抗腫瘤藥卡培他濱原料藥的質量控制及穩定性考察

趙燦培

江南大學，江蘇無錫 214000

抗腫瘤藥卡培他濱原料藥的質量控制及穩定性考察

趙燦培

江南大學，江蘇無錫 214000

目的 建立抗腫瘤藥卡培他濱原料藥的質量控制方法，并考察其穩定性。 方法 采用高效液相色譜法測定卡培他濱原料藥含量和有關物質，并考察其在加速試驗和長期試驗條件下的穩定性。 結果 建立了卡培他濱原料藥的質量控制方法，包括性狀、鑒別、比旋度（+96.0°～+100.0°）、有關物質（≤1.0%）、水分（≤0.3%）、熾灼殘渣（≤0.1%）、重金屬（≤20 mg/kg）和含量測定（98.0%～102.0%），樣品檢測檢測結果在規定的限度內，并分別在加速試驗[(40±2)℃，相對濕度75%±5%]和長期試驗[（30±2）℃，相對濕度60%±5%]條件下進行了3個月的穩定性試驗，穩定性考察期內各項指標未見明顯變化。 結論 所建立的卡培他濱原料藥質量控制方法重復性好、專屬性強，結果準確可靠，穩定性檢測結果在規定的限度內，卡培他濱原料藥穩定性良好。

抗腫瘤藥；卡培他濱；質量控制；穩定性考察

卡培他濱是第一個口服氟代嘧啶氨基甲酸酯類抗腫瘤藥物，由瑞士羅氏（Roche）制藥公司開發[1]，臨床適用于多種腫瘤的治療，包括乳腺癌、結腸直腸癌、胃癌、宮頸癌以及氟尿嘧啶耐藥的腫瘤等[2]。卡培他濱具有靶向性殺傷腫瘤細胞的功效[3]，能選擇性地作用于腫瘤細胞，使藥物在腫瘤部位有更高活性[4]，增強療效的同時也減輕了不良反應，易于耐受[5]，并能顯著提高患者的生存質量，縮短平均住院時間，節約住院費用[6]。

1 材料與試劑

1.1 產品信息

產品名稱：卡培他濱。

英文名稱：Capecitabine。

中文化學名：1-（5-脫氧-β-D-呋喃核糖基）-5-氟-1，2-二氫-2-氧代-4-嘧啶氨基甲酸戊酯[7]。

英文化學名：1-（5-deoxy-β-D-ribofuranosyl）-5-fluoro-1，2-dihydro-2-oxo-4-pyrimidinecarbamate。

化學結構式：

分子式：C15H22FN3O6。

分子量：359.35。

CAS號：154361-50-9。

1.2 儀器與試藥

Shimadzu LC-10A液相色譜儀；SF-3型微量水分測定儀；WZZ-2A型自動旋光儀。卡培他濱原料藥（自制），卡培他濱對照品（美國食品藥品監督管理局，批號：G0J205，含量：99.7%）；乙腈為色譜純，其余試劑為分析純。

1.3 質量標準

1.3.1 性狀 本品為白色或類白色粉末。

1.3.2 峰形鑒別 在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間與對照品溶液主峰的保留時間一致。

1.3.3 比旋度 取樣品，加甲醇溶解并定量稀釋成每毫升中約含10 mg的溶液，按無水物計算，在20℃下，按《中華人民共和國藥典》（簡稱 “中國藥典”）（二部）2010年版相關內容依法測定[8]，比旋度應為+96.0°～+ 100.0°。

1.3.4 有關物質 按“2.8”項下方法，精密量取含量測定項下的對照溶液10 μl注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%～25%[9]。再精密量取含量測定項下的對照品溶液和供試品溶液各10 μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜至主峰保留時間的2倍，供試品溶液如顯雜質峰，各雜質峰面積之和不得大于對照溶液主峰的峰面積（1.0%）。

1.3.5 水分 取本品適量，按《中國藥典》2010年版（二部）相關內容依法測定[8]，含水分不得＞0.3%。

1.3.6 熾灼殘渣 取樣品適量，置鉑坩堝中，按《中國藥典》2010年版（二部）相關內容依法測定[8]，熾灼殘渣不得＞0.1%。

1.3.7 重金屬 取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，按《中國藥典》2010年版（二部）相關內容依法測定[8]，含重金屬不得＞20 mg/kg。

1.3.8 含量測定 按無水物計算，含C15H22FN3O6應為98.0%～102.0%。

2 方法與結果

2.1 溶液的配制

稀釋劑：乙腈∶甲醇∶水=7∶1∶12。

對照品溶液：精密稱取適量卡培他濱對照品，溶解于稀釋劑中，制成每毫升中含0.6 mg的溶液，作為對照品溶液。

對照溶液：精密量取卡培他濱對照品溶液1 ml，置于100 ml的量瓶中，加稀釋劑定容搖勻，作為對照溶液。

供試品溶液：精密稱取適量卡培他濱樣品，溶解于稀釋劑中，制成每毫升中含0.6 mg的溶液，作為供試品溶液。

2.2 色譜條件

色譜柱為Kromasil C18柱 （以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，4.6 mm×250 mm，5 μm），檢測波長為250 nm，流速為1 ml/min，柱溫為40℃，進樣量為10 μl。流動相：A為甲醇∶乙腈∶0.1%醋酸=7∶1∶12，B為甲醇∶乙腈∶0.1%醋酸=16∶1∶3；梯度洗脫：0→5 min，B在流動相中的比例 （f）保持在0%；5→20 min，f由0%上升至51%；20→30 min，f保持在 51%，30→31 min，f由51%下降至0%；31→40 min，f保持在0%。在此色譜條件下，卡培他濱的理論塔板數≥6000。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.3 含量測定

精密量取上述對照品溶液和供試品溶液10 μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積進行計算，即得含量。

2.4 標準曲線

取卡培他濱對照品約50 mg，精密稱定，置于25 ml的量瓶中，用少量稀釋劑溶解，定容搖勻，精密量取上述溶液0.5、1、2、3、4、5 ml，分別置10 ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述各溶液10 μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積值（A）對濃度（C）進行線性回歸[12]。回歸方程為A=14 542 891C＋184 919，r＝0.9999（n=6）。結果表明，在0.0992～0.992 mg/ml濃度范圍內，呈現良好的線性關系。

2.5 精密度試驗

精密稱取卡培他濱對照品適量，用稀釋劑溶解并稀釋成每毫升約含卡培他濱0.6 mg的溶液，連續進樣6次，計算主峰面積的RSD為0.2%，表明含量測定的進樣精密度良好，滿足測定要求。

2.6 重復性試驗

精密稱取卡培他濱樣品適量，用稀釋劑溶解并稀釋成每毫升約含卡培他濱0.6 mg的溶液，同法配制6份，分別測定含量，計算含量的RSD為0.1%，表明含量測定方法重復性好（表1）。

表1 重復性試驗結果（%）

2.7 穩定性試驗

取“重復性試驗”項下的供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10 h各進樣10 μl，記錄峰面積，考察樣品溶液的穩定性。計算含量的RSD為0.1%，表明供試品溶液在10 h內比較穩定（表2）。

表2 溶液穩定性試驗結果（%）

2.8 樣品檢測

三批樣品（批號分別為Batch.01、Batch.02、Batch. 03）質量控制項目（性狀、鑒別、比旋度、有關物質、水分、熾灼殘渣、重金屬和含量測定）的檢測結果見表3，提示各項指標均符合相關質量標準。

2.9 穩定性考察

2.9.1 加速穩定性試驗 取三批樣品（批號分別為Batch. 01、Batch.02、Batch.03）置于加速穩定性試驗條件下[（40±2）℃、相對濕度75%±5%]，定期于0、l、2、3個月時分別取樣并檢測，結果提示，l、2、3個月后各項檢測指標與0月數據相比均無明顯變化，表明本品在加速試驗條件下放置3個月時質量較為穩定（表4）。

表3 樣品檢測結果

表4 加速穩定性試驗結果

2.9.2 長期穩定性試驗 取三批樣品 （批號分別為Batch.01、Batch.02、Batch.03）置于長期穩定性試驗[（30±2）℃、相對濕度65%±5%]條件下，定期于0、3個月時分別取樣并檢測產品質量，結果提示，3個后月各項檢測指標與0月數據相比均無明顯變化，表明本品在長期試驗條件下放置3月后質量較為穩定（表5）。

3 討論

本次研究根據《中國藥典》2010年版（二部）對原料藥的要求，研究了卡培他濱原料藥的各項質量指標，建立了質量控制方法，包括性狀、峰形鑒別、比旋度、有關物質、水分、熾灼殘渣、重金屬和含量測定，可以很好地控制卡培他濱原料藥產品質量，樣品檢測結果均在規定的限度內，表明卡培他濱原料藥質量可控。

本次研究同時對卡培他濱原料藥的穩定性情況進行了初步考察，在加速穩定性試驗和長期穩定性試驗條件下檢測產品質量，包括外觀、比旋度、有關物質、水分、含量等，結果提示，l、2、3個月后各項檢測指標與0月數據相比均無明顯變化，表明產品穩定性良好。

采用高效液相色譜法測定卡培他濱原料藥含量和有關物質，方法簡便、準確，可作為該原料藥的質量控制方法[10-16]。并對線性試驗、精密度試驗、重復性試驗、溶液穩定性試驗進行方法驗證，表明該控制方法重復性好、專屬性強、檢測結果準確可靠，可以有效控制該產品的質量。

表5 長期穩定性試驗結果

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Quality control and stability study of anticancer drug capecitabine

ZHAO Can-pei
Jiangnan University in Jiangsu Province,Wuxi 214000,China

ObjectiveTo establish the method of the quality control of anticancer drug capecitabine and observe its stability.MethodsCapecitabine bulk drug content and related substances were determined by high performance liquid chromatography,and the stability under the condition of the accelerated test and long-term test was investigated.ResultsThe method of the quality control of capecitabine was established,which included character,identification,optical rotation(+96.0°to+100.0°),related substance(≤1.0%),water determination(≤0.3%),residue on ignition(≤0.1%),heavy metals(≤20 mg/kg)and content determination(98.0%－102.0%),the test results were all within defined margin.Meanwhile,the stability was observed in accelerated testing[(40±2)℃,RH 75%±5%]and long-term testing[(30±2)℃,RH 60%± 5%]for 3 months,no obvious changes were observed in each index of stability test.ConclusionThe established quality control method of capecitabine is recurrent and specific,the results are accurate and reliable,the test results of stability are within defined margin,capecitabine has good stability.

Anticancer drug;Capecitabine;Quality control;Stability study

R927.11

A

1674-4721（2014）04（a）-0012-04

2014-02-20本文編輯：袁 成）

趙燦培（1983-），男，碩士，工程師，主要從事化學藥物的研究