鄧常春
臨床細菌感染是細菌與機體相互作用的一種主要形式,人體的免疫力是針對細菌致病力主要的抑制和抵抗因素,但有時也是機體組織損傷的原因之一。致病菌入侵機體后,主要會發生兩種的反應,一種是在機體建立感染,另一種是激發宿主的免疫系統迅速的發生一系列免疫反應以對抗感染,在這個過程中,淋巴細胞是產生免疫應答的主要功能細胞,它在抵抗細菌感染中發揮了重要作用。從很大程度上來說,淋巴細胞的數量越多,機體的免疫功能就越強,因此淋巴細胞及其亞群的測定能夠作為反映機體免疫功能狀態的一個重要指標,為臨床診斷和治療提供一定的依據。為了對不同細菌種屬感染患者機體內免疫功能的變化進行分析和探討,本研究選擇60 例細菌感染患者,回顧性分析其外周血的淋巴細胞亞群的測定情況,并通過分析找出不同細菌種屬感染患者血液中淋巴細胞亞群的變化規律,以期為臨床細菌感染的治療提供可靠的參考和依據,現將具體臨床研究報道如下。
1.1 一般資料 隨機選取2012年8月~2013年3月在韶關市第一人民醫院進行治療的60 例細菌感染患者作為感染組,所有患者經檢查均符合世界衛生組織WHO 診斷標準,確診為病原菌感染者,其中男45 例,女15 例,年齡15~60 歲,平均年齡(38±21)歲。本組患者均為常見病毒感染,患者除感染外沒有其它會對機體免疫功能產生影響的疾病,且患者的免疫學及基因診斷資料和淋巴細胞亞群檢測資料都齊全。選擇同期在本院進行體檢的健康者400 例作為對照組,其中男296 例,女104 例,年齡14~61 歲,平均年齡(42±22)歲。2 組研究者在性別、年齡、體質量等方面比較差異無統計學意義,具有可比性。
1.2 主要儀器和試劑 本次研究的儀器采用由法國梅里埃提供的細菌鑒定/藥敏分析儀V 1TE K 2.Com pact,并選擇由美國貝克曼庫爾特有限公司提供的流式細胞儀。試劑選擇由法國梅里埃公司提供的革蘭陰性菌鑒定卡GN 和革蘭陽性菌鑒定卡GP,由中山大學達安基因股份有限公司提供的各類病毒DNA及RNA 測定試劑盒,還有由美國BECK-MAN-COULTER公司提供的同型對照抗體IgG 1-FITC/IgG 1-PE/IgG-PC 5,測定抗體CD 3-PC 5/CD 16/56-FITC、CD 3-FITC/CD 19-PE 還有CD 3-PC 5/CD 4-FITC/CD 8-PE,以及標本預處理試劑和Flow-Count 標準熒光微球等。
1.3 實驗方法 在晨起后空腹對所有細菌感染患者抽取2 mL 靜脈血液置于EDTA.K2 提前抗凝的試管中,然后采用美國貝克曼庫爾特流式細胞儀對其進行ED-TA-K2抗凝,以參考文獻[2-3]中的具體檢測方法為參照進行操作。
1.4 統計學方法 采用SPSS 15.0 統計軟件對統計所得的具體數據進行分析,所有正態計量資料用均t 檢驗,所有正態計量資料用“±s”表示,計數資料比較采用χ2檢驗,P<0.05 為差異有統計學意義。
2.1 2 組研究對象淋巴細胞亞群檢測結果比較分析 對2組研究對象感染組淋巴細胞亞群檢測結果進行比較,由表中數據可知,感染組患者的T 4 細胞、T 8 細胞均明顯高于對照組,且2組相比差異具有顯著性(P<0.01);而其T 4/T 8 值、DN-T 細胞數值也明顯高于對照組,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);2 組研究對象的總T 細胞、DP-T 細胞、B 細胞還有NK 細胞進行比較差異無統計學意義(見表1)。
2.2 不同細菌種屬感染患者淋巴細胞亞群檢測結果 感染組患者淋巴細胞亞群檢測結果見表2,由表中數據可知,本組30 例細菌感染患者中,葡萄球菌感染患者有10 例,鏈球菌感染患者有8 例,與對照組相比,感染組患者各淋巴細胞亞群間比較差異均無統計學意義;銅綠假單胞菌感染患者有6 例,與對照組相比,感染組患者的T 8 細胞、B 細胞水平較高,而T 4 細胞、T 4/T 8 值、NK 細胞數值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);不動桿菌感染患者有4 例,與對照組相比,感染組患者的T 8 細胞水平較高,T 4 細胞、T 4/T 8 值、NK 細胞數值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);克雷伯菌感染患者有12 例,腸桿菌感染患者有8 例,與對照組相比,感染組患者的T 8 細胞水平較高,T 4 細胞、T 4/T 8 值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);結核桿菌感染患者有12 例,與對照組相比,感染組患者的NK 細胞水平較高,T 4 細胞、T 4/T 8 值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05)。

表1 淋巴細胞亞群檢測結果

表2 不同細菌種屬感染患者淋巴細胞亞群檢測結果
在機體免疫功能系統中,淋巴細胞是最重要的一個細胞群,當人的身體狀況處于正常水平的情況下,各種淋巴細胞亞群的數量和比例都會保持一定,并通過相互之間的作用進行調節和平衡,進而使機體能夠維持正常的免疫功能。而如果機體的淋巴細胞亞群的數量或功能出現異常的改變的時候,機體的免疫功能就會受到影響,進而出現一系列的病理變化,在這種情況下就為細菌以及病毒等病原物質入侵機體創造了機會。
在本組研究中,60 例S 細菌感染患者中其中感染菌種最多的是克雷伯菌和結核桿菌,其次為葡萄球菌、腸桿菌。且患者的機體免疫功能在不同細菌種屬感染下有著不同的反應表現。由表1我們可以看出,感染組T 4 細胞低于對照組,而T 8 細胞卻高于對照組,T 8 細胞是Tc 細胞介導反應的效應細胞,它能夠同時抑制B 細胞產生抗體以及Th 細胞產生IL-2,其數量的增多表示機體的免疫受到了抑制;另外,T 4/T 8 的比值所表示的是Th與Ts 之間功能的平衡狀態,感染組與對照組相比有所下降,這又為機體免疫功能下降提供了一個依據,說明細菌感染會引起患者自身免疫功能的降低,影響患者的抵抗力。
DN-T 細胞和DP-T 細胞這兩種細胞的作用就是對細菌感染后T 細胞分化發育及其細胞的功能狀態進行體現和反映,在本組研究中,與對照組相比,不動桿菌感染者的DN-T 細胞和DP-T 細胞有所降低,提示感染組的T 細胞分化發育受到抑制,細胞功能障礙;另外,NK 細胞降低提示感染者非特異性免疫功能也有所降低。B 細胞不僅參與抗原提成和分泌細胞因子凋節免疫,同時還可以通過產生抗體作為體液免疫的介導,這有利于機體對胞外細菌感染的抵抗作用。在本組研究中,從表1 可以看出,感染組與對照組的B 細胞數相比無統計學意義,此現象可能與感染細菌種屬較多有關;而在表2 中,我們可以看出,銅綠假單胞菌感染的患者其B 細胞明顯高于對照組,且差異具有統計學意義(P<0.05),這說明感染銅綠假單胞菌的患者在受到細菌侵染后,機體內部體液免疫的功能有所增強。
NK 細胞屬于固有免疫細胞,是抗腫瘤免疫的第一道防線,不需要抗原預先致敏就可以直接殺傷腫瘤細胞、病毒及寄生菌感染的靶細胞,并且還可以通過分泌IFN-γ 和TNF-α 等細胞因子促進機體的免疫調節作用,對于機體保持正常也起到了關鍵作用[5]。從表1 中我們可以看出,感染組患者NK 細胞水平與對照組相比無顯著差異,這可能是因為本組患者均未發生病毒感染。劉艷華等[6]通過研究指出結核桿菌感染患者的NK 細胞水平會發生升高,這剛好與本次研究結果一致。究其原因,可能是因為結核桿菌屬于胞內寄生菌,主要寄生在細胞的內部,因此會促使非特異性免疫相對提高,而體液免疫和細胞免疫都有所下降[7]。另外,通過研究我們還發現,機體在遭受大部分細菌的感染之后其免疫功能都或多或少的受到抑制,但是鏈球菌感染者和葡萄球菌感染者的各淋巴細胞亞群并沒有受到很明顯的影響,2 組比較差異無統計學意義,這可能是因為本次研究樣本例數較少,建議選擇更多的樣本例數進入深入研究。
淋巴細胞是免疫功能細胞,在抗感染尤其是細菌感染中發揮了非常重要的作用。當機體處于正常狀態時,體內的淋巴細胞亞群保持著一定的數量和比例,使機體的免疫功能得到平衡和穩定。但是在外源性病原微生物的侵襲下,機體的免疫平衡被打破,致使體內的各淋巴細胞亞群在數量和比例上出現異常,這就為臨床提供了可靠的治療依據。
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