潤肺治纖湯對實驗性肺纖維化大鼠肺微血管和心臟影響的觀察

甘卉 王忠超 李偉 宋曉環 劉詩音 朱莉 胡金秋 王嵐

潤肺治纖湯對實驗性肺纖維化大鼠肺微血管和心臟影響的觀察

甘卉 王忠超 李偉 宋曉環 劉詩音 朱莉 胡金秋 王嵐

目的 探討潤肺治纖湯對實驗性肺纖維化大鼠的治療作用。方法 24只Wistar大鼠分為正常組、模型組、治療組各8只，給藥28d后做肺系數測定和肺組織羥脯氨酸（HYP）含量檢測，肺組織蘇木精-依紅（HE）染色觀察肺微血管變化并做心臟系數分析。結果 模型組肺系數和肺組織HYP含量較對照組顯著增加（P<0.05），肺組織肺纖維化病理變化明顯，肺泡間隔厚度較對照組顯著增加（P<0.05）；治療組肺系數、HYP含量、心臟系數與模型組比較顯著降低（P<0.05），肺組織微血管減少程度輕于模型組。結論 潤肺治纖湯能夠減輕實驗性肺纖維化大鼠肺組織微血管密度的進行性減少，對心臟具有一定的保護作用。

肺纖維化；大鼠；肺微血管；心臟

肺纖維化是最常見的肺間質疾病，主要病理變化為肺泡上皮損傷和成纖維細胞增殖，纖維組織增生，使肺泡間隔明顯增厚［1］，隨著肺纖維化的加重肺微血管密度進行性減少［2］，肺呼吸功能進行性降低，目前尚無良好治療方法。潤肺治纖湯對博萊霉素所致肺纖維化大鼠肺組織SOD活性顯著升高，可使肺組織MDA含量顯著下降，對大鼠實驗性肺纖維化模型具有一定治療作用［3］。本文探討潤肺治纖湯對實驗性肺纖維化模型大鼠肺組織微血管及其對心臟的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 體質量（210±10）g Wistar大鼠 24 只，隨機分正常組、模型組、治療組各8只。動物模型復制參見文獻[4-6]，造模第2d起治療組每天4ml藥物灌胃，正常組、模型組每天等量生理鹽水灌胃。

1.2 藥物 潤肺治纖湯：由麥門冬、丹參、銀杏葉、黃芪等中藥組成；各組中草藥煎液、濃縮為每毫升相當于原生藥材1g的藥液儲存冰箱備用［7］。

1.3 動物處死與指標檢測 造摸后28d處死動物，心肺完整取出并分離，分別稱重計算心臟系數、肺系數；右心室重量分析:取出心臟,剪離右心室（RV）和左心室（LV）加室間隔（S）,用分析天平分別稱重后,計算心系數RV/BW，右心系數RV/(LV+S)的比值，BW為動物體重［8］。左肺用多聚甲醛從支氣管注入后置于多聚甲醛固定，常規包埋、切片、HE染色、光鏡下觀察其肺血管病理改變。右肺組織Hyp含量檢測，方法按試劑盒說明書操作。

1.4 統計學方法 采用統計軟件SPSS進行統計分析，正態計量資料用“±s”來表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肺組織勻漿液HYP含量變化 模型復制28d后治療組肺組織HYP的含量低于同期模型組（P<0.05，見圖1）。

2.2 肺系數與心臟系數 (見圖2)

2.3 鏡下形態觀察 28d對照組大鼠肺組織結構完整清晰；模型組大鼠肺結構破壞明顯，肺泡間隔明顯增寬，肺泡間隔肺泡上皮和成纖維細胞數量增多，肺泡壁毛細血管幾乎見不到；治療組大鼠肺結構較為完整，肺泡間隔增厚明顯減輕，肺纖維化病理變化較模型組明顯減輕，肺泡間隔增厚較模型組明顯減輕，可見肺泡壁毛細血管（見圖3）。

圖1 各組大鼠肺組織HYP含量的比較

圖2 各組大鼠肺系數與心臟系數比較

3 討論

肺纖維化是一種漸進性的嚴重危害人類健康的疾病，是慢性非腫瘤疾病中預后較差的一種疾病，目前在歐洲和美國對肺纖維化還沒有被認可的治療藥物[9]。本實驗采用羥脯氨酸含量測定法評估肺纖維化程度，給藥28d后模型組大鼠肺系數、HYP顯著地高于正常組，表明肺纖維化動物模型復制成功［1］。博萊霉素引發大鼠肺組織炎癥，受損組織修復的過程中，微血管增生是肺損傷早期的主要病理變化。在7～14d期間，與正常組比較，模型組大鼠肺血管生成活躍，血管的生成隨時間進一步增加，14d后膠原纖維沉積隨時間推移逐漸增多而肺血管數量逐漸減少，給藥28d肺微血管少見，肺纖維化肺間質微血管數量的顯著減少［2］。因潤肺治纖湯中諸藥相伍有潤肺、抗炎、提高免疫力、改善肺纖維化的作用，能非常顯著地提高肺組織SOD的活力［3］，改善氧化與抗氧化平衡，可抑制或減輕脂質過氧化作用，從而保護組織細胞免受損傷。給藥28d后治療組大鼠肺系數、HYP顯著低于模型組，病理組織學顯示治療組大鼠肺結構較為完整，肺泡間隔較模型組顯著減小，說明肺膠原纖維沉積較模型組明顯減輕肺泡間隔核數量較模型組顯著減小，說明肺泡壁成纖維細胞和肺泡上皮增殖明顯減輕。治療組心臟系數特別是右心系數顯著低于模型組，可能機制為肺血管阻力增加不明顯，右心負擔增大不明顯。綜上提示：潤肺治纖湯對博萊霉素致肺纖維化大鼠可改善肺微循環，減輕肺循環阻力，從而減輕右心臟負擔的作用。

圖3 各組大鼠肺組織病理變化比較

[1] 金曉光，代華平，龐寶森，等.博萊霉素致大鼠肺纖維化模型肺組織的動態病理變化及其發生機制[J].中國病理生理雜志，2009,25(4):708-714.

[2] 何彥俠，辛建保.實驗性肺纖維化形成過程中肺組織血管生成的動態變化[J].中國組織化學與細胞化學雜志，2005,14(1):89-93.

[3] 甘卉,劉大程,王嵐,等.潤肺治纖湯對實驗性肺纖維化模型大鼠治療作用的研究[J].中國老年學雜志,2007,27(6):521-523.

[4] 王興盛，崔社懷，楊雪梅,等.肺組織血管生成變化與肺纖維化關系探討[J].中國呼吸與危重監護雜志,2007,6(5):378-380.

[5] 謝莉，何振華，譚小武.匹伐他汀抑制實驗性肺纖維化大鼠MMP-9和TIMP-1表達[J].當代醫學,2011,17(26):6-7.

[6] 穆茂,程德云,聶莉阿，等.魏酸鈉對博來霉素肺纖維化大鼠肺組織TGFβRⅡmRNA表達的影響[J].當代醫學,2010,16（27）:81-82.

[7] 柯雪帆，趙章忠，張玉萍,等.《傷寒論》和《金貴要略中的藥物劑量問題》[J].中國中藥雜志，1983，8(12):36-44.

[8] 盧傳義，王迪潯.不同食用油對大鼠肺血管反應性和慢性低氧性肺動脈高壓的影響[J].中國病理生理雜志，1992,8(3):234-237.

[9] 趙玉珂,趙銘山.秦靜吡非尼酮對特發性肺纖維化治療的研究進展[J].當代醫學,2013,19(9):12-13.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.10.008

吉林省教育廳“十二五”科研項目［2012］第417號

吉林 130031 長春醫學高等專科學校 （甘卉 王忠超 李偉宋曉環 劉詩音 朱莉 胡金秋 王嵐）