手足口病患兒血清免疫球蛋白表達水平與疾病進展相關性分析

楊德華，易冬玲，周曉飛，張亞美

手足口病患兒血清免疫球蛋白表達水平與疾病進展相關性分析

楊德華，易冬玲，周曉飛，張亞美

目的探討輕癥和重癥手足口病（hand,footandmouth disease,HFMD）患兒血清免疫球蛋白變化與疾病進展的相關性。方法選擇本院2013年6月住院的輕癥和重癥HFMD患兒369例，其中輕癥組259例，重癥組（含危重型）110例；以同期30名體檢正常的健康兒童為對照組。采用免疫比濁法檢測各組血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和補體C3、C4表達水平。比較各組及重癥組腸道病毒71型（enterovirus 71,EV71）感染和非EV71感染患兒、柯薩奇病毒A16（coxsackievirus A16,Cox-A16）感染和EV71感染患兒的血清免疫球蛋白表達水平。結果與對照組相比，重癥組IgG、IgA和IgM水平顯著升高，輕癥組IgM水平顯著升高；與輕癥組相比，重癥組IgG和IgA水平顯著升高；重癥組EV71感染患兒IgM水平顯著高于非EV71感染患兒，其IgG和IgM水平顯著高于CoxA16感染患兒；各組間補體C3、C4水平比較差異均無統計學意義。結論HFMD患兒血清免疫球蛋白表達水平存在變化，隨著病情進展，血清免疫球蛋白表達水平變化更加顯著。重癥患兒血清免疫球蛋白表達水平顯著高于輕癥患兒，重癥患兒中EV71感染者較CoxA16感染者血清免疫球蛋白表達水平變化更加顯著。

手足口病；危重癥；腸道病毒屬；免疫球蛋白類

手足口病（hand,footandmouth disease,HFMD）是由腸道病毒引起的常見傳染病，以柯薩奇病毒A16（coxsackievirus A16,CoxA16）和腸道病毒71型（enterovirus71,EV71）引起多見，常發生于兒童。臨床表現輕重不一，大部分患者臨床表現較輕，以發熱及手部、足部、口腔等部位的皮疹和皰疹為主要癥狀，個別患兒病情較重，可并發心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等。重癥患兒臨床表現較隱匿，主要的神經系統表現為精神差、驚跳和激惹，病情進展快，常易導致死亡[1]。其中EV71感染引起重癥病例的比例較高[2]。由于EV71對中樞神經系統有極高的感染性，故較其他腸道病毒感染病程進展快，可迅速發生神經源性肺水腫、肺出血及腦炎而死亡[3]。有研究認為HFMD的轉歸與兒童機體免疫狀況可能存在一定關系[4]，但其關系尚不明確，此外，不同病毒感染導致HFMD患者免疫狀況差異的研究也較少。本研究對我院2013年6月收治的369例住院HFMD患兒的血清免疫球蛋白及補體水平進行總結，對EV71感染和非EV71感染、CoxA16感染和EV71感染的重癥HFMD患兒的血清免疫球蛋白表達水平進行分析，探討不同病情程度HFMD患兒血清免疫球蛋白表達水平變化與臨床表現之間的關系，為進一步研究提供基礎資料。

1 對象與方法

1.1 對象369例HFMD患兒均為本院2013年6月住院的確診病例，其中男241例，女128例，男女比例為1.88∶1；年齡7月齡～9歲，中位年齡2.26歲，3歲以下255例（69.11%）。369例按病情分為2組：輕癥組259例（70.19%），治愈好轉258例（99.61%），自動出院1例（0.39%）；重癥組（含危重型）110例（29.81%），治愈好轉108例（98.18%），死亡2例（1.82%）。以同期30名體檢正常的健康兒童為對照組，各組間性別和年齡差異無統計學意義。本研究獲得我院倫理委員會批準，并取得患兒家屬的知情同意。

1.2 診斷標準HFMD診斷符合《手足口病診療指南（2010年版）》[5]的標準。患兒分為輕型組及重型組，重型組含危重型病例。重型的診斷標準為：出現神經系統受累表現，例如，精神差、嗜睡、易驚、譫妄；頭痛、嘔吐；肢體抖動、肌陣攣、眼球震顫、共濟失調和眼球運動障礙；無力或急性弛緩性麻痹；驚厥。體征可見腦膜刺激征，腱反射減弱或消失。危重型的診斷標準為出現下列情況之一：①頻繁抽搐、昏迷和腦疝；②呼吸困難、發紺、血性泡沫痰、肺部啰音等；③休克等循環功能不全表現。

1.3 納入及排除標準納入標準：①符合HFMD的診斷標準；②病程1～5 d；③患兒家屬知情同意。排除標準：①檢測前應用激素、血制品或有免疫系統等基礎疾病；②長期應用激素或化療藥物。

1.4 檢測方法入院時采集患兒外周靜脈血2ml，采用免疫比濁法測定血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和補體C3、C4水平，儀器為HITACHI 7600型（日本）全自動生化分析儀，試劑購于芬蘭Orion Diagnostica公司。采集患兒咽拭子進行病毒核酸的提取和分類檢測。

1.5 統計學處理采用SPSS 18.0軟件進行統計分析，計量資料用x±s表示，組間比較采用t檢驗或單因素方差分析（One-way ANOVA），對方差分析結果差異有統計學意義者采用q檢驗進行兩兩比較。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組間體液免疫水平比較重癥組血清IgG、IgA和IgM水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。采用q檢驗進行兩兩比較，重癥組血清IgG和IgA水平高于輕癥組，差異有統計學意義（P＜0.01）；輕癥組IgM水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）。3組間血清補體C3和C4水平差異無統計學意義。見表1。

表1 重癥組、輕癥組和對照組體液免疫水平比較（x±s，g/L）Table 1 Comparison of humoral immunity levels among the severe group,the m ild group and the control group (x±s,g/L)

2.2 重癥組體液免疫水平變化情況對重癥組EV71感染患兒與非EV71感染患兒體液免疫水平進行比較，EV71感染患兒血清IgM水平高于非EV71感染患兒，差異有統計學意義。其他指標比較差異無統計學意義（表2）。

表2 重癥組EV71感染患兒與非EV71感染患兒體液免疫水平比較（x±s，g/L）Table 2 Com parison of humoral immunity levels between the severe children w ith EV71 and w ithout EV71 infection (x±s,g/L)

對重癥組EV71感染患兒與CoxA16感染患兒體液免疫水平進行比較，EV71感染患兒血清IgG和IgM水平均高于CoxA16感染患兒，差異有統計學意義；EV71感染患兒與CoxA16感染患兒血清IgA和補體C3、C4水平差異無統計學意義（表3）。

表3 重癥組EV71感染患兒與CoxA16感染患兒體液免疫水平比較（x±s，g/L）Table 3 Com parison of humoral immunity levels between the severe HFMD children w ith EV71 and CoxA16 infection(x±s,g/L)

3 討論

研究發現，抗體介導的免疫應答在多種病毒的感染致病過程中發揮著重要作用[6]。體液免疫是B細胞產生抗體達到保護目的的免疫機制，是機體特異性免疫的重要組成部分[7]。IgG在再次體液免疫反應時起主要作用，在機體免疫防御中發揮抗感染、中和毒素等作用。IgA在黏膜局部發揮抗菌、抗病毒和局部免疫作用，可阻止病毒在咽喉部和腸道內的黏附和初步增殖。IgM在初次體液免疫反應時起主要作用，在病毒感染早期出現。

本研究中，輕癥HFMD患兒血清IgM水平明顯高于對照組，因為急性感染期體內的體液免疫被激活，產生抗體中和病毒，防止疾病的發展[8]。隨著病情進展，重癥HFMD患兒血清IgG和IgA水平逐漸升高，明顯高于輕癥組，表明在疾病的重癥期可能會出現免疫功能的亢進，患兒體液免疫能力增強。因此，隨著病情的進展，免疫球蛋白表達進一步異常可能是HFMD患兒出現重癥、危重癥甚至死亡的提示因素之一。

血清補體C3和C4參與機體的免疫應答，具有自穩功能，可引起機體的免疫損傷。本研究中HFMD患兒血清補體C3和C4水平相對穩定，表明血清補體在疾病發展過程中未起主導作用，可能與機體無法產生足夠抗體，無法協同激活補體有關。

研究發現，在細胞免疫發育尚不成熟的HFMD患兒中，如果自身細胞免疫低于體液免疫，EV71感染后有進展為重癥HFMD的傾向[9]。在本研究的重癥HFMD患兒中，EV71感染者血清IgM表達水平較非EV71感染者明顯升高，也較CoxA16感染者血清IgG和IgM表達水平明顯升高，差異均有統計學意義，表明EV71感染后免疫系統反應明顯增強，尤其較CoxA16感染后體液免疫反應增強，這可能與EV71具有顯著嗜神經性相關。其機制可能是中樞神經系統受到侵犯導致神經內分泌肽分泌紊亂[10-11]，部分神經內分泌肽通過神經-內分泌-免疫系統調節通路，對體液免疫產生了調節作用[12]。EV71感染是否與重癥HFMD的發病率和病死率升高有關，還須進一步深入研究。

本研究結果顯示，隨著HFMD病情進展，體液免疫水平變化顯著，免疫損傷可能參與了HFMD的發病機制，HFMD患兒體液免疫功能激活與疾病進展程度有一定相關性，尤其是EV71感染的重癥患兒表現更為明顯。因此，應加強對HFMD患兒的病原學檢測及體液免疫水平監測，這對于判斷及改善患兒疾病轉歸和預后有一定的意義。

[1]楊德華，易冬玲，譚鈞元，等.西部某醫院484例重型手足口病臨床特點分析［J］.傳染病信息，2014，27(2):105-108.

[2]楊俊連，周志平，許文，等.重癥與普通型手足口病患兒入院首次實驗室指標比較及意義［J］.傳染病信息，2014，27(1):31-34.

[3]Lee JJ,Seah JB,Chow VT,etal.Comparative proteome analyses of host protein expression in response to enterovirus 71 and coxsackievirus A16 infections［J］.JProteomics,2011,74(10):2018-2024.

[4]吳亦棟，尚世強，陳志敏，等.手足口病病原體流行特征分析及臨床意義［J］.中華兒科雜志，2010，48(7):535-539.

[5]中華人民共和國衛生部.手足口病診療指南（2010年版）［EB/OL］.［2014-02-10］.http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htm lfiles/mohyzs/s3586/201004/46884/htm.

[6]Wanhala WM,Silva SM.The human antibody response to dengue virus infection［J］.Viruses,2011,3(12):2374-2395.

[7]鄒美銀，章幼奕.手足口病相關細胞因子的研究進展［J］.傳染病信息，2013，26(1):53-56.

[8]Nimmerjahn F,Ravetch JV.Antibody-mediated modulation of immune responses［J］.Immunol Rev,2010,236:265-275.

[9]Chang LY,Hisung CA,Lu CY.Status of cellular rather than humoral immunity is correlated with clinical outcome of enterovirus 71［J］.Pediatr Res,2006,60(4):466-471.

[10]Sun LM,Zheng HY,Zheng HZ,etal.An enterovirus 71 epidemic in Guangdong Province of China,2008:epidemiological,clinical, and virogenicmanifestations［J］.Jpn JInfectDis,2011,64(1):13-18.

[11]Fortin CF,Ear T,McDonald PP.Autocrine role of endogenous interleukin-18 on inflammatory cytokine generation by human neutrophils［J］.FASEB J,2009,23(1):194-203.

[12]Li J,Lin C,Qu M,et al.Excretion of enterovirus 71 in persons infected with hand,footandmouth disease［J］.Virol J,2013,10:31.

（2014-03-18收稿2014-05-05修回）

（責任編委王永怡本文編輯王姝）

Relationship between serum immunoglobulin levels and disease progression in children w ith hand,foot and mouth disease

YANG De-hua*,YIDong-ling,ZHOU Xiao-fei,ZHANG Ya-mei
Public Health Clinical Center of Chengdu,Chengdu,Sichuan 610066,China
*Corresponding author,E-mail:phccydh@sina.cn

Objective To investigate the relationship between serum immunoglobulin levels and disease progression in mild and severe children with hand,foot and mouth disease(HFMD).M ethods A total of 369 HFMD children,admitted to our hospital during Jun.2013,were divided into amild group(n=259)and a severe group(n=110).Thirty healthy children receiving physical examination were selected as controls.Immune turbidimetry assay was used to detect the levels of serum IgA,IgG,IgM,C3 and C4. Serum immunoglobulin levels were compared among themild group,the severe group and the control group,and between the severe children with enterovirus 71(EV71)and without EV71 infection,and between the severe children with coxsackievirus A16(CoxA16) and EV71 infection.Results As compared with the control group,the levels of IgG,IgA and IgM of the severe group and the level of IgM of the mild group increased significantly.As compared with the mild HFMD group,the levels of IgG and IgA of severe HFMD group increased significantly.The level of IgM of the severe children with EV71 infection was significantly higher than that of the severe children without EV71 infection,and the levels of IgG and IgA of the severe children with EV71 infection were significantly higher than those of the severe children with CoxA16 infection.The levels of C3 and C4 were not significantly different among the groups.Conclusion Serum immunoglobulin levels of HFMD children change,and they change significantly with disease progression.The levels of the severe HFMD children are significantly higher than those of the mild HFMD children.The levels of the severe children with EV71 infection changemore significantly than those of the severe children with CoxA16 infection.

hand,foot and mouth disease;critical illness;enterovirus;immunoglobulins

R512.57

A

1007-8134(2014)03-0167-03

成都市科技局科技惠民計劃項目（成科計[2013]44號）

610066，成都市公共衛生臨床醫療中心（楊德華、易冬玲、周曉飛、張亞美）

楊德華，E-mail:phccydh@sina.cn