紫癜顆粒定性鑒別研究*

張 穎，趙，喬菊久，尤獻(xiàn)民

（遼寧省中醫(yī)藥研究院，遼寧 沈陽(yáng) 110034）

紫癜顆粒由黃芪、大黃、太子參、阿膠和甘草等9味中藥組方，臨床用于治療免疫性血小板減少性紫癜。為快速、有效控制藥品質(zhì)量，筆者建立了處方中黃芪、大黃、甘草和當(dāng)歸的薄層色譜鑒別方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Goodsee－Ⅰ型薄層色譜分析儀（上海科哲生化科技有限公司）；YOKO－XR顯色加熱器（武漢藥科新技術(shù)開(kāi)發(fā)公司）；3102型電子分析天平（天津市天馬儀器廠）。黃芪甲苷對(duì)照品（批號(hào)為110781－200613），大黃（掌葉）對(duì)照藥材（批號(hào)為 121249－201003），大黃酸對(duì)照品（批號(hào)為 110757－200606），甘草次酸對(duì)照品（批號(hào)為110723－200612），當(dāng)歸對(duì)照藥材（批號(hào)為120927－201014），藁本內(nèi)酯對(duì)照品（批號(hào)為 111737－201103），均購(gòu)自中國(guó)藥品食品檢定研究院；供試品紫癜顆粒（遼寧省中醫(yī)藥研究院藥學(xué)室，批號(hào)分別為 20120801，20120802，20120803）；硅膠 G（ 批號(hào)為20110608），硅膠GF254（批號(hào)為20100702），購(gòu)自青島海洋化工廠；所用試劑均為分析純，水為蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2．1 黃芪

取本品10 g，研細(xì)，加甲醇100 mL，超聲提取30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次50 mL，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次50 mL，棄去氨試液，再用50 mL正丁醇飽和水洗滌1次，棄去水洗液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含黃芪的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國(guó)藥典（一部）》附錄Ⅵ B]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5～10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置過(guò)夜的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，置紫外光燈（365 nm）下檢視，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾（見(jiàn)圖1）。

圖1 黃芪的薄層色譜圖

2．2 甘草[1]

取本品10 g，研細(xì)，加氨水5 mL與80%乙醇100 mL回流提取 30 min，放冷，濾過(guò)，濾液蒸至近干，殘?jiān)?2．5 mol／L硫酸的50%乙醇溶液100 mL使溶解，回流提取1 h，放冷，用石油醚（30～60℃）提取2次，每次50 mL，合并石油醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含甘草的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液另取甘草次酸對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10～15 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（30～60℃）－乙酸乙酯－丙酮 －甲酸（35 ∶5 ∶5 ∶0．5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾（見(jiàn)圖2）。

2．3 大黃[2]

取本品10 g，研細(xì)，加甲醇100 mL，超聲30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，再加鹽酸2 mL，加熱回流30 min，立即冷卻，用乙醚分2次振搖提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含大黃的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。另取大黃對(duì)照藥材0．5 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取大黃酸對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各5～10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶1）的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置氨蒸氣中熏后檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材、對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同的紅色斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾（見(jiàn)圖3）。

圖3 大黃的薄層色譜圖

圖2 甘草的薄層色譜圖（254nm）

2．4 當(dāng)歸

取本品100 g，研細(xì)，加水500 mL，水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液約150 mL，用乙醚提取2次，每次30 mL，合并乙醚提取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含當(dāng)歸的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材1．0 g，加乙醚20 mL，超聲處理10 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。再取藁本內(nèi)酯對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 5～10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上，以甲苯－乙酸乙酯（30∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材、對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，且陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾（見(jiàn)圖4）。

圖4 當(dāng)歸的薄層色譜圖

3 討論

用薄層色譜法鑒別制劑中的黃芪、大黃、甘草，薄層圖譜清晰，專(zhuān)屬性強(qiáng)，陰性對(duì)照無(wú)干擾，因此該法可定性控制該制劑的質(zhì)量。由于當(dāng)歸藥材在成品中含量較低，故在提取過(guò)程中采用水蒸氣蒸餾，取樣量增加到100 g，蒸餾液再用乙醚進(jìn)行提取，收集到的乙醚液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?fù)溶，作為供試品溶液。展開(kāi)劑先后試用了正己烷－乙酸乙酯（4∶1）、甲苯－乙酸乙酯（30∶1），石油醚（30～60℃）－乙酸乙酯（4∶1）、環(huán)己烷 －二氯甲烷－乙酸乙酯 －甲酸（4∶1∶1∶0．1），根據(jù)分離效果考慮，最后確定以甲苯－乙酸乙酯（30∶1）為展開(kāi)劑。

[1]王光函，趙，鄒桂欣．化胃舒顆粒的定性鑒別研究[J]．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2012，23（8）：1 978 － 1 979．

[2]國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：22．