蛋白轉化酶枯草溶菌素9檢測對診斷冠脈粥樣硬化的臨床意義

李偉其?曾龍宏?莫玉前

【摘要】 目的 探討應用蛋白轉化酶枯草溶菌素9（PCSK9）檢測對冠脈粥樣硬化的診斷意義。方法 對60例冠脈粥樣硬化患者按照冠脈狹窄程度分為輕度組（狹窄<50%）23例、中度組（狹窄50%～75%）26例及重度組（狹窄>75%）11例。對比三組PCSK9含量差異， 同時對所有患者PCSK9含量與甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及冠脈狹窄程度的相關性進行分析， 并分析PCSK9對診斷冠脈粥樣硬化的意義。結果 重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）， 同時PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）， PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義（P<0.05）。結論 PCSK9檢測對冠脈粥樣硬化有著明確的診斷意義。

【關鍵詞】 PCSK9；冠脈粥樣硬化；診斷意義

Clinical significance of convertase subtilisin 9 （PCSK9） for diagnosis of coronary atherosclerosis LI Wei-qi， ZENG Long-hong， MO Yu-qian. Department of Blood Transfusion， Dongguan People's Hospital of Dongguan， 523059， China

【Abstract】 Objective To investigate the diagnostic significance of PCSK9 detection on coronary atherosclerosis. Methods 60 patients of coronary atherosclerosis were divided into three groups according to the degree of coronary artery stenosis. Mild group （narrow<50%）， 23 cases， moderate group （narrow 50-75%）， 26 cases and severe group （narrow>75%）， 11 cases. Differences between three groups of PCSK9 content， and PCSK9 content of all patients with triglyceride （TG）， low density lipoprotein cholesterol （LDL-C）， high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） and the relationship between the degree of coronary artery stenosis were analyzed， and the significance of PCSK9 in the diagnosis of coronary atherosclerotic. Results Severe group of PCSK9 content was obviously higher than that in moderate group and mild group（P<0.05）， while PCSK9 content and TG， LDL-C and degree of coronary stenosis in a significant positive linear correlation（P<0.05），and negative correlation with HDL-C（P<0.05），PCSK9 diagnosis of coronary atherosclerosis existed （P<0.05）.Conclusion PCSK9 detection has a definite diagnosis of coronary atherosclerosis.

【Key words】 PCSK9； Coronary atherosclerosis； Diagnostic significance

動脈粥樣硬化屬因血脂代謝異常所導致的全身動脈疾病， 其是臨床多種疾病的病理基礎， 是威脅中老年健康的主要危險因素之一。目前對于動脈粥樣硬化檢查主要依靠于動脈彩超及血脂檢測， 但因冠狀動脈部位的特殊性， 因此臨床診斷冠狀動脈粥樣硬化常受到局限。近年來， PCSK9與脂代謝及冠狀動脈粥樣硬化的相關性受到臨床重視[1]， 因此本文對本院行冠狀動脈造影檢查明確診斷為冠狀動脈粥樣硬化患者的PCSK9進行分析， 探討應用PCSK9檢測對冠脈粥樣硬化的診斷意義。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3月～2013年10月本院收治的經冠狀動脈造影檢查明確存在冠脈狹窄， 且入院前均未服用降脂藥物的患者60例， 按照主動脈狹窄程度分為輕度組（狹窄<50%）23例、中度組（狹窄50～75%）26例及重度組（狹窄>75%）11例。輕度組， 男14例， 女9例；年齡41～61歲， 平均（55.41±10.14）歲；中度， 男18例， 女8例；年齡42～60歲， 平均（54.97±9.97）歲；重度組， 男7例， 女4例；年齡40～63歲， 平均（55.66±9.89）歲。三組以上臨床資料比較差異無統計學意義， 具可比性（P>0.05）。

1. 2 觀察指標及方法

1. 2. 1 化驗檢測 所有患者均于行冠脈造影檢查前抽取空腹肘靜脈血， 進行PCSK9、TG、LDL-C及HDL-C檢查， PCSK9檢測采用ELISA法， TG、LDL-C及HDL-C檢測采用酶法定量。分別統計各組患PCSK9、TG、LDL-C及HDL-C含量， 對比三組PCSK9含量， 同時對所有患者PCSK9含量與TG、LDL-C及HDL-C的相關性進行分析。

1. 2. 2 冠脈造影檢查 所有患者入組后均行冠脈造影檢查， 切口選擇右股動脈， 通過造影檢查， 明確冠脈狹窄程度， 并對患者進行分組。對比所有患者PCSK9含量與狹窄程度的相關性。

1. 2. 3 診斷價值分析 對PCSK9對冠脈粥樣硬化診斷的敏感性進行分析。

1. 3 統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件， 計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 用F檢驗、直線相關分析及ROC分析進行比較。以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 PCSK9含量差異 重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）。見表1。

2. 2 PCSK9含量與TG、LDL-C、HDL-C及冠脈狹窄相關性 PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）。具體見表2。

2. 3 診斷價值分析 PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義（P<0.05）。具體見ROC曲線圖（見圖1）和表3。

圖1 ROC曲線

3 討論

PCSK9屬調控膽固醇代謝的一種特異性分子， 其屬于蛋白酶的一種。基礎研究顯示：人類PCSK9基因位于1號染色體上[2]， 為氨基酸的酸性糖蛋白[3]， 被譽為第九種蛋白轉化酶[4]。PCSK9在成人人體中主要在肝臟、小腸和腎臟中表達， 在皮膚及神經系統的表達較少[5]。PCSK9為脂質代謝中的重要調控因子之一， 臨床有研究顯示PCSK9調控膽固醇機制主要通過PCSK9的表達產物NARC-1實現， NARC-1可刺激調節膽固醇的位點， 并通過與細胞表面LDL受體黏合， 使LDLs從血液中被除去， 發生黏合后， 細胞對膽固醇與受體均執行內在化處理， LDLR被循環到細胞表面并與新的膽固醇分子結合， 而膽固醇被處理。PCSK9通過減少細胞表面LDLR的數量， 從而達到影響膽固醇代謝的作用[6]。因體內膽固醇的含量對冠狀動脈粥樣硬化發生有著直接的作用， 因此可見， PCSK9可間接起到影響動脈粥樣硬化的發生。

本研究主要對于應用PCSK9檢測對于冠狀動脈粥樣硬化的診斷的臨床意義進行分析。首先研究通過將經行冠脈造影證實存在冠狀動脈粥樣硬化的患者按照冠脈狹窄程度進行分組， 對比各組PCSK9含量差異， 結果顯示重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）。可見隨著冠狀動脈粥樣硬化程度的加重， PCSK9含量也隨之升高。同時本研究又將PCSK9含量與引起動脈粥樣硬化的主要危險因素TG、LDL-C、HDL-C及冠脈狹窄程度的相關性進行分析， 結果顯示：PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）。可見PCSK9含量在脂質代謝及動脈粥樣硬化的過程中均起到了十分重要的影響作用， 其含量的升高可加重脂代謝異常及冠狀動脈粥樣硬化程度。此外本研究對于應用PCSK9檢測對冠狀動脈粥樣硬化的診斷敏感性進行分析， 結果顯示：PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義。提示可以應用檢測PCSK9含量來用于診斷冠脈粥樣硬化。

通過本研究結果可見， PCSK9含量增多可顯著增加冠狀動脈粥樣硬化的程度， 同時臨床應用檢測PCSK9含量， 可對冠狀動脈粥樣硬化的診斷及嚴重程度進行初步評估， 可用于臨床早期診斷冠狀動脈粥樣硬化的標準之一。

參考文獻

[1] Hoffhines AJ，Jen CH，Leary JA，et al. Tyrosylprotein sulfotran-sferase-2 expression is required for sulfation of RNase 9 and Mfge8 in vivo.J Biol Chem， 2009，284（5）：3095-3105.

[2] Seidah NG， Be njannet S， Wickham L， et al. The secretory proprotei n convertase neural apoptosis-regulated convertase1 （NARC-1）： liver regenera tion and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci USA， 2003，100（3）：928-933.

[3] Benjannet S， Rhainds D， Essalmani R， et al. NARC-1/PCSK9 and its natural muta nts：zymogen cleavage and effects on the low density lip oprote in（LDL）receptor and LDL cholesterol. J Biol Chem， 2004，279（47）：48865-48875.

[4] Hunt S C， Hopkins P N， Bulka K， et al. Genetic localization to chromosome1p 32 of the third locus for familial hypercholesterolemia in all tall kindred. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2000，20（4）：1089-1093.

[5] Cunningham D， Danley D E， Geoghegan K F， et al. Structural and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia.Nat Struct Mol Biol， 2007，14（5）：413-419.

[6] Dubuc G， Chamberland A， Wassef H， et al. Statins upreguulate PCSK9， the gene encoding the proprotein convertase neuralapoptosis -regulated convertase-1 implicated in familial huper-choles-terolemia.Arterioscler Thromb Vase Biol， 2004（24）：1454-1459.

1. 2. 2 冠脈造影檢查 所有患者入組后均行冠脈造影檢查， 切口選擇右股動脈， 通過造影檢查， 明確冠脈狹窄程度， 并對患者進行分組。對比所有患者PCSK9含量與狹窄程度的相關性。

1. 2. 3 診斷價值分析 對PCSK9對冠脈粥樣硬化診斷的敏感性進行分析。

1. 3 統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件， 計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 用F檢驗、直線相關分析及ROC分析進行比較。以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 PCSK9含量差異 重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）。見表1。

2. 2 PCSK9含量與TG、LDL-C、HDL-C及冠脈狹窄相關性 PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）。具體見表2。

2. 3 診斷價值分析 PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義（P<0.05）。具體見ROC曲線圖（見圖1）和表3。

圖1 ROC曲線

3 討論

PCSK9屬調控膽固醇代謝的一種特異性分子， 其屬于蛋白酶的一種。基礎研究顯示：人類PCSK9基因位于1號染色體上[2]， 為氨基酸的酸性糖蛋白[3]， 被譽為第九種蛋白轉化酶[4]。PCSK9在成人人體中主要在肝臟、小腸和腎臟中表達， 在皮膚及神經系統的表達較少[5]。PCSK9為脂質代謝中的重要調控因子之一， 臨床有研究顯示PCSK9調控膽固醇機制主要通過PCSK9的表達產物NARC-1實現， NARC-1可刺激調節膽固醇的位點， 并通過與細胞表面LDL受體黏合， 使LDLs從血液中被除去， 發生黏合后， 細胞對膽固醇與受體均執行內在化處理， LDLR被循環到細胞表面并與新的膽固醇分子結合， 而膽固醇被處理。PCSK9通過減少細胞表面LDLR的數量， 從而達到影響膽固醇代謝的作用[6]。因體內膽固醇的含量對冠狀動脈粥樣硬化發生有著直接的作用， 因此可見， PCSK9可間接起到影響動脈粥樣硬化的發生。

本研究主要對于應用PCSK9檢測對于冠狀動脈粥樣硬化的診斷的臨床意義進行分析。首先研究通過將經行冠脈造影證實存在冠狀動脈粥樣硬化的患者按照冠脈狹窄程度進行分組， 對比各組PCSK9含量差異， 結果顯示重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）。可見隨著冠狀動脈粥樣硬化程度的加重， PCSK9含量也隨之升高。同時本研究又將PCSK9含量與引起動脈粥樣硬化的主要危險因素TG、LDL-C、HDL-C及冠脈狹窄程度的相關性進行分析， 結果顯示：PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）。可見PCSK9含量在脂質代謝及動脈粥樣硬化的過程中均起到了十分重要的影響作用， 其含量的升高可加重脂代謝異常及冠狀動脈粥樣硬化程度。此外本研究對于應用PCSK9檢測對冠狀動脈粥樣硬化的診斷敏感性進行分析， 結果顯示：PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義。提示可以應用檢測PCSK9含量來用于診斷冠脈粥樣硬化。

通過本研究結果可見， PCSK9含量增多可顯著增加冠狀動脈粥樣硬化的程度， 同時臨床應用檢測PCSK9含量， 可對冠狀動脈粥樣硬化的診斷及嚴重程度進行初步評估， 可用于臨床早期診斷冠狀動脈粥樣硬化的標準之一。

參考文獻

[1] Hoffhines AJ，Jen CH，Leary JA，et al. Tyrosylprotein sulfotran-sferase-2 expression is required for sulfation of RNase 9 and Mfge8 in vivo.J Biol Chem， 2009，284（5）：3095-3105.

[2] Seidah NG， Be njannet S， Wickham L， et al. The secretory proprotei n convertase neural apoptosis-regulated convertase1 （NARC-1）： liver regenera tion and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci USA， 2003，100（3）：928-933.

[3] Benjannet S， Rhainds D， Essalmani R， et al. NARC-1/PCSK9 and its natural muta nts：zymogen cleavage and effects on the low density lip oprote in（LDL）receptor and LDL cholesterol. J Biol Chem， 2004，279（47）：48865-48875.

[4] Hunt S C， Hopkins P N， Bulka K， et al. Genetic localization to chromosome1p 32 of the third locus for familial hypercholesterolemia in all tall kindred. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2000，20（4）：1089-1093.

[5] Cunningham D， Danley D E， Geoghegan K F， et al. Structural and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia.Nat Struct Mol Biol， 2007，14（5）：413-419.

[6] Dubuc G， Chamberland A， Wassef H， et al. Statins upreguulate PCSK9， the gene encoding the proprotein convertase neuralapoptosis -regulated convertase-1 implicated in familial huper-choles-terolemia.Arterioscler Thromb Vase Biol， 2004（24）：1454-1459.

1. 2. 2 冠脈造影檢查 所有患者入組后均行冠脈造影檢查， 切口選擇右股動脈， 通過造影檢查， 明確冠脈狹窄程度， 并對患者進行分組。對比所有患者PCSK9含量與狹窄程度的相關性。

1. 2. 3 診斷價值分析 對PCSK9對冠脈粥樣硬化診斷的敏感性進行分析。

1. 3 統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件， 計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 用F檢驗、直線相關分析及ROC分析進行比較。以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 PCSK9含量差異 重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）。見表1。

2. 2 PCSK9含量與TG、LDL-C、HDL-C及冠脈狹窄相關性 PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）。具體見表2。

2. 3 診斷價值分析 PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義（P<0.05）。具體見ROC曲線圖（見圖1）和表3。

圖1 ROC曲線

3 討論

PCSK9屬調控膽固醇代謝的一種特異性分子， 其屬于蛋白酶的一種。基礎研究顯示：人類PCSK9基因位于1號染色體上[2]， 為氨基酸的酸性糖蛋白[3]， 被譽為第九種蛋白轉化酶[4]。PCSK9在成人人體中主要在肝臟、小腸和腎臟中表達， 在皮膚及神經系統的表達較少[5]。PCSK9為脂質代謝中的重要調控因子之一， 臨床有研究顯示PCSK9調控膽固醇機制主要通過PCSK9的表達產物NARC-1實現， NARC-1可刺激調節膽固醇的位點， 并通過與細胞表面LDL受體黏合， 使LDLs從血液中被除去， 發生黏合后， 細胞對膽固醇與受體均執行內在化處理， LDLR被循環到細胞表面并與新的膽固醇分子結合， 而膽固醇被處理。PCSK9通過減少細胞表面LDLR的數量， 從而達到影響膽固醇代謝的作用[6]。因體內膽固醇的含量對冠狀動脈粥樣硬化發生有著直接的作用， 因此可見， PCSK9可間接起到影響動脈粥樣硬化的發生。

本研究主要對于應用PCSK9檢測對于冠狀動脈粥樣硬化的診斷的臨床意義進行分析。首先研究通過將經行冠脈造影證實存在冠狀動脈粥樣硬化的患者按照冠脈狹窄程度進行分組， 對比各組PCSK9含量差異， 結果顯示重度組PCSK9含量明顯高于中度組及輕度組（P<0.05）。可見隨著冠狀動脈粥樣硬化程度的加重， PCSK9含量也隨之升高。同時本研究又將PCSK9含量與引起動脈粥樣硬化的主要危險因素TG、LDL-C、HDL-C及冠脈狹窄程度的相關性進行分析， 結果顯示：PCSK9含量與TG、LDL-C及冠脈狹窄程度存在顯著正向直線相關性（P<0.05）， 與HDL-C存在負向相關性（P<0.05）。可見PCSK9含量在脂質代謝及動脈粥樣硬化的過程中均起到了十分重要的影響作用， 其含量的升高可加重脂代謝異常及冠狀動脈粥樣硬化程度。此外本研究對于應用PCSK9檢測對冠狀動脈粥樣硬化的診斷敏感性進行分析， 結果顯示：PCSK9對冠脈粥樣硬化存在診斷意義。提示可以應用檢測PCSK9含量來用于診斷冠脈粥樣硬化。

通過本研究結果可見， PCSK9含量增多可顯著增加冠狀動脈粥樣硬化的程度， 同時臨床應用檢測PCSK9含量， 可對冠狀動脈粥樣硬化的診斷及嚴重程度進行初步評估， 可用于臨床早期診斷冠狀動脈粥樣硬化的標準之一。

參考文獻

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[2] Seidah NG， Be njannet S， Wickham L， et al. The secretory proprotei n convertase neural apoptosis-regulated convertase1 （NARC-1）： liver regenera tion and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci USA， 2003，100（3）：928-933.

[3] Benjannet S， Rhainds D， Essalmani R， et al. NARC-1/PCSK9 and its natural muta nts：zymogen cleavage and effects on the low density lip oprote in（LDL）receptor and LDL cholesterol. J Biol Chem， 2004，279（47）：48865-48875.

[4] Hunt S C， Hopkins P N， Bulka K， et al. Genetic localization to chromosome1p 32 of the third locus for familial hypercholesterolemia in all tall kindred. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2000，20（4）：1089-1093.

[5] Cunningham D， Danley D E， Geoghegan K F， et al. Structural and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia.Nat Struct Mol Biol， 2007，14（5）：413-419.

[6] Dubuc G， Chamberland A， Wassef H， et al. Statins upreguulate PCSK9， the gene encoding the proprotein convertase neuralapoptosis -regulated convertase-1 implicated in familial huper-choles-terolemia.Arterioscler Thromb Vase Biol， 2004（24）：1454-1459.