揉筋方對緊張型頭痛模型大鼠血漿及腦組織NO及NOS影響的實驗研究

楊宇 郭寧寧 王新潔 賀雪螢 馬天洋

揉筋方對緊張型頭痛模型大鼠血漿及腦組織NO及NOS影響的實驗研究

楊宇 郭寧寧 王新潔 賀雪螢 馬天洋

目的研究緊張型頭痛模型大鼠經(jīng)揉筋方灌胃一段時間后, 大鼠血漿及腦組織中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的變化情況。方法將40只大鼠正常喂養(yǎng)半個月后, 取10只大鼠定義為對照組, 在其頸部注射生理鹽水；其余30只均在頸部注射ATP誘導(dǎo)大鼠出現(xiàn)緊張型頭痛, 并將其隨機(jī)分為模型組、揉筋方組、羊角顆粒組, 每組10只。分完組后, 對照組及模型組大鼠均經(jīng)正常飲用水灌胃；而揉筋方組及羊角顆粒組大鼠分別經(jīng)揉筋方藥物及羊角顆粒藥物灌胃。4組大鼠均灌胃一段時間后, 測定其血漿及腦組織中NO含量及NOS的活性。結(jié)果對照組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性均顯著低于其他3組(P＜0.05)；模型組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性明顯高于揉筋方組及羊角顆粒組；揉筋方組及羊角顆粒組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性比較時, 揉筋方組明顯低于羊角顆粒組(P＜0.05)。結(jié)論揉筋方藥物可能通過調(diào)節(jié)血漿及腦組織中NO含量及NOS活性, 進(jìn)而起到緩解頭痛的作用, 但其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

揉筋方；緊張型頭痛模型；一氧化氮；一氧化氮合酶

據(jù)臨床疾病統(tǒng)計結(jié)果得知, 緊張型頭痛的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢［1］。緊張型頭痛的病因復(fù)雜, 可能與社會心理壓力、焦慮、抑郁等精神因素、肌肉緊張、濫用止痛藥物等有關(guān)。該病病程較長且常反復(fù)發(fā)作, 嚴(yán)重降低了此類患者的生活質(zhì)量。臨床中常用揉筋方藥物治療, 該藥物可明顯緩解患者頭痛癥狀［2］, 因此療效顯著。據(jù)相關(guān)報道表明, 此類頭痛與血漿及腦組織中一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)的活性有關(guān)。由于緊張型頭痛的發(fā)病因素及機(jī)制尚不明確, 因此本文通大鼠實驗進(jìn)而探討緊張型頭痛模型大鼠經(jīng)揉筋方灌胃一段時間后, 大鼠血漿及腦組織中NO、NOS的變化情況。具體報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 實驗器材包括：藥劑(ATP、生理鹽水、揉筋方、羊角顆粒藥物等)、試管、電子天平、灌胃針、固定器、手術(shù)臺、秒表、玻璃勻漿器、分光光度計等。本文選用的大鼠來源于沈陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心, 屬于Wistar系列, 40只大鼠中雌雄比例為1:1, 體重219～283 g。

1.2方法 將40只大鼠正常喂養(yǎng)半個月后, 隨機(jī)取出10只大鼠將其定義為對照組, 在其頸部注射生理鹽水；其余30只均在頸部注射ATP誘導(dǎo)大鼠出現(xiàn)緊張型頭痛, 并將其隨機(jī)分為模型組、揉筋方組、羊角顆粒組, 每組10只。分完組后,對照組及模型組大鼠均經(jīng)正常飲用水灌胃；揉筋方組大鼠經(jīng)揉筋方藥物灌胃, 該藥物中含有40 g白芍、10 g炙甘草、15 g木瓜、12 g天麻、10 g卷柏及10 g羌活等中藥成分, 藥物制備方法是經(jīng)水煎30 min提取2次后再水煎, 直至藥物濃度為1 g/ml為止, 處于冰箱中冷藏保存；羊角顆粒組大鼠經(jīng)羊角顆粒藥物灌胃, 配置方法是用蒸餾水制成濃度為0.165 g/ml的藥物, 處于冰箱中冷藏保存。4組大鼠均灌胃一段時間后, 在末次灌胃后1 h, 經(jīng)分光光度計測定出血漿和腦組織中的NO含量、經(jīng)比色法測定血漿及腦組織中NOS活性, 進(jìn)而比較4組測定結(jié)果。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)形式表示, 實施t檢驗；計數(shù)資料以率(%)形式表示, 實施χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

測定并比較對照組、模型組、揉筋方組、羊角顆粒組大鼠經(jīng)不同物質(zhì)灌胃一段時間后, 其血漿及腦組織中NO含量及NOS的活性。具體結(jié)果見表1。對照組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性均顯著低于其他3組, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；模型組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性明顯明顯高于揉筋方組及羊角顆粒組, P＜0.05；揉筋方組及羊角顆粒組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性比較時, 揉筋方組明顯低于羊角顆粒組, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

表14組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性比較

表14組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性比較

注：對照組與其他三組比較,aP＜0.05；模型組與揉筋方組及羊角顆粒組比較,bP＜0.05；揉筋方組與羊角顆粒組比較,cP＜0.05

組別血NO(mmol/L)血NOS(U/gprpt)腦NO(mmol/L)腦NOS(U/gprpt)對照組 33.64±1.73a13.39±0.71a15.80±0.81a1.06±0.66a模型組51.68±2.5217.89±0.7525.83±0.841.60±1.18揉筋方組 33.17±1.08bc13.39±1.03bc6.71±0.71bc1.23±0.72bc羊角顆粒組 37.11±1.93b15.43±0.56b21.41±0.58b1.25±0.58b

3 討論

臨床研究表明, 揉筋方藥物對于緊張型頭痛的療效顯著,可明顯緩解患者頭痛癥狀。由于揉筋方藥劑包含白芍、炙甘草、木瓜、天麻、卷柏及羌活等中藥成分, 其中白芍、甘草、天麻成分具有明顯的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜作用；芍藥與甘草聯(lián)合應(yīng)用時可有較抑制致痛因子及炎性因子等, 進(jìn)而起到較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛效果［3］。近年來, 相關(guān)研究表明, 緊張型頭痛與血漿及腦組織中的NO含量及NOS活性有關(guān)。NO屬于一種新型遞質(zhì)及信息傳遞分子, 與機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞信號傳遞、神經(jīng)修復(fù)、疼痛調(diào)制等多種生理過程及生命活動有關(guān)。NOS是生成內(nèi)源性NO的最主要限速物質(zhì)。NO引發(fā)頭痛的可能機(jī)制包括：NO傳遞細(xì)胞毒性作用, 導(dǎo)致腦血管舒張, 誘發(fā)頭痛；促進(jìn)降鈣素的釋放, 引發(fā)神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)；增強(qiáng)體內(nèi)的環(huán)磷酸鳥苷濃度, 導(dǎo)致血管平滑肌松弛, 進(jìn)而擴(kuò)張血管, 引發(fā)頭痛；刺激三叉神經(jīng), 導(dǎo)致血管性多肽增多, 引發(fā)無菌性炎癥；降低血管旁感覺神經(jīng)功能；刺激前列腺素, 激發(fā)傷害性感覺神經(jīng)元；引起中樞神經(jīng)對痛覺的敏感度［4］。

本文通過將40只大鼠隨機(jī)平均分為對照組、模型組、揉筋方組、羊角顆粒組, 比較4組大鼠血漿及腦組織中的NO含量及NOS活性, 進(jìn)而分析揉筋方對緊張型頭痛模型大鼠血漿及腦組織NO及NOS影響的實驗研究。結(jié)果得出, 對照組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性均顯著低于其他3組；模型組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性明顯明顯高于揉筋方組及羊角顆粒組；揉筋方組及羊角顆粒組大鼠血漿及腦組織中NO含量及NOS活性比較時, 揉筋方組明顯低于羊角顆粒組。

綜上所述, 揉筋方藥物可通過調(diào)節(jié)血漿及腦組織中NO含量及NOS活性, 進(jìn)而起到緩解頭痛的作用, 但其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

［1］ 吳宏赟.揉筋方對緊張型頭痛大鼠張頜反射的影響及機(jī)制研究.中國醫(yī)藥導(dǎo)報, 2012, 3(9):21.

［2］ 全偉.緊張型頭痛血漿NO、NOS含量變化的臨床和實驗研究.山東中醫(yī)藥大學(xué), 2011.

［3］ 胡志強(qiáng).揉筋方對緊張型頭痛模型大鼠血漿及腦組織NO、NOS 的影響.山東醫(yī)藥, 2011, 35(51):43.

［4］ 吳宏赟.揉筋方對緊張型頭痛模型大鼠腦組織神經(jīng)元型NOS活性表達(dá)的影響.江蘇中醫(yī)藥, 2011, 10(43):87.

2014-07-17］

110034 沈陽醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室(楊宇)；沈陽醫(yī)學(xué)院2012級臨床醫(yī)學(xué)系學(xué)生(郭寧寧 王新潔 賀雪螢 馬天洋)