BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞的質量評價

盧少芬 陳志忠 李結敏 陳馥如 何玉冰 林雪梅 皮 燕

廣東省肇慶市中心血站，廣東肇慶 526020

BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞的質量評價

盧少芬 陳志忠 李結敏 陳馥如 何玉冰 林雪梅 皮 燕

廣東省肇慶市中心血站，廣東肇慶 526020

目的評價BBS 926全自動醫用低速離心機制備的冰凍解凍去甘油紅細胞的質量。 方法BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞完成后，立即留取樣本，檢測其血紅蛋白含量、游離血紅蛋白含量、白細胞殘留量、甘油殘留量等質量監測指標。 結果血紅蛋白含量為（23±5）g/L、游離血紅蛋白含量為（0.43±0.25）g/L、白細胞殘留量為（0.6±0.3）×107個、甘油殘留量為（3.6±2.5）g/L、細菌培養試驗陰性。 結論 BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞各項檢測指標均達到國家質量標準，能有效地保障臨床輸血安全。

BBS 926；制備；冰凍解凍去甘油紅細胞；質量評價

隨著臨床成分輸血的開展，臨床用血對Rh（D）陰性血的需求量日益增加，如何保障Rh（D）陰性血型系統患者醫療急救用血是一個十分迫切的問題［1］，特別是事故搶救和產婦大出血，短時間內需求的血量較多［2］，臨時招募獻血者很難做到，稀有血型急診患者的生命因此受到威脅，另一方面，血站街頭、獻血屋采集的Rh（D）陰性血液往往因采集后保存期有限，臨床無需求而造成浪費［3］，越來越多的血站通過甘油化冷凍保存技術保存稀有血型冰凍紅細胞［4］。目前國內多采用手工方法制備和ACP 215型細胞處理儀制備冰凍解凍去甘油紅細胞，但是手工方法復雜，時間長，這與人員操作手法及經驗有很大關系。本站于2012年底購置了一臺由四川南格爾生物醫學股份有限公司制造的BBS 926全自動醫用低速離心機，用于制備冰凍解凍去甘油紅細胞，到目前為止，使用該機器制備冰凍解凍去甘油紅細胞共28 U，并應用于臨床輸注，無一例出現輸血反應，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

9%氯化鈉溶液：北京博德桑特輸采血器材科技開發中心；0.9%氯化鈉溶液500 ml：四川南格爾生物醫學股份有限公司；0.9%氯化鈉溶液1000 ml：四川南格爾生物醫學股份有限公司；250 ml×3洗滌多聯血袋：費森尤斯卡比（廣州）醫療用品有限公司；一次性使用單采血漿分離器P-1000B：四川南格爾生物醫學股份有限公司。

1.2 設備

BBS 926全自動醫用低速離心機：四川南格爾生物醫學股份有限公司；離心機：日立CR7；無菌接駁機：費森尤斯卡比（廣州）醫療用品有限公司；血漿解凍箱JXH-I：廣州市金鉉映電子科技開發有限公司。血細胞分析儀：瑞士奧菲Orphee Mythic 22；全自動細菌培養檢測系統BACTEC 9120（美國）。

1.3 方法

1.3.1 制備方法 ①將冰凍紅細胞從成品庫領出，放入已預溫39～40℃的血漿解凍箱進行解凍，解凍完通過無菌接管機與一次性塑料轉移袋連接，平衡稱重，放置于離心機內杯中以2500 r/min、4℃、離心12 min，去上清液及白膜層，待去甘油化處理；②BBS 926全自動醫用低速離心機去甘油化處理：開機、自檢、選擇去甘油化程序、安裝耗材、連接各洗滌液，然后打開所有管路夾子，連接已解凍的冰凍紅細胞血袋并將其放置于搖擺機上，預沖管路后，按確認系統進入自動洗滌階段，當洗滌流程完畢后，進行產品收集流程，卸下耗材，去甘油化完成；③去甘油化的后處理：用無菌接管機將收集的成品血袋與250 ml×3洗滌多聯血袋連接，以4℃，3500 r/min，離心9 min，離心后根據上清液的顏色、透明度等適當增減洗滌的次數，最后1次洗滌上清液無明顯溶血跡象，再滴加0.9%氯化鈉溶液至容量符合 《全血及成分血質量要求 （GB 18 469-2012）》［5］，并按要求進行留樣。

1.3.2 冰凍解凍去甘油紅細胞質量檢測方法 將冰凍解凍去甘油紅細胞留取的樣品采用血細胞分析儀檢測血紅蛋白含量、比色法檢測游離血紅蛋白、顯微鏡下計數白細胞殘留量、GPO-PAP法檢測甘油殘留量、全自動細菌培養檢測系統進行細菌培養和檢測。

2 結果

1 U×28袋冰凍解凍去甘油紅細胞各項質量檢測指標即甘油殘留量、血紅蛋白含量、游離血紅蛋白含量、白細胞殘留量、無菌試驗均達到國家標準---《全血及成分血質量要求GB 18469-2012》（表1）。

表1 2013年1月～2014年7月BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞的質量檢測結果（n=28）

3 討論

BBS 926全自動醫用低速離心機作為目前中國第一臺由南格爾自行研制的全自動、功能封閉式的紅細胞處理設備，可用于紅細胞的甘油化及去甘油化，雖然去甘油化洗滌時間與美國血液技術公司生產的ACP 215全自動細胞處理系統相比稍長，據文獻報道ACP 215全自動細胞處理系統去甘油洗滌僅需50～60 min［6］，而BBS 926全自動醫用低速離心機去甘油化洗滌時間為75～90 min（傳統手工操作則需3～4 h），技術上基本實現全自動化（除更換液體）、程序化，最大程度減少人為差錯事故的發生，保證產品質量；自動化操作降低了勞動強度，克服了手工洗滌操作步驟多、所需時間長、工作效率低、人為影響因素大等諸多問題［7］。BBS 926全自動醫用低速離心機無菌接駁血袋和耗材，整個過程均為密閉式，耗材還串聯了無菌濾器，降低了血液污染的概率，制備的產品細菌培養試驗陰性；同時配備獨創360°醫用雙軸搖擺機和連續流動洗滌系統，通過控制血液泵的快慢，實現對各種洗滌液加入的精準調節，將去甘油化程序分解成多個子程序，每個子程序的加液量和加液速度不同，保持滲透壓變化在紅細胞的承受范圍內，減少對紅細胞的影響，保證了紅細胞的回收率和較低的游離血紅蛋白含量，但其仍存在不足之處，表現在以下幾個方面：①系統程序沒有記憶功能，因某一原因需要關閉電源重新開機時，無法恢復到原來的工作程序；②最終產品的容量無法達到國家標準，需要作去甘油后處理；③雖配備獨創360°醫用雙軸搖擺機，減少對紅細胞的影響，但在血液回輸或添加洗滌液時仍需要人為地提高或平放血袋，以便于袋中的紅細胞全部回流至離心杯，減少紅細胞的損失。這些有待于南格爾公司進一步完善和改進。

從表1可以看出，BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞，其制品質量符合《全血及成分血質量要求GB 18469-2012》的要求。其制備的冰凍解凍去甘油紅細胞形態上雖有輕微改變，但不影響攜氧等功能，且由于多次洗滌，白細胞、血小板、抗凝劑、細胞外鉀、游離血紅蛋白等物質幾乎被洗去，所以輸注時患者輸血不良反應大大減少［8］。-80℃冰凍保存紅細胞具有保存時間長、保存效果好的特點，是目前最有效的紅細胞長期保存方法［9］，是稀有血型輸血以及自身輸血的重要手段。冷凍保存紅細胞既爭取了搶救時間，又極大地方便了臨床用血，近年來機器制備冰凍解凍去甘油紅細胞在我國已逐步取代手工制備，本站自2013年3月份開始正式使用BBS 926全自動醫用低速離心機制備冰凍解凍去甘油紅細胞，至今共制備28 U，并應用于臨床輸注，無一例出現輸血反應。隨著臨床醫療水平的不斷提高，肇慶市稀有血型血液的臨床供應量也逐年增加，BBS 926全自動醫用低速離心機作為國內性價比較高的全自動洗滌機，克服了手工洗滌操作步驟多、時間長、效率低，人為因素影響大等問題［10］，在一定程度上緩解了臨床稀有血型急診患者的應急供血，為患者贏得了搶救時間，也為臨床提供了更符合國家質量標準的血液產品，更有效地保障了臨床輸血安全，機器制備是有效保證血液質量的前提［11］。

［1］陳均.深低溫保存Rh（D）陰性血冷凍血庫的建立及其臨床應用［J］.臨床血液學雜志·輸血與檢驗版，2007，4（2）：66-68.

［2］唐秋民.稀有血型血液冷凍血庫的建立及臨床意義［J］.廣西醫學，2008，30（9）：1400-1401.

［3］羅昭玲.冰凍解凍去甘油紅細胞的制備方法及效果評價［J］.齊齊哈爾醫學院學報，2011，32（17）：2748-2750.

［4］Valeri CR，Ragno G，Pivacek LE，et al.An experiment with glycerol frozen red blood cells stored at-80 degrees C for up to 37 years［J］.Vox Sang，2000，79（3）：168-174.

［5］GB18469-2012.全血及成分血質量要求［S］.

［6］楊冬燕，段恒英，王娟娟，等.全自動細胞處理系統制備冰凍紅細胞的關鍵控制點及效果評價［J］.重慶醫學，2009，37（9）：1078-1082.

［7］邱玉霞，張靜涵，張曉芙.M115細胞系統洗滌技術的改良及應用［J］.山東醫藥，2006，46（32）：65.

［8］渾守水，游敏，高新譜，等.Rh（D）陰性冷凍紅細胞的臨床應用［J］.臨床輸血與檢驗，2002，4（1）：29.

［9］靳鵬，劉安，曹偉，等.新型冰凍紅細胞洗滌機洗滌效果的研究［J］.中國輸血雜志，2005，18（3）：212-213。

［10］李夢秋，李冬梅.冰凍紅細胞去甘油方法學評價［J］.醫藥論壇雜志，2010，31(18）：74-75.

［11］王惟.不同制備方法制備冰凍解凍去甘油紅細胞質量研究［J］.中國實用醫藥，2013，8（26）：274-275.

The quality evaluation of BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed deglycerolized red cell

LU Shao-fen CHEN Zhi-zhong LI Jie-min CHEN Fu-ru HE Yu-bing LIN Xue-meiPI Yan
Central Blood Station of Zhaoqing City in Guangdong Province,Zhaoqing 526020,China

ObjectiveTo evaluate the quality of BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed deglycerolized red cell.MethodsAfter BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed deglycerolized red cell,blood sample were collected and tested quality indicators,and the indicators included the content of hemoglobin and free hemoglobin,leukocyte residues,glycerol residues and on on.ResultsThe content of hemoglobin was (23±5)g/L,the content of free hemoglobin was (0.43±0.25)g/L,leukocyte residues were(0.6±0.3)×107,glycerol residues were(3.6±2.5)g/L,and bacterial culture test was negative.ConclusionEach index of BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed can meet the national quality standards,and it can guarantee the safety of clinical transfusion.

BBS 926;Preparation;Ice thawed deglycerolized red cell;Quality evaluation

R446.11+3

A

1674-4721（2014）10（c）-0087-03

2014-08-05本文編輯：許俊琴）

廣東省肇慶市科技計劃項目（2014E2813）

盧少芬（1981-），女，主管護師，主要從事血液成分制備和研究