高爾基體蛋白73單獨及聯合甲胎蛋白檢測在肝細胞癌診斷中的價值

張進銀，胡萬發，王健，魏紅山

·臨床研究·

高爾基體蛋白73單獨及聯合甲胎蛋白檢測在肝細胞癌診斷中的價值

張進銀，胡萬發，王健，魏紅山

目的探討血清高爾基體蛋白（Golgiprotein,GP）73單獨及聯合甲胎蛋白（AFP）檢測在肝細胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）診斷中的價值。方法選擇HCC、肝炎、非HCC的其他腫瘤患者和健康人群，分別以酶聯免疫吸附試驗檢測GP73水平，電化學發光法檢測AFP水平。結果HCC組GP73水平為（231.2±92.3）ng/ml，明顯高于肝炎組、其他腫瘤組和健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.005）。GP73在81.08 ng/m l處獲得最大約登指數，此時診斷HCC的靈敏度和特異度分別為86.2%和87.8%，高于AFP診斷的價值。GP73聯合AFP診斷HCC，可使診斷靈敏度進一步提高至92.3%。結論GP73作為一種新型HCC血清標記物在HCC診斷中有較高的靈敏度和特異度，且優于AFP。GP73聯合AFP檢測可進一步提高HCC診斷的靈敏度。

肝腫瘤；高爾基體蛋白73；酶聯免疫吸附測定；α-胎蛋白

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是我國常見惡性腫瘤之一，每年死亡約11萬例，占全世界HCC死亡人數的45%[1]。由于多數HCC患者有肝炎及肝硬化等基礎性疾病，發病初期隱匿，臨床確診時多已發展至中晚期，治療效果差，5年生存期短。為此，在高危人群中建立監測HCC的血清標志物尤為重要。近年來高爾基體蛋白（Golgiprotein,GP）73被認為在HCC診斷中具有較高的價值[2-3]，為此我們選擇HCC患者，以血清GP73和甲胎蛋白（AFP）單獨或聯合檢測，并進行對比觀察，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象HCC 65例（HCC組）為我院2012年12月—2013年5月的住院患者，經查住院病歷及病理資料均為HCC術前標本。178名（健康對照組）為2013年4月我院的體檢人群，均體格檢查正常、肝腎功能正常以及影像學檢查無異常。慢性乙型肝炎105例（慢乙肝組），為我院2013年4月的住院患者，其中HBe陽性50例，HBe陰性55例。非HCC的其他腫瘤患者49例（其他腫瘤組），為我院2013年4月的住院患者，其中乳腺癌8例，子宮惡性腫瘤6例，直腸癌5例，胃癌5例，胰腺癌5例，鼻咽癌3例，食管癌7例，肺癌5例，結腸癌5例。收集符合要求的血清標本，置-70℃保存。肝炎及HCC診斷符合《病毒性肝炎防治方案》[4]。

1.2 方法對GP73和AFP聯合檢測進行靈敏度和特異度分析，只要有1項為陽性即判定為聯合檢測陽性。應用受試者工作特征曲線（receiver-operating characteristic curve,ROC曲線）分析GP73和AFP的診斷效能。

1.3 生化及GP73檢測用酶聯免疫吸附試驗檢測血清GP73水平（試劑盒為北京熱景生物技術有限公司生產），嚴格按試劑盒說明書進行操作。AFP用雅培i2000免疫發光分析儀及配套試劑進行檢測。所有檢測均嚴格按標準實驗室質控方法進行。

1.4 統計學處理用SPSS 15.0進行統計分析。計量資料呈正態分布，用±s表示。多組間指標差異性比較用單因素方差分析（組間方差齊），組內各組與HCC組的多重比較用Dunnett-t檢驗。GP73和AFP診斷HCC的診斷試驗用ROC分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 一般情況HCC組、慢乙肝組、其他腫瘤組和健康對照組的年齡和性別差異無統計學意義（表1）。

表1 各組一般情況Table 1 Basic characteristics of each group

2.2 各組血清GP73和AFP水平比較各組GP73和AFP水平檢測結果見表2。HCC組GP73和AFP水平明顯高于慢乙肝組、其他腫瘤組及健康對照組（P＜0.01）。

表2 各組GP73和AFP水平比較（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of GP73 and AFP levels among the groups（±s,ng/m l）

表2 各組GP73和AFP水平比較（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of GP73 and AFP levels among the groups（±s,ng/m l）

注：#.與HCC組GP73水平與其他3組比較，P＜0.01；$.與HCC組比較，P＜0.01

項目HCC組慢乙肝組其他腫瘤組健康對照組F值P值n 65 105 49 178 GP73 231.2±92.3 75.3±11.2#67.9±21.5#32.7±13.7#103.112 0.001 AFP 152.7±126.4 45.8±1.4$18.3±0.6$2.8±0.7$97.342 0.005

2.3 ROC分析以病理結果為“金標準”，以1-特異度為橫坐標，以靈敏度為縱坐標繪制ROC曲線。GP73在81.08 ng/ml處獲得最大約登指數，此時GP73診斷HCC的靈敏度和特異度分別為86.2%和87.8%，線下面積為0.922。AFP在20.00 ng/ml處獲得最大約登指數，此時診斷HCC的靈敏度和特異度分別為61.5%和89.0%，線下面積為0.801（線下面積比較χ2=4.841，P＜0.05）。見圖1、表3。

圖1 GP73和AFP水平診斷HCC的ROC曲線Figure 1 ROC curves of GP73 and AFP levels for the diagnosis of HCC

表3 GP73和AFP診斷HCC情況Table 3 Authentic assessment of GP73 and AFP levels in the diagnosis of HCC

2.4 GP73聯合AFP診斷HCC HCC組中GP73陽性48例，AFP陽性35例。GP73和AFP聯合檢測靈敏度提高到92.3%，而特異性保持在較高的水平，為83.1%（表4）。

表4 GP73單獨及聯合AFP診斷HCC情況Table 4 Com parison of GP73 level alone and in combination w ith AFP level in the diagnosis of HCC

3 討論

HCC是我國常見的惡性腫瘤，年病死率約20.37/10萬，居惡性腫瘤死亡率的第2位，是亟待解決的公共衛生難題[5]。AFP是目前全球應用最為廣泛的HCC標志物，具有較高的特異度和靈敏度[6-8]。但近年來發現，部分HCC患者雖有較典型的臨床表現和影像學資料，但AFP水平卻低于診斷標準，提示以AFP水平輔助診斷HCC仍有一定局限性。GP73是定位于高爾基體的一種Ⅱ型跨膜蛋白，主要由膽管上皮細胞表達[9]，在肝細胞表達很少甚至不表達。

本研究提示HCC組血清GP73水平為（231.2± 92.3）ng/ml，較慢乙肝組、其他腫瘤組和健康對照組均明顯升高，進一步分析30例AFP陰性患者，發現有18例（60%）GP73呈陽性，提示GP73用于HCC診斷具有較好的靈敏度和特異度，有助于AFP陰性HCC的診斷，與Br?ker等[10]報道類似。

約登指數亦稱正確指數，是評價診斷性試驗研究真實性的有效方法[11]，其數值越大，檢測試驗真實性越高。本研究發現GP73用于HCC診斷的約登指數為0.740，其線下面積大于AFP線下面積，差異有統計學意義，提示GP73診斷HCC的效能優于AFP。針對AFP＜20.00 ng/ml的患者，采用GP73診斷，其約登指數亦可達0.505，其線下面積亦大于AFP線下面積，差異有統計學意義，提示GP73用于HCC診斷的約登指數較高，診斷的真實性好[12]。

AFP是目前臨床應用最廣的輔助診斷HCC的傳統方法，本研究對入選標本檢測發現其靈敏度和特異度分別為53.8%和84.6%，仍有一定局限性。GP73是近年來用于HCC診斷的新方法，本組同份標本采用GP73檢測，結果顯示靈敏度和特異度分別為73.8%和88.6%，雖然較AFP檢測有一定提高，但仍有部分患者低于檢測水平，提示單純以GP73檢測亦有一定局限性。采用GP73聯合AFP檢測，靈敏度和特異度分別達92.3%和83.1%，均明顯優于上述單一檢測方法，提示GP73聯合AFP檢測可進一步提高HCC診斷的靈敏度和特異度，此結果與之前報道類似[13-15]。

綜上所述，GP73是診斷HCC的一種新型血清學指標，具有良好的靈敏度和特異度，檢測結果真實性高，是輔助診斷HCC的有效方法。GP73聯合AFP檢測可進一步提高HCC診斷的靈敏度和特異度[16]，有效克服因單一實驗室診斷所致的局限性，具有良好的臨床應用價值。

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（2014-08-05收稿 2014-09-05修回）

（責任編委 王永怡 本文編輯 陳玉琪）

Diagnostic value of Golgi protein 73 alone and in combination w ith alpha fetoprotein in hepatocellular carcinoma

ZHANG Jin-yin,HUWan-fa,WANG Jian,WEIHong-shan*
Department of Laboratory,Chaoyang Hospital of Huainan,Huainan,Anhui232001,China
*Corresponding author,E-mail:drliver@163.com

Objective To investigate the value of serum Golgiprotein 73(GP73)alone and in combination with alpha fetoprotein(AFP)in detecting hepatocellular carcinoma(HCC).Methods The levels of GP73 and AFP in the peripheral blood of patients with HCC,hepatitis,other tumors without HCC and controls were detected by ELISA and electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA),respectively.Results The average level of GP73 in HCC patients was 231.2±92.3 ng/ml,markedly higher than the levels of hepatitis group,non-HCC tumor group and the control group,respectively,and the differences between the levelswere significant (P＜0.005).Themaximal Youden’s index was obtained when GP73 was 81.08 ng/m l,and the corresponding sensitivity and specificity of GP73 level in the diagnosis of HCC were 86.2%and 87.8%,higher than those of AFP level.The combined detection of GP73 and AFP levels in the diagnosis of HCC made the sensitivity further increase to 92.3%.Conclusions GP73,as a novel serum marker,has a higher sensitivity and specificity in the diagnosis of HCC,and is superior to AFP.Combined detection of GP73 and AFP can further improve the sensitivity in the diagnosis of HCC.

liver neoplasms;Golgiapparatus;enzyme-linked immunosorbent assay;alpha-fetoprotein

R735.7；R329.24

A

1007-8134(2014)05-0296-03

232001，淮南朝陽醫院檢驗科（張進銀）；232001，淮南東方腫瘤醫院檢驗科（胡萬發）；232001淮南，安徽理工大學病源微生物教研組（王健）；100011，首都醫科大學淮南附屬北京地壇醫院傳染病研究所（魏紅山）

魏紅山，E-mail:drliver@163.com