黃白痤瘡膏體外抑菌實驗

陳衛平賓 琳楊勝輝

1湖南中醫藥高等專科學校 株洲 412012 2湖南中醫藥大學

·實驗研究·

黃白痤瘡膏體外抑菌實驗

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1湖南中醫藥高等?？茖W校 株洲 412012 2湖南中醫藥大學

目的 探討黃白痤瘡膏體外抑菌效果。方法 采用試管倍比稀釋法、平板法，用黃白痤瘡膏水煎液、頭孢曲松鈉、維A酸乳膏，對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌進行抗菌實驗。結果 黃白痤瘡膏方煎液、維A酸乳膏、頭孢曲松鈉金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度（MIC）分別為125mg/mL、500mg/mL、4μg/mL。表皮葡萄球菌的最小抑菌濃度分別為125mg/mL、500mg/mL、16μg/mL。結論 黃白痤瘡膏方水煎液對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有較好的抑菌和殺菌效果。

黃白痤瘡膏；金黃色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；抑菌試驗

黃白痤瘡膏是一種純中藥制劑，外用治療尋常性痤瘡臨床療效確切[1]，能通過有效降低血清雄激素水平來調節雌、雄激素水平，使到達皮膚基底皮脂腺細胞部位的睪酮水平隨之降低，從而抑制皮脂腺細胞的增生和分泌功能，影響皮脂腺斑的增生，有效縮小皮脂腺斑[2]。為探討黃白痤瘡膏抑菌效果，本實驗擬采用試管倍比稀釋法、平板法，對黃白痤瘡膏進行抗菌實驗，現報道如下。

1 實驗材料

1.1藥 物 黃白痤瘡膏藥物組成：大黃、黃連、硫磺、白芷、白茯苓、白蘞。中藥均從湖南中醫藥大學附屬第一醫院中藥房購置，并經藥劑師鑒定。將原方單味藥（除硫磺外）各取10g，分別加入700mL蒸餾水浸泡過夜后，常規水煎，濃縮至70mL煎液（相當于1.0g/mL生藥）。硫磺研磨至細粉狀，取10g加入煎液中,調節pH值為7.5，8磅、105℃滅菌15min備用。

1.2對照用藥 注射用頭孢曲松鈉（1g/瓶，上海羅氏制藥有限公司），加入7.8mL生理鹽水，配置成128mg/mL的貯存液備用。維A酸乳膏（重慶華邦制藥股份有限公司），精密稱取10g，加入吐溫-80 10mL，攪拌使其完全乳化，加入10mL生理鹽水，配置成藥物濃度0.5g/mL，8磅、105℃滅菌15min備用。

1.3實驗菌株 金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌均來源于湖南中醫藥大學免疫學基礎與病原生物學教研室保存菌種。

1.4培養基 按照文獻常規配制肉湯培養基及肉湯瓊脂培養基,在肉湯培養基加入酚紅至終濃度為0.002%，8磅、105℃滅菌15min后置4℃冷藏備用。

2 實驗方法

采用試管倍比稀釋法、平板法，對黃白痤瘡膏水煎液進行抗菌實驗。

2.1制備菌懸液 分別取各菌種，接種肉湯瓊脂平板上，37℃下需氧培養24h,分別用接種環挑取單個菌落，于試管肉湯培養基中培養8h，達到對數生長期。用滅菌生理鹽水校正至0.5麥氏比濁單位（約1.5×108cfu/mL）。

2.2藥液稀釋 排列無菌試管6支，共4組，分別加入1mL肉湯培養基，另取三只滅菌試管，各加入1.8mL培養基，取0.2mL頭孢曲松鈉貯存液（128mg/ mL），稀釋至128μg/mL，為工作液。取黃白痤瘡膏水煎液、維A酸乳膏、頭孢曲松鈉工作液各1mL，加入第一管，充分混勻后取出1mL加入第二管，再混勻后取出1mL加入第三管，如此連續稀釋至第五管，取出1mL棄掉，設第六管為不加藥對照。將黃白痤瘡膏水煎液稀釋至500、250、125、62.5、31.25mg/mL；維A酸乳膏分別稀釋成終濃度為250.0、125.0、62.5、31.25、15.625mg/mL；頭孢曲松鈉稀釋成終濃度64、32、16、8、4μg/mL。

2.3抑菌試驗 每只試管里加入50μL菌懸液，將含藥試管放置于37℃恒溫箱培養24h后觀察各試管顏色，以培養基渾濁和變為黃色判斷為有菌生長，以最大稀釋濃度試管中無細菌生長為最低抑菌濃度（MIC）。試驗以頭孢曲松鈉作為西藥抑菌試驗對照組。

2.4殺菌試驗 在各藥物試管中分別用接種環取一環液體，于瓊脂平板上劃線，置37℃恒溫箱培養24h，觀察菌落生長情況，以最高稀釋度藥物試管中菌液仍無菌落生長為最低殺菌濃度。實驗重復3次。試驗以頭孢曲松鈉作為西藥殺菌試驗對照組。

3 實驗結果

黃白痤瘡膏方煎液、維A酸乳膏、頭孢曲松鈉對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度（MIC）分別為125mg/mL、500mg/mL、4μg/mL，對表皮葡萄球菌的最小抑菌濃度分別為125mg/mL、500mg/mL和16μg/ mL。黃白痤瘡膏方水煎液對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有較好的抑菌和殺菌效果，但低于頭孢曲松鈉西藥對照組。對金黃色葡萄球菌的MIC見表1，對表皮葡萄球菌的MIC見表2。

表1 三組金黃色葡萄球菌MIC

表2 三組表皮葡萄球菌MIC

4 討 論

經驗方黃白痤瘡膏是在《醫宗金鑒》顛倒散的基礎上，運用中藥配伍原理結合多年臨床觀察設計而成的純中藥外用制劑，功能清熱解毒，散瘀消腫。采用局部用藥能直達病所，用于治療輕、中度痤瘡，療效滿意[1]。該藥能抑制皮脂腺細胞的增生和分泌功能，影響皮脂腺斑的增生，有效縮小皮脂腺斑[2]；藥理研究證明，大黃、黃連、硫磺有較強的抗菌消炎作用；本組體外抑菌實驗研究證實黃白痤瘡膏對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有較好的抑菌和殺菌效果。

［1］劉百祥，肖躍群，符逢春，等，黃白散治療青春期尋常痤瘡99例療效觀察［J］.湖南中醫雜志，2007，23（1）：31.

［2］陳衛平，劉百祥，符逢春，等，黃白痤瘡膏對金黃地鼠白細胞雄激素受體及皮脂腺斑組織結構的影響［J］.中華中醫藥學刊，2009，27（3）：521-523.

Bacteriostasis Effect of Huangbai Acne Ointment in Vitro

CHEN Weiping1,BIN Lin1,YANG Shenghui2. 1 Hunan Traditional Chinese Medical College,Zhuzhou(412012),China;2 Hunan University of Traditional Chinese Medicine.

Objective To investigate the bacteriostasis effect of Huangbai acne ointment.Methods Tube fold dilution method and plate method were used to observe the bacteriostasis effect of Huangbai acne ointment water decoction,ceftriaxone,and vitamin A acid cream on Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis in vitro. Results The minimum inhibitory concentration（MIC）of Huangbai acne ointment water decoction,ceftriaxone,and vitamin A acid cream against Staphylococcus aureus was 125mg/mL,4 μg/mL,and 500mg/mL,respectively.The MIC of Huangbai acne ointment water decoction,ceftriaxone,and vitamin A acid cream against Staphylococcus epidermidis was 125mg/mL,16 μg/mL,and 500mg/mL,respectively.Conclusion Huangbai acne ointment water decoction has a good bacteriostatic and bactericidal effect on Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis.

Huangbai acne ointment;Staphylococcus aureus;Staphylococcus epidermidis;Bacteriostatic test

2013-09-16

湖南省教育廳科技計劃項目（No.09C030）