岳慧賢 石麗娟 孫培明 (臨沂大學生命科學學院 山東 臨沂 276000)
一起青年雪山草雞沙門氏菌病的診治
岳慧賢 石麗娟 孫培明*(臨沂大學生命科學學院 山東 臨沂 276000)
沙門氏菌感染可以引起禽類各種各樣的急性或慢性疾病,主要分為2種類型:第一種是雞白痢沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌,第二種是副傷寒沙門氏菌,其中第一種沙門氏菌病的危害更嚴重。雞白痢沙門氏菌感染引起雞白痢,雞傷寒沙門氏菌感染引起禽傷寒,兩種沙門氏菌病在臨床癥狀、流行病學、病理變化、控制及消滅措施等方面有許多相似之處,但也有一定的差異。雞白痢是危害雛雞的一種主要疾病,多表現為白痢和敗血癥特征,引起雛雞的大批死亡;成年雞不表現急性感染的特征,多呈慢性經過。禽傷寒較常見于育成和成年的雞,在臨床癥狀、病理剖檢變化等方面與雞白痢很難鑒別。該類沙門氏菌病在標準化商品雞場中較少發生,但在庭院散養雞場中則較多發生。近些年來,雞沙門氏菌病的發生特點出現一些新的變化,即青年雞的發病逐漸增多,引起生長遲緩和后期的生產性能下降,造成嚴重的經濟損失,這在草雞養殖中表現的非常明顯。草雞養殖一般采取網上育雛,中雛以后實行放養的方式,這一養殖方式與青年雞發生雞沙門氏菌病有關。近期,筆者對山東省臨沂市的一起疑似雞沙門氏菌病的青年雪山草雞進行了診斷,通過臨床癥狀、病理剖檢變化及實驗室診斷,確診為沙門氏菌病,現報道如下。
2014年4月份,山東省臨沂市某雞場的4500余只雪山草雞發生以雞冠發白、萎縮為主要特征的疾病,其它表現不明顯。該雞群采用庭院散養方式,在67日齡時從山東省泰安市某育成雞場引進,當時雞群狀況較好,進雞10d后,少量雞只出現雞冠發白的臨床癥狀。雞群發病時,曾用阿莫西林飲水,未見明顯效果。截止到就診時間,雞群病程約30d,沒有出現明顯死亡,但場主擔心雞群因外觀而影響其出售價格而要求診治。
病雞初期主要表現雞冠發白,有的肉垂也發白;隨著病程的延長,雞冠逐漸萎縮,有的雞冠變小、發紺,公雞尤為明顯;少數病雞排黃白色水樣稀糞。雞群采食、飲水數量沒有明顯變化,但病雞精神狀態受到影響,隨著病程的延長,發病雞只逐漸增多。
剖檢病雞2只,公雞和母雞各1只,母雞的病變更明顯。公雞的剖檢變化主要表現在睪丸萎縮,肌胃黏膜和腸道有輕微出血,其它無明顯變化。母雞的剖檢變化主要表現在卵巢萎縮(無明顯發育),腹膜炎癥(輸卵管黃色滲出物,見圖1),腸道有出血(比公雞嚴重),腸系膜和腸道外膜有明顯的黃色滲出物,其它無明顯變化。心臟、肝臟、脾臟、腎臟、肺臟等臟器沒有出現明顯的病變。
以無菌操作采集病雞的卵巢、睪丸和肝臟(公雞)作為病料,選用報道的沙門氏菌通用引物進行PCR擴增,上游引物為5-CTTTGGTCGTAAAATAAGGCG-3,下游引物為5-TGCCCAAAGCAGAGAGATTC-3,由上海生工生物技術公司合成。采用25μl反應體系,其中:10×buffer(含Mg2+)2.5μl、2.5 mmol/l 的dNTP 2μl、上游引物1μl、下游引物1μl、Taq DNA聚合酶0.2μl、模板(試劑盒提取的病料組織基因組)3μl,最后補滅菌水至25μl。反應條件:95℃預變性5min,94℃ 30s,55℃ 30s,72℃ 15s,35個循環后,72℃延伸10min。PCR產物進行1%瓊脂糖凝膠電泳,從病雞的卵巢、睪丸和肝臟(公雞)組織中均擴增出預期大小為260bp目的片段(見圖2),確定該雞群感染沙門氏菌。1 2 3 M

圖1 卵巢,輸卵管的剖檢圖

圖2 睪丸、肝臟、卵巢組織的PCR檢測圖M.DL-2000 Marker;1.睪丸;2.肝臟;3.卵巢。
全群草雞用左氟沙星0.01%飲水,連用5d;發病草雞用阿米卡星注射液按10mg/kg體重肌肉注射,1次/d,連用3d;同時添加電解多維飲水以增強草雞抵抗力。用藥3d后病情逐漸減輕,大群狀態明顯好轉,病情得到控制。
(1)PCR法具有耗時短、成本低、診斷準確的特點,在雞沙門氏菌病快速診斷和早期治療方面具有一定的意義。但此類方法需要特殊的儀器和較高的技術水平,在實踐中影響了其應用的范圍。(2)本次PCR結果顯示,病雞的卵巢、睪丸和肝臟組織中均存在沙門氏菌,其中卵巢的檢測結果最理想。建議用PCR檢測雞沙門氏菌病時,從肝臟、心臟、睪丸、卵巢和腦組織等選用2~3個臟器病料用于檢測,其中卵巢作為首選檢測病料,從而提高檢測的準確性。(3)本次PCR選用的引物為沙門氏菌通用引物,所有單純通過這個實驗只能確定雞群感染沙門氏菌病,進一步結合臨床癥狀、流行病學、剖檢變化等,綜合診斷為第一種沙門氏菌病,即雞白痢或禽傷寒。雞白痢與禽傷寒非常相似,病原同屬于腸桿菌科一個單獨的種,臨床癥狀、流行病學、病理變化、控制及消滅措施等都比較相似,所以本研究未進一步對雞白痢沙門氏菌或雞傷寒沙門氏菌進行鑒別診斷。(4)雛雞感染沙門氏菌,一般肝臟的病變最明顯,表現肝臟表面出現白色的壞死灶。但是青年雞感染沙門氏菌,肝臟等臟器的病變不明顯,但是生殖器官發生的萎縮和以黃色、黃白色滲出物為特征的腹膜炎具有重要診斷意義。如果蛋雞在青年期發生沙門氏菌病,由于生殖器官的病變,導致產蛋期表現不產蛋和達不到產蛋高峰;如果產蛋雞感染沙門氏菌,由于卵黃性腹膜炎的病變,導致產蛋量下降和蛋殼質量變差。(5)對于草雞沙門氏菌病的治療,常用的廣譜和抗革蘭氏陰性菌抗菌藥都有作用,該病例選用廣譜抗菌藥左氟沙星和革蘭氏陰性殺菌藥阿米卡星具有很好的治療效果。阿米卡星需要注射給藥,該養雞場未曾使用過,大多數養雞場都較少使用,注射給藥雖然麻煩,但能保證治療效果。由于沙門氏桿菌耐藥性的問題,有條件的可以通過藥敏試驗篩選高敏藥物,避免盲目用藥。(6)發病的雞場,建議實行全進全出的飼養方式,加強環境消毒,消滅可能存在的病原。對于種雞場尤為重要,因為沙門氏菌病可以垂直傳播,病雞治愈后可以長期存在于卵巢中,由于種蛋帶菌而傳給后代,造成早期感染。成年雞一般呈隱性感染或帶菌者,糞便中持續排出病原菌危害雞群。(7)雞沙門氏菌病的發生,多與養殖環境差有關,還與飼料飲水不潔有關。青年草雞多采用散養方式,隨著養殖次數的增多,環境逐漸變差,這樣易發生沙門氏菌病。因此要預防本病,必須加強雞場的飼養管理和環境衛生,給予營養均衡的飼料,保持飼料和飲水的清潔衛生,減少發病各種誘因,同時要注意定期的進行藥物預防。
S858.31
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1007-1733(2014)10-0037-02
2014–07–22)
項目資助:國家級大學生創新創業訓練計劃項目(201310452066)
*通訊作者