甘肅岷縣當歸產地鑒別研究進展

摘 要 由于地理環境影響，甘肅岷縣當歸與其它產地當歸在主要成分及其含量上存在差異，地道藥材岷縣當歸的鑒別方法有性狀鑒別、組織鑒別、顯微結構鑒別、指紋圖譜鑒別和rRNA鑒別等，通過研究為當歸藥材的開發和利于提供參考。

關鍵詞 甘肅岷縣；當歸；產地鑒別

中圖分類號：F326.12 文獻標志碼：B 文章編號：

當歸別名干歸、馬尾歸、云歸及金當歸等，為多年生草本植物，在中國主要分布于甘肅、云南、青海及湖南等地。當歸的根可入藥，是最常用的中藥之一[1]。甘肅岷縣地處青藏高原邊緣，具有高寒陰濕的氣候特點，素有“隴原旱碼頭”和千年藥鄉的美譽。當歸忌積水，以土層深厚、肥沃疏松及腐殖質多的沙壤土為宜，故甘肅省岷縣為當歸的生長提供了得天獨厚的環境。

岷縣當歸與歐當歸的鑒別方法有多種，最常見的方法是從性狀特征、外觀特征出發進行辨認[2]。另外還有組織鑒別、粉末鑒定、指紋圖譜鑒別等。

1 性狀鑒別

就性狀特征而言，岷縣當歸呈不規則圓柱形，表面黃褐色至棕褐色具有皺紋和皮孔，有油潤感。根頭略顯膨大直徑1～4cm且有環紋，上端圓鈍，有紫色或黃綠色殘留的葉鞘和莖基。主根粗短1～3cm，下部有支根2～10條。歐當歸較之岷縣當歸略長，表面灰褐色及有皺紋和皮孔，干枯無油潤感。根頭較膨大，平截直徑3～5cm，主根粗長一般長約10cm，下部有支根數條，多平直。

2 組織鑒別

岷當歸與歐當歸的組織鑒別：需取全材研成細末，過60目篩。并取當歸和歐當歸直徑相當的支根做橫向切片。再就二者的粉末和支根切片進行顯微觀測。兩者切面大小相仿，但它們是同科不同屬，故其組織結構有別。可作為組織鑒別的依據有二：1）木質部導管和射線：岷縣當歸木質部欠發達，導管疏松，木射線寬廣數10列細胞。后者則木質部發達，導管緊密，木射線狹窄2～3列細胞。2）淀粉粒：取二者粉末裝片鏡檢發現，當歸淀粉粒較少分散成單粒或抱成團，呈圓形或橢圓形直徑5～18μm。后者淀粉含量高，呈類球形，大粒少小粒多。

3 顯微鑒別

岷當歸與歐當歸的薄片層析：將二者研細過20目，取少量當歸與歐當歸的粉末用甲醇浸泡3h以上，濃縮提取液備用。以2倍量的1%羥甲基纖維素鈉混合硅膠粉研勻，鋪板，風干，110℃烘干40miN做吸附劑。氯仿-乙酸乙酯-乙醇-甲酸（5∶4∶3∶1）做展開劑，1%香莢蘭醛-濃硫酸做顯色劑。在365mm熒光燈下觀察結果顯示，岷縣當歸：Rf0.83（亮藍綠色）、Rf0.74（藍紫色）。歐當歸：Rf0.83（亮藍綠色）、Rf0.74（藍紫色）、Rf0.22（藍灰色）。岷當歸與歐當歸在氯仿-乙酸乙酯-乙醇-甲酸（5∶4∶3∶1）系統中的層析行為差異，可作為二者鑒別的重要依據。

4 超顯微鑒別

目前，超微結構及形態的觀察比較在當歸鑒定上的應用比較廣泛，但利用掃描電子顯微鏡對不同品系的當歸種子形態的鑒別尚不多見。后者的主要鑒別指標是種子形態和表面紋理。岷歸的種子細胞為寬卵圓形，背部隆起較低且隆起間隔較大。它們的一級紋飾也近似，只在二級紋飾上存在較大差異。一級紋飾為不平行起伏排列，二級紋飾為不規則交叉排列。種子的形狀和表面紋飾可作為品種鑒別的

依據。

5 指紋圖譜鑒別

建立綜合評價當歸質量的HPLC指紋圖譜分析法，對當歸進行鑒定和評價能更全面的反應它的質量和道地性，可準確反應產地對當歸的影響信息[3]。在當歸質量控制中，判別分析又稱“分辨法”，是在分類確定的條件下，根據某一研究對象的各種特征值判別其類型歸屬問題的一種多變量統計分析方法。其基本原理是按照一定的判別準則，建立一個或多個判別函數，用研究對象的大量資料確定判別系數，并計算判別指標。據此即可確定某一樣本的種屬。

6 rRNA基因間隔區測序法

隨著分子生物學技術的發展，中藥材的鑒定方法從最初的形狀鑒定，至后來形成的顯微鑒別、理化鑒別和光譜等方法的應用，已發展到了DNA指紋圖譜鑒定等分子水平。從分子水平對當歸道地性鑒定的研究，以當歸rRNA基因內轉錄間隔區通過引物套疊式擴散當歸種子DNA中rRNA基因的第1和第2間隔區對擴散產物進行DNA堿基排列順序的測定，并以獲得的當歸rRNA基因內轉錄間隔區堿基序列作為分子水平的鑒定標記。

7 各鑒別方法的比較

性狀鑒別是一種基于經驗的快速鑒別方法，為藥農或商販親睞。性狀鑒別從當歸的外形特征和組織的的結構特征出發對當歸的產地信息作出快速判斷。不同產地的當歸在以上方面的差異不是很大，所以結果也不是很可靠。顯微鑒別和超顯微鑒別的重現性好，并且當歸越新鮮結果越明顯，是現行鑒別方法中嘗用且較好的一種。岷縣當歸指紋圖譜還沒有建立起來，rRNA基因內轉錄間隔區堿基序列數據庫也沒有建立起來，指紋圖譜和DNA擴散技術方法還有待完善。

參考文獻

[1] 柳永青.當歸的化學成分與生物活性[J].沈陽航空航天醫藥，2009，20（11）：127-129.

[2] 齊耀東.當歸藥材資源調查與分析[J].中國農學通報，2009，25（23）：437-441.

[3] 劉元生.當歸造血作用研究進展[J].醫學綜述，2010，17（1）：1089-1091.

（責任編輯：趙中正）

收稿日期：2014-01-14

基金項目：甘肅省科技計劃資助項目（1308RJZE305）。

作者簡介：王文（1964-），男人，博士，畜牧師，從事草地生態資源與環境