2012年度海口市人民醫院細菌耐藥性監測

吳多榮，姚敏，黃會，韓小勝，張冬霞，周望

(海口市人民醫院中南大學湘雅醫學院附屬海口醫院檢驗科，海南 海口 570208）

·論著·

2012年度海口市人民醫院細菌耐藥性監測

吳多榮，姚敏，黃會，韓小勝，張冬霞，周望

(海口市人民醫院中南大學湘雅醫學院附屬海口醫院檢驗科，海南 海口 570208）

目的分析海口市人民醫院2012年臨床分離細菌對抗菌藥物的耐藥趨勢。方法用VITEK 2 compact鑒定儀對細菌進行鑒定，采用紙片擴散法（K-B法）、儀器法和E-test法對2012年度臨床分離菌株分別進行藥敏試驗，結果按CLSI 2012年版標準判讀，用WHONET5.6軟件進行耐藥性分析。結果2012年共收集非重復臨床分離菌株3746株，其中革蘭氏陰性菌占78.8%(2950/4746)，革蘭氏陽性菌占21.2%(796/3746)。MRSA和MRCNS檢出率分別為35.4%和69.9%，未發現對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌和腸球菌。肺炎鏈球菌中青霉素耐藥株(PRSP)為26.7%。β溶血鏈球菌對萬古霉素、青霉素、氨芐西林和頭孢吡肟均高度敏感。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs陽性率分別為59.0%和35.8%，發現對亞胺培南和美羅培南耐藥的大腸埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為17.6%和14.5%。鮑曼不動桿菌對11種抗生素的耐藥率均在30%以下。左氧氟沙星和復方新諾明對嗜麥芽窄食單胞菌有較好的抗菌活性(耐藥率< 10%)。結論2012年該院分離的細菌主要以革蘭氏陰性桿菌為主，臨床分離細菌對常用抗菌藥物呈不同程度的耐藥，未檢出對萬古霉素耐藥的腸球菌和葡萄球菌，腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物呈較低水平耐藥狀態，應繼續做好對該類藥物的保護。

細菌；耐藥性監測；藥敏試驗

2012 年是國家開展抗菌藥物專項整治活動的第二年，經過一年的管控，抗菌藥物的應用逐漸規范。由于我國細菌耐藥形勢較為嚴峻，因此各地區和單位及時準確地做好本單位的細菌耐藥監測和報告工作，對于指導臨床合理使用抗菌藥物具有重要意義。現將海口市人民醫院2012年細菌耐藥性監測結果回顧分析如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源收集海南省海口市人民醫院2012年1月1日至2012年12月31日臨床分離株，剔除同一患者相同部位的重復菌株。所有菌株嚴格按照臨床操作規程進行鑒定。

1.1.2 培養基和藥敏紙片培養基購自廣州市迪景微生物科技有限公司，肺炎鏈球菌藥敏試驗卡為法國生物梅里埃產品，萬古霉素E紙片和所有抗菌藥物紙片均為英國OXOID公司產品，具體品種見結果表中所列。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗按照CLSI推薦的紙片擴散法測定菌株對抗菌藥物敏感性[1]；葡萄球菌對萬古霉素的敏感性用E試驗條測試；肺炎鏈球菌藥敏試驗采用梅里埃VITEK 2 compact儀器法檢測。質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212、肺炎鏈球菌ATCC49619、流感嗜血桿菌ATCC49247。

1.2.2 ESBLs檢測參照CLSI2012[1]推薦的篩選試驗和確證試驗進行。

1.2.3 MRS檢測用頭孢西丁測定苯唑西林耐藥性,MSSA、MRSA和MSCNS、MRCNS判定標準依據頭孢西丁的折點分別為S≥22 mm、R≤21 mm和S≥25 mm、R≤24 mm。

1.2.4 統計學方法采用世界衛生組織(WHO)提供的WHONET 5.6軟件進行耐藥性統計分析，耐藥率比較應用SPSS11.0軟件進行χ2檢驗統計分析，P<0.05或者P<0.01為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各類細菌的分離情況及其在標本中的分布2012年共分離非重復臨床株3 746株，其中革蘭氏陰性菌2 950株(78.8%)，革蘭氏陽性菌796株(21.2%)。分離自痰液標本1 558株(占41.6%)，尿液標本751株(占20.0%)，血液標本420株(占11.2%)，傷口及膿液標本376株(占10.0%)，胸腹水和腦脊液標本142株(占3.8%)，膽汁標本112株(占3.0%)，其他標本386株(10.3%)。主要菌種分布見表1。

表1 2012年臨床分離菌株分布情況

2.2 革蘭氏陽性球菌對抗菌藥物的敏感性

2.2.1 葡萄球菌屬MRSA檢出率為35.4%，MRCNS檢出率為69.9%，359株葡萄球菌經萬古霉素E試驗條測試，結果顯示其MIC值均≤1 mg/L，未發現對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。葡萄球菌屬對抗菌藥物的敏感性見表2。

2.2.2 腸球菌屬屎腸球菌對常規檢測藥物的耐藥率均明顯高于糞腸球菌，未發現對萬古霉素和利奈唑胺耐藥株。腸球菌屬對抗菌藥物的敏感性見表2。

表2 葡萄球菌屬和腸球菌屬對抗菌藥物的敏感性(%)

2.2.3 鏈球菌屬共分離肺炎鏈球菌131株，95.4%(125/131)來源于痰液標本，藥敏結果顯示對青霉素的耐藥率為26.7%；未發現利奈唑胺和萬古霉素的耐藥株。β溶血性鏈球菌對青霉素仍呈高度敏感，敏感率為92.3%；對紅霉素的耐藥率較高，為78.8%；未發現對萬古霉素耐藥株。鏈球菌屬對抗菌藥物的敏感性見表3。

表3 肺炎鏈球菌、β溶血性鏈球菌和流感嗜血桿菌對抗菌藥物的敏感性(%)

2.3 革蘭氏陰性菌對抗菌藥物的敏感性

2.3.1 腸桿菌科細菌大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs陽性率分別為59.0%和35.8%。其中產ESBLs株耐藥率(亞胺培南和美羅培南除外)均顯著高于非產ESBLs株(P＜0.05)。發現對亞胺培南和美羅培南均耐藥的大腸埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。腸桿菌屬細菌對15種抗菌藥物中的10種耐藥率均在30%以下。檸檬酸桿菌屬耐藥率低于20%的藥物為頭孢派酮/舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、妥布霉素和左氧氟沙星。沙雷菌屬除對氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸和頭孢呋辛耐藥率較高外，對其余抗菌藥物的耐藥率均低于20%。腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物呈較低水平耐藥狀態，耐藥率均低于5%。腸桿菌科細菌對抗菌藥物的敏感性見表4、5。

2.3.2 不發酵糖革蘭氏陰性桿菌銅綠假單胞菌除對頭孢噻肟和復方新諾明耐藥率較高外，對所測試其他抗菌藥物的耐藥率均在30%以下，對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為17.1%和17.6%。鮑曼不動桿菌除對頭孢噻肟呈現較高的耐藥率外，對其余11種抗菌藥物的耐藥率均在30%以下，呈現較好的敏感率。左氧氟沙星和復方新諾明對嗜麥芽窄食單胞菌有較好的抗菌活性(耐藥率＜10%)。不發酵糖革蘭氏陰性桿菌對抗菌藥物的敏感性見表6。

2.3.3 嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌對復方新諾明、氨芐西林和頭孢他啶的耐藥率分別為41.5%、24.4%和2.4%，對頭孢呋辛、左氧氟沙星和阿莫西林/克拉維酸100%敏感，見表3。

表4 腸桿菌科細菌對抗菌藥物的敏感性（%）

表5 腸桿菌科細菌對抗菌藥物的敏感性（%）

表6 銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌對抗菌藥物的敏感性（%）

3 討論

近三年來，隨著抗生素專項治理工作的深入開展，臨床醫生逐漸認識到病原菌檢測對感染性疾病診斷和治療的重要性，臨床微生物培養標本的送檢及時、規范，無菌體液標本特別是血培養的送檢量明顯增加，2012年該院非重復臨床分離的3 746株菌中41.6%分離自痰液標本，比2011年的55.0%明顯降低[2]，低于其他地區的報道[3]。有11.2%分離自血液標本，比2011年的3.5%明顯增加[2]，這與該院自2012年開始血培養實行雙瓶雙套送檢有關，與中國CHINET報道相近[4]。

MRS是導致葡萄球菌多重耐藥的主要原因[5]，從結果可見該院MRSA的檢出率為35.4%，明顯低于黃紅宇等[6]報道水平，高于王華麗等[7]的報道。MRCNS的檢出率為69.9%，與中國CHINET報道相近[4]，MRS株對抗菌藥物的耐藥率明顯高于MSS株，萬古霉素對葡萄球菌的MIC值均≤1 mg/L，低于王鈺[6]報道水平，未發現對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。腸球菌對萬古霉素和利奈唑胺100%敏感，屎腸球菌對其余抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，這與其他地區報道相近[8]。對青霉素耐藥的肺炎鏈球菌(PRSP)越來越引起人們的關注，該院PRSP分離率為26.7%，明顯高于其他地區[9]，氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、利奈唑胺和萬古霉素等對它呈現較強的抗菌活性，敏感率為95.4%～100%。

從結果可見，該院腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物呈較低水平耐藥狀態，應繼續做好對該類藥物的保護。產ESBLs仍是大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物耐藥的主要機制之一，該院產ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為59.0%和35.8%，低于其他地區[10]，比2011年有所下降[2]。產ESBLs株比非產ESBLs株對抗菌藥物的耐藥率差異性具有統計學意義(P<0.05)。其他腸桿菌科細菌除對氨芐西林和阿莫西林/克拉維酸外耐藥率較高外，對其余抗菌藥物都呈現較好的敏感性。

據文獻報道，銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率都呈現較高的耐藥水平，該院監測數據顯現兩種細菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率均低于20%[4]。銅綠假單胞菌除對頭孢噻肟和復方新諾明耐藥率較高外，對其余抗菌藥物的耐藥率均低于30%，但已發現有個別全耐的銅綠假單胞菌檢出，對于全耐細菌所引起的感染治療非常困難，大劑量黏菌素或多黏菌素B是可選擇的治療方案[11]，但仍需臨床積極探索治療經驗。鮑曼不動桿菌對11種抗生素的耐藥率均在30%以下，明顯低于其他地區[3,5]。左氧氟沙星和復方新諾明仍對嗜麥芽窄食單胞菌有較好的抗菌活性(耐藥率<10%)。

總之，加強對微生物標本的檢測和細菌耐藥監測工作的重視力度，不斷提高抗菌藥物的合理使用，這將對有效保護細菌耐藥性的產生，延緩抗菌藥物的使用壽命等起著非常關鍵的作用，更好地促進我國醫療資源的健康、有序發展。

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Bacterial resistance surveillance in Haikou People’s Hospital in 2012.

WU Duo-rong,YAO Min,HUANG Hui,HAN Xiao-sheng,ZHANG Dong-xia,ZHOU Wang.Department of Clinical Laboratory,HaiKou People's Hospital,the Affiliated Hospital of Xiangya Medical School of Central South University,Haikou 570208,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the resistance of clinical isolates of bacteria in Haikou People's Hospital in 2012.MethodsBacteria were identified by VITEK 2 compact instrument,and antimicrobial susceptibility testing was carried out by Kirby-Bauer(K-B)method,instrument and E-test.Then the data was analyzed by WHONET 5.6 software according to CLSI 2012 breakpoints.ResultsOf the 3 746 clinical isolates collected in 2012,gram-negative bacilli and gram-positive bacilli accounted for 78.8%(2 950/3 746)and 21.2%(796/3746),respectively.The detection rates of the meticillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)and coagulase-negative Staphylococcus (MRCNS)were 35.4%and 69.9%.Neither vancomycin nor linezolid resistant isolate was found in Staphylococcus. The rate of penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae(PRSP)was 26.7%.Beta-hemolytic Streptococcus was found highly sensitive to vancomycin,penicillin,ampicillin and Levofloxacin.ESBLs positive rates of E.coli and K.pneumoniae accounted for 59.0%and 35.8%.Three E.coli strains and 2 K.peumoniae isolates were resistant to imipenem and meropenem.The resistance rate of Pseudomonas aeruginosa to imipenem and meropenem were 17.6%and 14.5%, respectively.The resistance rates of Acinetobacter baumannii to 11 antibiotics were all below 30%.Stenotrophomonas maltophilia was sensitive to levofloxacin medicine and Sulfamethoxazole-trmethoprim(drug-resistant rate<10%). ConclusionGram-negative bacilli are the most common isolates in our hospital in 2012.No Vancomycin-resistant isolates were detected in Enterococci and Staphylococcus.Carbopenems-resistant isolates in Enterobacteriaceae were detected in our surveillance,which should be noted.

Bacteria;Resistance surveillance;Susceptibility testing

R37

A

1003—6350（2014）07—0992—05

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.07.0384

2013-08-21)

吳多榮。E-mail：wuduorong@163.com