VEGF在膀胱尿路上皮癌中的表達及意義

陳小慧 郭玲玲

1.江蘇省連云港中醫藥高等職業技術學校醫學護理系 江蘇 連云港 222000;

2.江蘇省蘇州大學附屬第二人民醫院病理科 江蘇 蘇州 215000

VEGF在膀胱尿路上皮癌中的表達及意義

陳小慧△1郭玲玲＊2

1.江蘇省連云港中醫藥高等職業技術學校醫學護理系 江蘇 連云港 222000;

2.江蘇省蘇州大學附屬第二人民醫院病理科 江蘇 蘇州 215000

目的:研究VEGF在膀胱尿路上皮癌(Bladder Urothelial Carcinoma，BUC)中表達，探討該指標與BUC病理分級、臨床分期及預后的關系。方法:對105例術后病理檢查為膀胱尿路上皮癌患者的病理切片進行VEGF免疫組化染色，另外選擇20例正常膀胱粘膜作為對照，將染色結果與BUC病理分級、臨床分期以及預后情況進行比較分析。結果:VEGF通過影響腫瘤血管生成的相關機制，促進了膀胱尿路上皮癌的發生，進而影響其進展與預后。結論:VEGF對膀胱尿路上皮癌的臨床病理診斷、治療及預后評估具有一定的指導意義。

VEGF;膀胱尿路上皮癌;腫瘤標志物

膀胱癌(bladder cancer，BC)是人類常見的惡性腫瘤，發病率及死亡率均居泌尿系統腫瘤的首位［1］，在組織學類型上以膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma，BUC)最為多見，占90%以上。有研究表明膀胱癌嚴重危害人類的健康，且發病率逐年增高［2］。另外膀胱癌的復發率高達55%～85%，BC的診治及預后已引起了人們極大重視［3］。膀胱癌確切的發病機制仍未完全闡明。膀胱鏡檢查和病理活檢是診斷膀胱癌的最準確的方法，但此法屬于有創檢查，敏感性偏低，且無法預測預后。因而尋找敏感和特異性高的技術具有非常重要的意義。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2011年1月～2013年12月，在連云港地區泌尿外科手術切除的105例術后病理檢查為膀胱尿路上皮癌的組織作為BUC組，另外選擇20例正常膀胱粘膜(取自前列腺增生癥手術的患者)作為對照。BUC組中男74例，女31例，性別比為2.4:1;患者年齡44～72歲，平均年齡56.3歲，其中初發69例，復發36例。膀胱癌病理分級(WHO/ISUP，2004):非浸潤性尿路上皮癌(non－invasive urothelial carcinoma，NIUC)64例，浸潤性尿路上皮癌(infiltrating urothelial carcinoma，IUC)41例;臨床分期按國際抗癌聯盟UICC－TNM標準分為:淺表性癌(Ta～T1)62例，浸潤性癌(T2～T4b)43例。

1.2 實驗方法及試劑

采用免疫組化SP法進行組織染色，每個步驟嚴格控制時間及溫度。即用型鼠抗人VEGF單克隆抗體、美國ProtTech公司生產，購自北京中杉橋生物技術有限公司。PBS緩沖(粉劑)、EDTA抗原修復液、DAB顯色試劑盒，上海基因科技有限公司生產，均購自北京中杉橋生物技術有限公司。常規病理檢驗試劑由徐州醫學院附屬連云港醫院病理科提供。

1.3 結果判斷

1.3.1 質量控制

(1)實驗操作標準化:每次實驗均以磷酸鹽緩沖液PBS代替一抗的方法設置陰性對照，陽性對照則采用福建邁新和北京中杉橋公司提供的陽性切片。

(2)實驗結果的判定，采用雙盲法進行結果判定，由2名病理科醫師確診，如有異議請另一位經驗豐富的高年資病理醫師協助診斷。

1.3.2 判定標準

VEGF在胞膜或胞漿內出現明顯棕黃色或棕色顆粒者為陽性，參照Kinoshita等的判定標準，陽性細胞比例＜10%為陰性，陽性細胞比例≥10%為陽性［4］。

1.4 統計學分析

采用SPSS17.0統計軟件，免疫組化結果中的VEGF指標在膀胱尿路上皮癌中的表達與臨床分期、病理分級及復發的關系采用X2檢驗。P＜0.05表示有統計學意義，P＜0.01表示有極顯著意義。

2.實驗結果

VEGF呈胞膜或胞漿陽性表達(見圖1)。在105例膀胱尿路上皮癌中有53例(50.5%)陽性表達，20例正常膀胱粘膜組織VEGF陽性表達2例(10.0%)，差異有統計學意義(P＜0.01)。VEGF蛋白在病理分級為NIUC中的陽性表達25例(39.1%)，在IUC中陽性表達28例(68.3%)，兩者之間差別有統計學意義(P＜0.01)。VEGF蛋白在臨床分期為T2～T4b中的陽性表達29(67.4%)，顯著高于臨床分期為Ta～T1期陽性表達的24例(38.7%)，兩者之間差別有統計學意義(P＜0.01)。VEGF蛋白在復發組中的陽性表達25(69.4%)，初發組中的陽性表達28(40.6%)，具有統計學意義(見表1)

表1 VEGF在正常膀胱組織與膀胱尿路上皮癌中的表達Tab4:The expression of VEGF in normal bladder tissues and bladder urothelial carcinoma

圖1 VEGF在浸潤性膀胱尿路上皮癌中的表達陽性(SP×40)Fig 1 VEGF expression in infiltrating urothelial carcinoma of the positive SP×40

3.討論

膀胱尿路上皮癌是典型的血管生成活躍的組織，腫瘤的生長、浸潤及轉移都依賴于血管為瘤體提供足夠的養料，所以新生血管的生成是腫瘤生成、發展及轉移的關鍵環節［5］。VEGF是目前唯一能特異性作用于血管內皮的促血管生成的因子，其特異性所發揮的作用在所有的促血管生成因子中最強［6］。腫瘤細胞分泌的VEGF與受體結合后，在血管內皮發揮作用，能有效促進血管內皮的增殖、分離和遷移，另外VEGF還能發揮促發纖溶和降解膠原的作用，進一步促進腫瘤血管形成，新生的血管為腫瘤生長提供更多的營養，間接促進腫瘤增殖和轉移。此外血管內皮細胞分泌的生長因子本身也刺激腫瘤生長，新血管生成本身就是一種侵襲行為［7］。

目前在體外培養的細胞株及較多的惡性腫瘤組織中發現VEGFmRNA的高表達［8］。但VEGF在膀胱尿路上皮癌的研究報道在國內較少見，有學者研究發現VEGF在膀胱尿路上皮癌的發生、發展、轉移及復發等過程中起著重要的作用［9～10］。國外Santos L用免疫組化的方式研究淺表乳頭狀膀胱腫瘤患者中VEGF的表達以及與血管新生的關系，推測血管新生可作為膀胱腫瘤復發的預測因子［11］。

本研究結果支持上述觀點，BUC組織中VEGF的表達顯著高于正常膀胱組織，其表達隨著腫瘤分級、分期的升高而增強，此外VEGF在BUC復發組中的陽性表達率顯著高于初發組，VEGF加快BUC的進展，與膀胱尿路上皮癌的預后密切相關。通過研究，筆者認為VEGF是研究BUC生物學行為的重要標記物，是評價膀胱尿路上皮癌術后復發有意義的指標。目前，針對VEGF傳導通路的分子靶向治療藥物已被成功研制，且取得良好的治療效果。隨著腫瘤發病機制的不斷深入，阻斷腫瘤血管生成從而實現腫瘤防治的研究已成為新的研究領域，血管生成抑制劑將來有可能成為抗腫瘤的主要藥物，并可能最終治愈腫瘤。

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［3］GUAN Jing，MENG Lin，GAO Li.Study on Chromosome Aberration ofLymphocytes in Peripheral Blood of Patients With Bladder Carcinoma［J］.Carcinogenesis，Teratogenesis＆niaowamutage－nesis，2008，(2):678－679.

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［5］JiGZh，Wang XH，Miao L，et al.Role of transforming growth factorbetal－smad signal transduction pathway in patients with hepato－cellular carcinoma［J］.world J Gastroenterol，2006，12(4):644－684.

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［10］張珺，吳奎，肖峻，等.膀胱尿路上皮癌中MIF與VEGF的表達及其臨床意義［J］.安徽醫科大學學報:2014，48(3):354－358.

［11］Santos L，Costa C，Pereira S，et a1.Neovascularisation is a prognostic factor of early recurrence in T1/G2umthelial bladder tumours［J］.Ann Oncol，2008，14(9):1419－1424.

Objective:In order to study VEGF expression in bladder urothelial carcinoma，discuss it with pathological grade，clinical stage and prognosis，provide the basis for the pathological diagnosis，treatment and prognosis of bladder cancer.Methods:the retrospective study includes 105patients specimens wax block with pathologic examination of the bladder urothelial cancer，Immunohistochemical SP method detectes the expression of VEGF 105cases BUC pathological specimens.And select 20cases of normal bladder mucosa as control.The immunostaining results were analyzed in relation to the tumor stage，grade and compared with the clinical par ameters of prognosis.Results:VEGF promoted the occurrence of bladder cancer by affecting the the progress and prognosis.The expression of VEGF has a certain guidance to clinical and pathological diagnosis，treatment and prognosis of bladder cancer.

VEGF;Bladder urothelial carcinoma;Tumor Marker

R446.6

B

1009－6019(2014)11－0002－02

陳小慧 職務:教研室主任 職稱:高校講師 學歷:碩士