(xué)

Rho激酶抑制劑與芪藶強心膠囊對慢性心力衰竭患者細胞因子的影響

陳 華 呂妍琨 杜榮品

(河北省人民醫(yī)院心臟三科，石家莊，050051)

目的：觀察Rho激酶抑制劑、芪藶強心膠囊分別及聯(lián)合短期應(yīng)用對慢性心力衰竭患者細胞因子(腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-6)水平的作用，并探討其機制。方法：120例慢性心力衰竭患者(NYHA分級Ⅱ～Ⅲ級)在接受常規(guī)心力衰竭治療的基礎(chǔ)上，隨機分成4組，分別是空白對照組(30例)(A組)，單用Rho激酶抑制劑治療組(30例)(B組)，單用芪藶強心膠囊治療組(30例)(C組)和Rho激酶抑制劑與芪藶強心膠囊聯(lián)合治療組(30例)(D組)共治療4周。治療前后測定腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)、BNP，評估心功能。結(jié)果：治療后3個治療組B、C、D組分別與對照組A組相比TNF-α、IL-6、BNP水平均明顯降低(P<0.05)，治療組間(B、C、D組間)比較B組與C組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.1)，D組較B組、C組均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：Rho激酶抑制劑聯(lián)合芪藶強心膠囊能顯著降低慢性心力衰竭患者血清細胞因子TNF-α、IL-6水平，改善心功能，有利于慢性心力衰竭的治療。

Rho激酶抑制劑；芪藶強心膠囊；細胞因子；腫瘤壞死因子-α；白介素-6；慢性心力衰竭

慢性心力衰竭(Chronic Heart Failure，CHF)是心血管疾病的最后戰(zhàn)場，其發(fā)生發(fā)展是一復(fù)雜而長期的過程，受包括炎性細胞因子在內(nèi)的多種因素的影響，細胞因子參與多種免疫反應(yīng)，其在體內(nèi)的高度表達與心功能惡化相關(guān)[1]。故有效降低心力衰竭患者血清細胞因子水平，為臨床治療心力衰竭提供了新思路[2]。已有研究表明，心力衰竭時心肌組織中Rho激酶mRNA水平呈明顯高表達，故Rho激酶抑制劑能有效抑制心力衰竭進展。芪藶強心膠囊作為中成藥制劑對心力衰竭有明確治療作用。本研究旨在觀察Rho激酶抑制劑法舒地爾及芪藶強心膠囊對CHF患者細胞因子水平及心功能的影響，并探討其可能的機制。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇2008年9月至2010年1月期間河北省人民醫(yī)院心臟中心收治的心力衰竭患者(均符合CHF診斷指南2007中CHF診斷標準[3]，按NYHA心功能分級標準[4]為心功能Ⅱ～Ⅲ級)120例，其中冠心病65例，擴張型心肌病17例，高血壓病28例，風(fēng)濕性心臟病10例。男性62例，年齡57～74歲，平均(64.5±5.6)歲，女性58例，年齡59～73歲，平均(66.2±5.5)歲。病程10個月至12年，平均(4.6±2.8)年。排除標準：6個月內(nèi)的急性心肌梗死、感染、惡性腫瘤、腦卒中、未控制的高血壓、糖尿病、肝腎功能不全、痛風(fēng)、外科手術(shù)或嚴重創(chuàng)傷、免疫系統(tǒng)疾病、甲狀腺功能異常、應(yīng)用過非甾體類抗炎藥及血液系統(tǒng)疾病等。

1.2 儀器設(shè)備、藥品及試劑 鹽酸法舒地爾(天津紅日藥業(yè))，芪藶強心膠囊(以嶺藥業(yè))，腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF)試劑盒(上海拜力生物科技有限公司)和白介素-6(Inter Leukin-6；IL-6)試劑盒(上海越研生物科技有限公司)，腦尿鈉肽(Brain Natriuretic Peptide，BNP)試紙條(德國羅氏公司)，Cardiac Reader心肌標志物定量檢測分析儀(德國羅氏公司)。

1.3 方法

1.3.1 分組 所有入選患者均于入院次日檢測TNF-α、IL-6、BNP水平，并隨機分為4組，分別是空白對照組(30例)(A組)，單用Rho激酶抑制劑治療組(30例)(B組)，單用芪藶強心膠囊治療組(30例)(C組)和Rho激酶抑制劑與芪藶強心膠囊聯(lián)合治療組(30例)(D組)。4組研究對象年齡、性別、吸煙史、高血壓、糖尿病、血脂水平、基礎(chǔ)用藥情況及治療前TNF-α、IL-6、BNP水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。4組均應(yīng)用劑量相似的ACEI或ARB類、利尿劑、地高辛和β受體阻滯劑等治療，B組加用Rho激酶抑制劑鹽酸法舒地爾60 mg靜點2次/d，C組加用芪藶強心膠囊4?？诜?，3次/d，D組加用Rho激酶抑制劑鹽酸法舒地爾60 mg靜點2次/d，同時芪藶強心膠囊4?？诜?次/d。所有患者均連續(xù)應(yīng)用4周，均常規(guī)檢測血常規(guī)、凝血功能、肝腎功能等。

1.3.2 TNF-α、IL-6測定 采用ELISA法測定TNF-α和IL-6。所有受檢者空腹12 h以上，清晨7：00-8：00采血，采血時平臥位，休息15 min以上，采集肘正中靜脈血4～6 mL，室溫下自然凝固，1 500 r/min離心10 min后，分離血清，置于-80 ℃超低溫冰箱保存待標本收集完全后同批測定。肝腎功能采用普通干管，采靜脈血4 mL，分離血清后當日在生化室檢測。

1.3.3 BNP測定 BNP標本采集：4組受試者均在治療前及治療結(jié)束后于清晨空腹采肘靜脈血2 mL置于肝素鋰抗凝管中混勻，不需離心，立即送檢。

2 結(jié)果

表1 四組患者一般資料

組別例數(shù)TNF-αIL-6BNPA組30治療前200±23.1270.12±34.42780.89±136.2治療后150.45±3.89*45±15.02*640.75±187.34*B組30治療前210.09±12.1△76.30±12.35△791±176.94△治療后121.81±15.46*30.54±23.52*580.36±200.51*C組30治療前198.3±30.09△75.31±24△800.09±200△治療后124.40±2.6*▲35.02±12.71*▲500.45±98.61*▲D組30治療前220±3.47△73.4±33.02△799±179.24△治療后80.98±12.12*□20.12±13.73*□440.45±96.02*□

注：治療后與治療前各組自身比較，*P<0.05；治療前與A組比較，△P>0.05；與B組比較，▲P>0.05；與B組比較，□P<0.05，與C組比較，□P<0.05。

3 討論

CHF因其高發(fā)病率、高死亡率目前仍是心血管領(lǐng)域尚未攻破的堡壘之一。在目前常規(guī)治療之外尋找新的更加有效的臨床藥物已成為當務(wù)之急。Rho/Rho激酶是具有信息傳導(dǎo)和分子開關(guān)功能的信號多肽[5]。研究表明，原發(fā)性心肌損傷與負荷過重，通過神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活以及多種炎癥細胞因子的參與，使得心肌組織中多條信號調(diào)節(jié)途徑激活，進而表現(xiàn)為心臟代償性肥厚、心肌細胞重構(gòu)，這一導(dǎo)致心力衰竭的關(guān)鍵環(huán)節(jié)的病理生理機制則包括心肌細胞內(nèi)鈣離子濃度的增高、包括TNF-α、IL-6在內(nèi)的多種炎癥因子的生成，這些都有Rho/Rho激酶通路的參與[6]。TNF-α、IL-6是由激活的單核巨噬細胞分泌的可以誘導(dǎo)凋亡的炎癥細胞因子，具有多種負面生物學(xué)效應(yīng)，二者通過負性肌力作用、誘導(dǎo)心室重構(gòu)、誘發(fā)心肌細胞凋亡，加快心力衰竭進程[7]。故Rho激酶抑制劑通過抑制炎細胞的浸潤，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，可拮抗炎癥反應(yīng)，從而改善CHF患者心功能[8]。BNP[9]作為評價心功能的實驗室指標目前已在臨床廣泛應(yīng)用。

中醫(yī)理論認為心力衰竭為氣血兩虛、血瘀氣滯、陽虛水泛所致，認為心氣虛乏、運血無力是心力衰竭發(fā)病的中醫(yī)病機根本[10]，亦有動物實驗支持該理論[11-12]。芪藶強心膠囊正是一基于此病機的有效治療CHF的中成藥制劑，其按照君臣佐使配伍，由黃芪、人參、附子、丹參、葶藶子、澤瀉、玉竹、桂枝、紅花、香加皮、陳皮等組成[13]。其中40余種單體化合物可能通過協(xié)同或互補作用治療心力衰竭[14-15]。方中黃芪、附子為君，益氣溫陽而促進心功能，具有強心作用[16]。人參、丹參、葶藶子為臣，三藥合用，共達補氣、活血、利水、通絡(luò)之功效。人參可改善心室重構(gòu)[17]；丹參可增加心肌ATP含量[18]；葶藶子強心利尿[19]；佐藥紅花、香加皮、澤瀉、陳皮、玉竹活血通絡(luò)、利水消腫；桂枝引藥入洛。諸藥合用以奏效機[20]。充分發(fā)揮其復(fù)方多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點的治療優(yōu)勢。本實驗研究結(jié)果表明單用Rho激酶抑制劑或單用芪藶強心膠囊較治療前明顯降低TNF-α、IL-6、BNP水平，與對照組比較亦效果顯著，但二者比較治療效果相當，無明顯統(tǒng)計學(xué)意義，二者聯(lián)合則更進一步明顯改善炎癥因子及心功能指標。故本實驗結(jié)果表明在常規(guī)心力衰竭治療的基礎(chǔ)上，Rho激酶抑制劑聯(lián)合芪藶強心膠囊可以進一步拮抗CHF患者的炎癥反應(yīng)，進而改善患者心功能，值得臨床推廣應(yīng)用，但二者聯(lián)合的相互作用機制有待進一步研究。

[1]Nian M，Lee P，Khaoer N，et al.Inflammatory cytokines and postmyocardial infarction remodeling[J].Circ Res，2004，94(12)：1543.

[2]Gullestad L，Ueland T，Vinge LE，et al.Inflammatory cytokines in heart failure：mediators and markers[J].Cardiology，2012，122(1)：23-35.

[3]杜建霖，胡蓉，陳運清，等.芪藶強心膠囊治療慢性心力衰竭臨床療效及其對血漿NT-proBNP水平的影響[J].疑難病雜志，2010，9(4)：250.

[4]李靜，李新立，顧凱，等.擴張型心肌病心力衰竭患者心腎功能相互關(guān)系的研究[J].臨床新血管雜志，2010，2(2)：104-108.

[5]Leung T，Manser E，Tan L，et al.A novel serine / threonine kinase binding the Ras-related RhoA GTPase which translocates the kinase to peripheral membranes[ J ].J Biol Chem，1995，270 (49)：29051-29054.

[6]張新軍，章茂順.心肌炎癥反應(yīng)與心室重構(gòu)[J].華西醫(yī)學(xué)，2005，20(4)：788-789.

[7]劉新燦，張正勛，陳曉玲，等.芪藶強心膠囊對心力衰竭患者心功能、腦鈉素及炎性因子水平的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2011，9(8)：905.

[8]Ann J，Kim J.Mechanisms and consequences of inflammatory signaling in the myocardium[J].Curr Hypertens Rep.2012，14(6)：510-516.

[9]葛璘，陳湘.N端腦利鈉肽前體在舒張性心力衰竭中的應(yīng)用研究[J].實用心腦肺血管病雜志，2011，19(9)：1487-1488.

[10]楊叁平.中藥抗心力衰竭藥物通過循證醫(yī)學(xué)研究證實療效[N].科技日報，2012-09-26(008).

[11]于春泉，李欣桐，史芳，等.芪藶強心膠囊對心氣虛型慢性心力衰竭大鼠心肌腺苷酸含量的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18(3)：174-176.

[12]劉建勛，馬曉斌，王楊慧.芪藶強心膠囊對實驗性心力衰竭犬心臟功能的影響[J].疑難病雜志，2007，6(3)：141-143.

[13]喬莉，王宗權(quán)，孟作環(huán)，等.芪藶強心膠囊的化學(xué)成分研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，21(18)：78-81.

[14]Kang LP，Zhao Y，Yu HS，et al.Identification of chenmical constituents in qiliqiangxin capsule by UPLC-Q-TOF/MS(E)[J].Acta pharmaceutica Sinica，2011，46(10)：1231-1236.

[15]王尚珍，劉鵬，周楊，等.芪藶強心膠囊輔治糖尿病性心功能不全的療效觀察[J].疑難病雜志，2012，11(2)：125-126.

[16]牛琳琳，琚保軍.附子在心血管疾病中的應(yīng)用及配伍研究[J].中醫(yī)臨床研究，2012，9(4)：27-28.

[17]付雙全.人參的心血管作用藥理學(xué)研究進展[J]，長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2012，28(2)：357-358.

[18]趙仁霞.丹參的現(xiàn)代藥理研究及臨床應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥指南，2011，9(12)：291-292.

[19]王妍，貢濟宇.葶藶子的化學(xué)成分及藥理作用研究[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2008，24(1)：39-40.

[20]李彥霞，賈振華，張鑫月.芪藶強心膠囊對慢性舒張性心力衰竭患者心臟舒張功能的影響[J].疑難病雜志，2013，12(4)：261-263.

(2014-05-03收稿 責(zé)任編輯：徐穎)

Effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsules on serum cytokines in patients with chronic heart failure

Chen Hua，Lyu Yankun，Du Rongpin

(Three Department of Cardiology，Hebei General Hospital，Shijiazhuang 050051，China)

Objective：To observe the short term effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsules on serum tumor necrosis factor-alpha(TNF-α)and interleukin-6(IL-6)levels in patients with chronic heart failure，and explore the mechanism.Methods：120 chronic heart failure patients

conventional treatment for 4 weeks were divided into blank control group (30 cases)(Group A)，Rho-kinase inhibitor-treated group (30 cases)(Group B)，Qiliqiangxin capsules-treated group(30 cases)(Group C)，and the other 30 cases in the treatment with Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules(GroupD).TNF-α，IL-6 and cardiac function evaluated by BNP were measured before and after treatment.The difference between the 4 groups was analyzed.Results：The baseline of TNF-α，IL-6 and cardiac function was not significantly different in 4 groups (P>0.05).TNF-α and IL-6 levels in Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules(GroupD)were significantly lower than other groups after 4 weeks’ treatment (P<0.05).Conclusion：Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules can improve cardiac function，reduces levels of serum cytokines associated with chronic heart failure.

Rho-kinase inhibitor；Qiliqiangxin capsules；Cytokines；Tumor necrosis factor-alpha；Interleukin 6;Chronic heart failure

R287；R541.6+1

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2014.06.037