偉力精子質(zhì)量檢測動態(tài)分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用

高燕紅 胡 衛(wèi) 李 娟

湖南省株洲市中心醫(yī)院檢驗科，湖南株洲 412000

偉力精子質(zhì)量檢測動態(tài)分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用

高燕紅 胡 衛(wèi) 李 娟

湖南省株洲市中心醫(yī)院檢驗科，湖南株洲 412000

目的 比較國產(chǎn)偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)（WLJY-9000）與傳統(tǒng)的人工常規(guī)檢查（按WHO標(biāo)準(zhǔn)）兩種方法檢測參數(shù)的可信度。 方法隨機(jī)選擇2011年5月～2012年2月來本院檢查的100例精液（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲）標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對兩種檢查參數(shù)如精子密度、活動率、活動力（a+b）等進(jìn)行分析比較。 結(jié)果 采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.9）；通過20×和40×兩種放大倍數(shù)的一致性測定數(shù)據(jù)顯示該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性。 結(jié)論 該檢測系統(tǒng)有較好的準(zhǔn)確性、良好的重復(fù)性和一致性，可以代替人工檢測，為臨床診斷男性不孕不育和體外受精選配優(yōu)質(zhì)精子等提供了參考依據(jù)，在檢測過程中也有效避免了一些因人工主觀判斷所產(chǎn)生的誤差，具有多種人工檢測方法不具有的功能，也為臨床和科研中精液常規(guī)分析的科學(xué)化、規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化創(chuàng)造了條件。

精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)；精子密度；精子活動率；精子活力

精液分析是一項評估男性生育能力最基本和重要的檢查方法，以往的精子計數(shù)和主觀判斷已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床需要，直觀的形態(tài)分析越來越顯示出它的重要性，在男性不育癥的臨床診斷中有非常重要的價值[1]，為臨床治療和療效觀察提供了科學(xué)依據(jù)。目前我國大多數(shù)基層醫(yī)院依然在使用手工分析方法，由于受不同檢驗操作人員的技術(shù)、經(jīng)驗和方法等影響，造成了檢測結(jié)果的差異，降低了精液報告的客觀性和可比性[2]。WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)巧妙地將現(xiàn)代先進(jìn)的計算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)運(yùn)用在精子質(zhì)量分析儀的臨床分析上，不但可對精液中的精子活力、活動率、密度和精子總數(shù)等進(jìn)行定量分析，還可對精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征進(jìn)行分析。另外，此系統(tǒng)還能向操作人員展現(xiàn)出精液中不該存在的一些病理因素，如超量的白細(xì)胞、紅細(xì)胞和活動的細(xì)菌等[3]。在臨床檢驗實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)檢測出的精子密度、活動率、活動力（a+b）和精子總數(shù)與傳統(tǒng)的人工檢測方法相比具有良好的相關(guān)性和準(zhǔn)確性，可以代替人工檢測方法，為臨床提供更科學(xué)、客觀和準(zhǔn)確的參考依據(jù)。本研究采用偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)和傳統(tǒng)的人工檢測方法對同一份精液標(biāo)本進(jìn)行檢驗，比較所得結(jié)果的相關(guān)性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年5月~2012年2月本院生殖科和男性專科門診提供的精液標(biāo)本100例（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲），捐獻(xiàn)者禁欲3～7 d后，手淫法采集，將一次射出量裝入潔凈干燥玻璃試管內(nèi)[4]，立即保溫送檢后放置于37℃水浴箱保溫30～60 min（以標(biāo)本液化為準(zhǔn)，最遲不超過60 min）。

1.2 儀器

北京偉力公司W(wǎng)LJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，Olympus顯微鏡和Makler計數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 傳統(tǒng)手工分析方法 將處理好的精液標(biāo)本由有經(jīng)驗的檢驗人員嚴(yán)格按照WHO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，用微量吸管將處理好的標(biāo)本加樣到已經(jīng)37℃預(yù)溫的Makler計數(shù)板和干凈玻片上，計算精子數(shù)、密度、活力及活動率[5]。同時記錄精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗報告。

1.3.2 質(zhì)量檢測系統(tǒng)分析方法 選擇同一精液標(biāo)本，不做稀釋處理，直接用微量吸管將定量的精液（≤5 μl）滴在清潔、預(yù)溫的計數(shù)板的精液池上，再蓋上專用蓋玻片后，置于系統(tǒng)的恒溫顯微鏡臺上，靜置約1 min[6]，待穩(wěn)定后，用專用顯微鏡進(jìn)行鏡檢，并通過顯微鏡上所連攝像頭將信息傳入精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)進(jìn)行分析。同時輸入精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗報告。

1.3.3 檢測精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)的可重復(fù)性 對同一份標(biāo)本用20倍鏡和40倍鏡在同樣條件下連續(xù)檢測3次，計算精子密度、活動率和精子活力（a+b）百分率，以確定該系統(tǒng)的重復(fù)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法主要參數(shù)的比較

采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。

表1 兩種檢測方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，±s）

表1 兩種檢測方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，±s）

與手工檢測法比較，*P＞0.05；與系統(tǒng)檢測法（40×）比較，#P＞0.05

方法 精子密度（×106/ml） 精子活動率（%） 精子活力（a+b）（%）手工檢測法系統(tǒng)檢測法（20×）系統(tǒng)檢測法（40×）25.25±13.298 25.35±13.380*#25.26±13.295*47.98±18.781 46.02±18.982*#45.93±19.033*46.09±17.268 47.02±17.652*#47.32±17.221*

2.2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析

通過統(tǒng)計結(jié)果可以看出，偉力精子檢測系統(tǒng)檢測的精子密度、活動率和活力（a+b）參數(shù)數(shù)值的變異系數(shù)都很小，且兩種放大倍數(shù)檢測系統(tǒng)的變異系數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），說明該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性（表2）。

表2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析（n=100）

3 討論

精液分析是評價男性生育功能、提供不育癥的診斷和療效觀察的依據(jù)，也是輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾病、輸精管結(jié)扎術(shù)后療效觀察的重要檢測項目，同時還為體外受精篩選優(yōu)質(zhì)精子提供參考依據(jù)[7]，準(zhǔn)確的精子計數(shù)和精子密度更能為準(zhǔn)確分析人工授精臨床妊娠率提供依據(jù)[9]。傳統(tǒng)的手工分析方法缺乏良好的客觀性，不同檢驗人員分析的結(jié)果因為主觀判斷的不同有時差異較大，對精子活力的等級判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。在檢測過程中因為沒有恒溫設(shè)施，在環(huán)境溫度低和檢測時間稍長時往往使檢測出的精子活力和活動率偏低[10]。

偉力精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)通過攝像機(jī)或錄像機(jī)與顯微鏡連接，確定和跟蹤單個精子的活動，根據(jù)設(shè)定的精子運(yùn)動的移位、精子大小和精子運(yùn)動的有關(guān)參數(shù)，對采集到的圖像進(jìn)行動態(tài)處理和分析[11]。其既可定量分析精子密度、精子活力、精子活動率，還可以分析精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征，同時還能發(fā)現(xiàn)一些其他的致病原因，為臨床診斷提供更高效、客觀和科學(xué)的服務(wù)。在進(jìn)行精液檢測分析中值得注意的是，進(jìn)行檢測用的計數(shù)板一定要提前預(yù)溫，如果未預(yù)溫將影響精子活力和活動率的測定。在電腦顯示屏上進(jìn)行抓圖時要將視野調(diào)至微暗，這有利于提高抓拍精子的準(zhǔn)確性。每次進(jìn)行圖片抓拍計數(shù)時一定要將誤抓的紅、白細(xì)胞和卵磷脂小體、原細(xì)胞等從計數(shù)的精子個數(shù)中除去，以免影響計算機(jī)最后對精子數(shù)、活動力、活動率的計數(shù)和統(tǒng)計。相信在先進(jìn)的儀器設(shè)備和人工的監(jiān)測下一定能給臨床提供一份準(zhǔn)確、可信的報告單。

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本刊醫(yī)學(xué)檢驗欄目介紹

以報道臨床醫(yī)學(xué)實(shí)驗診斷方法學(xué)為重點(diǎn)，主要報道檢驗醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的最新科研成果，實(shí)用技術(shù)的新進(jìn)展，各種檢驗的方法與試劑、儀器的性能和特點(diǎn)等內(nèi)容。稿件要求：資料準(zhǔn)確、數(shù)據(jù)真實(shí)、論據(jù)可靠、統(tǒng)計學(xué)方法正確。

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Clinical application of weili sperm quality test and dynamic analysis system

GAO Yan-hong HU WeiLI Juan
Department of Clinical Laboratory,Central Hospital of Zhuzhou City in Hunan Province,Zhuzhou 412000,China

ObjectiveTo compare the parameter credibility of weili color sperm quality test system(WLJY-9000)and traditional manual routine test(WHO standard).Methods100 sperm samples(donor age:24-45 years old)tested in our hospital from May 2011 to February 2012 were randomly selected for test.Sperm density,active sperm rate,sperm motility(a+b)and other parameters were compared.ResultsThe differences of sperm density,active sperm rate,sperm motility (a+b)tested by the two detection methods were not statistically significant(P＞0.9).Through the consistency of the data by the two kinds of magnification(20×and 40×)showed that the detection system had good repeatability and consistency.ConclusionThe detection system could replace manual test due to good accuracy,repeatability and consistency,and it provides reference for clinical diagnosis of male infertility and selection of high-quality sperm for vitro fertilization,it is also effective to prevent certain errors caused by subjective judgment,demonstrating unique functions that manual sperm analysis does not possess,it also creates the condition for scientific,regular and standard sperm routine analysis in clinical application and scientific research.

Sperm quality test system;Sperm density;Active sperm rate;Sperm motility

R446.1

A

1674-4721（2014）02（a）-0098-03

2013-10-23本文編輯：袁 成）