雷諾嗪應用于健康人體的藥代動力學研究※

王加良 夏洪蓮 胡春陽

雷諾嗪應用于健康人體的藥代動力學研究※

王加良 夏洪蓮 胡春陽

目的 研究雷諾嗪在健康人體中的藥代動力學。方法選取8名健康志愿者作為研究對象，其中5名口服雷諾嗪緩釋片，3名口服安慰劑，應用LC-MS/MS法（液相色譜-串聯質譜法）檢測每名受試者的血藥濃度，并對藥代動力學參數進行計算。結果雷諾嗪血藥濃度線性變化范圍在5.3～4000.8ng/m l內，定量下限值為5.3ng/m l，日間及日內精密度均＜15%。藥代動力學參數：CL為（0.104±0.047）L/h、V為（0.73±0.34）L、t1/2為（3.12±1.48）h、Cmax為（1.28 ±0.51）mg/m l。結論LC-MS/MS法具有靈敏度高、操作便捷的特點，可用于檢測雷諾嗪緩釋片在健康人體中的藥代動力學。

藥代動力學；液相色譜-串聯質譜法；雷諾嗪

雷諾嗪是一種PFOX（部分脂肪酸氧化酶）抑制劑，是臨床治療慢性心絞痛的常用藥物[1]。雷諾嗪可對部分脂肪酸代謝加以抑制，促進葡糖糖氧化代謝，使心臟需氧量減少，從而緩解、預防心絞痛，并且這一作用過程還不會對患者的血流動力學及心率產生影響[2]。另外，雷諾嗪還能對INa（晚鈉離子電流）發揮阻滯作用，從而使缺血心肌細胞的鈣超載狀態加以改善，降低心肌耗氧量，并對心室復極化情況加以改善[3]。血雷諾嗪濃度的測定方法包括蛋白沉淀、固相萃取等方法，但這些方法都較為復雜，本研究應用了LC-MS/MS法進行血雷諾嗪濃度檢測，并對其藥代動力學參數進行了計算，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取 8名健康志愿者作為研究對象，男5名，女3名，年齡在22～28歲，平均（23.2 ±1.6）歲，體重在58～71kg，平均（61.2±7.6）kg，身高在166～182cm，平均（169.8±7.3）cm，體質量指數（BM I）平均值為（21.6±2.0）kg/cm2。隨機分為研究組（5名）和對照組（3名），經心電圖、尿常規、血常規、血生化檢查，均顯示正常。受試者均知情同意，并自愿簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 儀器與藥品 儀器：Shimadzu 20AD型高效液相色譜分析儀（日本島津公司），Sciex QTRAP 5500型三重四極桿——線性離子阱串聯質譜儀（美國AB公司）。藥品：由大連中信制藥生產的雷諾嗪緩釋片（500mg/片）、安慰劑（雷諾嗪對照品，99.46%），由中國藥品生物制品檢定所生產的氯胺地平對照品。

1.2.2 給藥及檢測方法 兩組受試者均在試驗前1d晚上開始禁食（12h），次日早晨，研究組受試者空腹服用雷諾嗪緩釋片，劑量為1500mg，以250m l溫開水送服；對照組空腹服用安慰劑，2h后可開始飲水，服藥4h后統一進餐。服藥前及服藥后0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、8.0h，均采集5.0m l靜脈血，置于肝素化試管保存，離心10min（轉速3000r/min）后，取下層血漿，并置于可控溫冰箱中保存（-80℃）。

1.2.2.1 色譜條件 Waters Xterra RPC18色譜柱（3.5μm，2.10mm×100.00mm），流動相為乙腈（-7mmol/m l）醋酸銨水溶液（90:20），柱溫40℃，流速0.25m l/min，進樣量5μl。

1.2.2.2 質譜條件 ESI（電噴霧離子源）、正離子方式檢測、MRM（多反應監測）。離子噴射電壓、溫度分別為4500V、550℃，氣簾氣壓208kPa，GS1（源內氣體1）壓力380kPa，GS2（氣體2）壓力415kPa。采用 LC-MS/MS法（液相色譜-串聯質譜法）對血液樣本中的雷諾嗪濃度進行檢測，并對藥代動力學參數進行計算。

1.3 統計學方法本次研究采用軟件Win Nonlin 5.2處理血藥濃度相關數據，對藥代動力學參數進行計算。

2 結果

雷諾嗪血藥濃度線性變化范圍在 5.3～4000.8 ng/m l內，定量下限值為5.3ng/m l，日間及日內精密度均＜15%。口服 1500mg雷諾嗪緩釋片的各項藥代動力學參數比較，見表1。

表1 口服1500mg雷諾嗪緩釋片的各項藥代動力學參數比較 (±s)

表1 口服1500mg雷諾嗪緩釋片的各項藥代動力學參數比較 (±s)

項目 參數12.68±4.02 12.26±4.04 17.72±8.30 17.51±8.30 0.104±0.047 0.73±0.34 5.01±1.48 3.12±1.48 1.28±0.51 MRT0-∞(h) MRT0-48(h) AUC0-∞(mg/h·m l) AUC0-48(mg/h·m l) CL(L/h) V(L) t1/2(h) tmax(h) Cmax(mg/m l)

3 討論

本次研究對文獻[4]中的血藥濃度檢測方法進行了創新、改進。結果顯示，在優化條件后，實施固相萃取，具有較高的穩定性和回收率，同時所需血漿樣本量少、無基質效應、線性范圍寬[5]。在本次研究中，對不同比例的甲醇-乙腈-水、乙腈-水、甲醇-水流動相加以優化，結果表明，在流動相中加入乙酸銨和乙酸可提高響應，同時能更好地將內源性物質和雷諾嗪分離開來，該方法快速、靈敏、準確，定量下限值為 5.3ng/m l，能較好地滿足雷諾嗪血藥濃度檢測要求。通過檢測發現，健康人體在服用1500mg雷諾嗪緩釋片后，在3.12h時可達到血藥濃度峰值，t1/2為 5.01h，這一結果與相關文獻報道一致。

[1] 侯文靜,李揚,胡欣,史愛欣.雷諾嗪在健康人體的藥代動力學[J].中國臨床藥理學雜志,2013(5):342-344,349.

[2] 李長軍,于艷玲,楊清敏,等.鹽酸雷諾嗪緩釋片處方優化及犬體內藥代動力學的研究[J].藥學學報,2010(9):1170-1176.

[3] 譚親友,朱榮華,李煥德,等.HPLC-MS/MS法測定雷諾嗪血藥濃度及其緩釋制劑的藥代動力學研究[J].中國臨床藥理學與治療學,2012(5):549-553.

[4] 廖明琪.雷諾嗪光學異構體手性拆分、藥動學及藥效學研究[D].蘭州大學,2013.

[5] 王源,陳笑艷,孫昨明,等.液相色譜串聯質譜法同時測定人血漿中雷諾嗪及其三種代謝產物[C].中國藥學會、煙臺市人民政府、2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集,2011.

R969.1

A

1673-5846(2014)05-0216-02

牡丹江醫學院紅旗醫院，黑龍江牡丹江 157011

黑龍江省教育廳科研項目，項目編號：12521579。黑龍江省衛生廳科研項目，編號2011-304