加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠免疫功能、血液流變學的影響

李 遜

(遵義醫學院第一附屬醫院中醫科，貴州 遵義 563003)

中醫認為，慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease，COPD)的發生由慢性咳嗽、喘發展而來，COPD患者多體弱年邁、肺脾腎虛、痰瘀阻肺、氣道壅塞[1～3]。加減補肺湯是在補肺湯基礎上進行增減，針對肺脾腎三臟，通過補益肺脾腎、祛瘀滌痰治療COPD，具有安全性高和療效可靠的優點。為進一步探討加減補肺湯對COPD的作用機制，我們觀察其對COPD肺氣虛證大鼠的免疫功能和血流變的影響，現將結果匯報如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康清潔級Wistar大鼠100只，體質量(250±20) g，雌雄各半，由貴陽中醫學院動物所提供(合格證號524426，飼養室溫20～25℃)。

1.2 藥物

加減補肺湯：黃芪20 g，黨參10 g，補骨脂15 g，百部10 g，桑白皮10 g，丹參15 g。制法：所有藥物加水浸泡2 h，首煎煮沸30 min，次煎20 min，兩煎合一紗布過濾，裝入燒杯置40℃的恒溫水浴箱，濃縮至含生藥2 g/mL，4℃冰箱保存。加減補肺湯由貴陽中醫學院一附院藥劑科提供，使用前加熱至常溫。桂龍咳喘寧膠囊(0.3 g/粒，批號20030221，山西桂龍藥業有限公司生產，國藥準字Z20053135)用蒸餾水制成0.09 g/mL混懸液灌胃給藥。

1.3 主要儀器和試劑

超聲霧化器，德國白瑞公司生產，自制1 m3煙室，自制透明霧化箱40 cm×40 cm×40 cm；木瓜蛋白醇(使用時采用0.9%NaCl注射液稀釋為3 g/L)，Sigma公司提供，恒溫水浴箱，低速冷凍離心機。

2 實驗步驟

2.1 模型的制備

采用《實用中醫證候動物模型學》“煙熏法肺氣虛證動物模型”方法[1]聯合木瓜蛋白酶霧化吸入法[2]制備Wistar大鼠COPD“肺氣虛證”模型：將大鼠置于特制的1 m3煙室中，用刨花、鋸末、煙葉各30～50 g點燃煙熏30 min/次，每日2次，適當通風以防大鼠窒息。造模期60 d，于造模開始后30、32、34、36 d再給大鼠木瓜蛋白酶霧化吸入，每次將5只大鼠放入與超聲波霧化器相連的透明霧化箱中，通過霧化管向箱中噴入3 g/L的木瓜蛋白酶，每次霧化量2 mL。

2.2 分組和給藥

將Wistar大鼠按體質量隨機分為5組，每組20只，雌雄各半。①正常對照組0.9%氯化鈉注射液1 mL/100 g；②模型組給藥同①組；③加減補肺湯高劑量組1 mL/100 g；④加減補肺湯組低劑量組0.5 mL/100 g；⑤桂龍咳喘寧組1.25 mL/100 g。上述5組均于停止煙熏當天開始灌胃給藥，每日1次，連續15 d。

2.3 指標檢測

灌藥結束后2 d斷頭取血取臟器，并計算臟器指數。

2.4 統計學方法

應用SPSS 11.5 統計軟件進行統計分析，計量資料采用均數±標準差(±s)表示，各組組間比較采用單因素方差分析及SNK檢驗，P<0.05 為差異有統計學意義。

3 結果

3.1 加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠臟器系數的影響

與正常對照組比較，模型組胸腺、脾臟和肝臟系數顯著降低(P<0.05)，提示模型制作成功；與模型組比較，加減補肺湯和桂龍咳喘寧可顯著增加脾臟和肝臟系數(P<0.05)，加減補肺湯高劑量組可增加胸腺系數(P<0.05)。

表1 加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠臟器系數影響

注：組間方差分析，模型組與正常對照組比較：*P<0.05，與模型組比較：#P<0.05

3.2 加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠T淋巴細胞亞群的影響

與正常對照組比較，模型組CD4+、CD8+和D4+/CD8+顯著降低(P<0.05)；與模型組比較，加減補肺湯均可增加CD4+、CD8+和D4+/CD8+(P<0.05)，桂龍咳喘寧可以增加CD4+和CD8+(P<0.05)。

3.3 加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠血液流變學的影響

表3顯示，與正常對照組比較，模型組的全血黏度、血漿黏度和紅細胞壓積顯著降低；與模型組比較，加減補肺湯和桂龍咳喘寧可顯著降低COPD“肺氣虛證”大鼠紅細胞壓積，加減補肺湯可顯著降低COPD“肺氣虛證”大鼠全血黏度，加減補肺湯高劑量可降低COPD“肺氣虛證”大鼠血漿黏度。

表2 加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠T淋巴細胞亞群的影響

注：組間方差分析，模型組與正常對照組比較：*P<0.05，與模型組比較：#P<0.05

表3 加減補肺湯對COPD“肺氣虛證”大鼠血液流變學影響

注：組間方差分析，模型組與正常對照組比較：*P<0.05，與模型組比較：#P<0.05

4 討論

補肺湯來源于《云岐子保命集》，是補益肺氣的經典方，原方由人參、黃芪、熟地黃、五味子、紫菀、桑白皮組成，具有補肺益腎、清火化痰功效。方中人參合用黃芪實衛固表，甘溫益氣，補脾益肺；熟地質潤，

滋補肝腎之陰；五味子斂肺止咳；紫菀溫化痰飲，降氣止咳；桑白皮瀉肺平喘，利水消腫。加減補肺湯是在原方基礎上，減去酸甘滋膩之熟地和五味子，以黨參替換溫燥的人參，以祛痰止咳的百部易紫菀，納入補氣生陽、益衛固表的黃芪，補腎助陽的補骨脂和活血化瘀的丹參。諸藥同用，溫腎助陽以化痰飲，攝納腎氣以平喘咳，先后天同補，共奏益氣補虛、扶正固本之功，具有減輕臨床癥狀、延緩肺動脈高壓的形成、阻止疾病進一步發展的作用[2～4]。

本課題中，COPD“肺氣虛證”大鼠出現精神不振、體毛無光澤、生長遲緩、身體消瘦、蜷縮少動，舌質瘀斑紫黯或舌苔少，捕捉時抵抗力明顯減弱，造模1 d出現明顯咳嗽，逐漸轉為慢性咳嗽，且口鼻潮濕，呼吸道分泌物增多。給予加減補肺湯后，癥狀明顯改善，大鼠體質量增加，其毛色、毛態、精神狀態、舌質瘀斑和捕捉時抵抗力等均有改善，氣喘、咳嗽癥狀不同程度減輕，口鼻分泌物減少。

胸腺是重要的中樞免疫器官，T 細胞發育成熟的場所。COPD“肺氣虛證”大鼠胸腺系數降低，提示胸腺等免疫器官受損，T淋巴細胞亞群表達降低，機體的免疫功能減弱；另外血液流變是評估機體微循環的重要指標，與正常組比較，COPD“肺氣虛證”大鼠全血黏度、血漿黏度和紅細胞壓積增高，提示COPD存在紅細胞聚集和變形異常。給予COPD“肺氣虛證”大鼠加減補肺湯后，大鼠的T淋巴細胞亞群表達增高，全血黏度、血漿黏度和紅細胞壓積降低，說明加減補肺湯具有增加COPD大鼠免疫功能、降低血黏度的作用，與處方中多種中藥的藥理密切相關。丹參具有擴張小動脈，增加毛細血管網開放數目和微循環張力，解除微血管痙攣，降低肺動脈壓，改善微循環、肺順應性及肺心病患者的肺血流圖，制約紅細胞與血小板聚集，降低血液黏稠度，改善血液流變的作用[5]；黨參具有抗氧化、抗應激、清除自由基和調節免疫功能多種作用[6]；黃芪可以明顯調節COPD 的炎癥反應，增強機體抗感染能力，促進炎癥吸收，降低外周血象，改善血液流變學和氣道阻塞作用[7]。

大量動物和臨床實驗顯示，加減補肺湯治療COPD或肺相關疾病具有多方面機制：①抑制或降

低COPD肺氣虛證的大鼠血清IL-8、TNF-α水平，減輕和提高血漿SOD活力,降低MDA含量，清除自由基及抗脂質過氧化作用，同時降低氣管肺泡灌洗液中 TNF-α、IL-8表達，保護氣道黏膜,緩解和控制氣道的慢性炎癥反應，減輕肺損傷[3,4,8]；②通過降低血清中 MDA 含量，上調 ECSOD mRNA 表達，提高肺纖維化大鼠生存狀態，改善纖維化指標[9]；③ COPD 穩定期患者服用加減補肺湯可有效改善臨床癥狀和肺部體征，延緩肺功能下降趨勢，緩解期預防復發。綜上所述，加減補肺湯治療COPD療效確切，增加機體免疫力和改善血液流變學指標，可能是其治療COPD的機理之一。

參考文獻：

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