美洛昔康口腔崩解片中美洛昔康含量測定方法研究

丁捷飛，馮定軍，胡黎鳳，俞 偉

（寧波立華制藥有限公司，浙江 寧波 315174）

美洛昔康（meloxicam）為新型非甾體抗炎藥（NSAIDs），臨床主要用于風濕性關節炎、類風濕性關節炎等各類炎癥及疼痛的治療，止痛作用較強，同時可大幅度降低非甾體抗炎藥的胃腸和腎臟不良反應，尤其能降低腸胃穿孔、潰瘍和出血的概率[1-2]。有關美洛昔康制劑的含量測定方法已有文獻報道[3-4]，但關于美洛昔康口腔崩解片中美洛昔康的含量測定尚未見文獻報道。為此，本試驗中采用簡捷、方便的前處理方法，以反相高效液相色譜（RP-HPLC）法測定美洛昔康口腔崩解片中美洛昔康的含量，并對測定方法進行了方法學考察。現報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent HP1100型高效液相色譜儀（四元泵VWD檢測器，真空脫氣機）；梅特勒AE240型電子分析天平。甲醇（色譜純，上海陸忠化學試劑廠）；醋酸銨（分析純，宜興市化學試劑三廠）；美洛昔康對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100679-200401，供含量測定用）；美洛昔康口腔崩解片（寧波立華制藥有限公司，批號分別為 12091201，12091202，12091203，規格為每片含美洛昔康 7.5 mg）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm）；柱溫：室溫；流動相：0.1 mol/L 醋酸銨溶液 - 甲醇（50 ∶50）；流速：1.0 mL /min；檢測波長：271 nm。

2.2 溶液制備

精密稱取美洛昔康對照品10 mg，置100 mL容量瓶中，加入適量流動相，振搖使溶解，超聲助溶10 min，靜置待溶液恢復至室溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 mL，置10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，作為對照品溶液。取樣品20片，精密稱定，研細，精密稱取本品粉末適量（約含美洛昔康10 mg），置100 mL容量瓶中，加流動相適量，超聲助溶使充分溶解（約10 min），冷卻至室溫，用流動相稀釋至刻度，濾過，精密量取續濾液5 mL，置10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，作為供試品溶液。

2.3 方法學考察

系統適用性試驗：取對照品溶液及供試品溶液各20 μL，分別進樣測定。結果在較短時間內被測組分完全洗脫，理論板數為8 300，拖尾因子為1.03，對照品溶液和供試品溶液在擬訂色譜條件下均有較好的分離效果，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

專屬性試驗[5]：按處方量分別精密稱取全輔料、原料藥、試片各適量，用流動相稀釋成含主成分質量濃度為100 μg/mL的全輔料貯備液、原料藥貯備液、試片貯備液（其中全輔料、試片需濾過，取續濾液作為貯備液）。精密量取以上貯備液各5 mL，置10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，分別制得全輔料、原料藥及試片的供試品溶液。按擬訂色譜條件分別進樣測定，記錄色譜圖。結果溶劑、全輔料、原料藥、試片的雜峰個數分別為 1，3，1，3個，且美洛昔康主峰前后無其他雜質峰干擾，溶劑峰和全輔料峰也都不干擾主峰的測定。

線性關系考察：分別精密量取對照品溶液 4.0，4.5，5.0，5.5，6.0 mL，置 10 mL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度。按擬訂色譜條件，分別進樣，記錄色譜圖，以其峰面積與相對應的質量濃度作線性回歸，得回歸方程 Y＝34 321X+19 501，r＝0.999 8（n＝5）。結果表明，美洛昔康質量濃度在40～60 μg/mL范圍內與峰面積呈良好線性關系。

重復性試驗：精密稱取樣品適量（相當于含美洛昔康10 mg），依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件分別進樣測定6次。結果平均峰面積為 1 763 034，RSD ＝0.22%（n＝6），表明方法重復性較好。

穩定性試驗：精密吸取同一供試品溶液，分別于 0，1，2，4，8，24 h時進樣。結果平均峰面積為 1 764 637，1 765 144，1 763 436，1 763 224，1 764 718，1 761 098，RSD ＝0.17% （n＝6），表明供試品溶液室溫下放置24 h以內有較好的穩定性。

回收率試驗：精密稱 取 1.33倍處方量80%，100%，120%的原料藥，分別置100 mL容量瓶中，同時按處方加入適量的全輔料，依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件平行測定3次，計算回收率。結果見表1。

表1 美洛昔康回收率試驗結果（n＝9）

2.4 樣品含量測定

取對照品溶液和供試品溶液，按擬訂色譜條件進樣，按外標法以峰面積計算美洛昔康含量。結果批號為12091201，12091202，12091203 的 3 批樣品中每片含美洛昔康 7.5，7.6，7.5 mg。

3 討論

按照產品處方，分別用水配制質量濃度（按美洛昔康計）為50 μg/mL的全輔料、原料藥及試片的供試品溶液，在200～400 nm波長內進行紫外掃描。結果表明，全輔料在271 nm波長處有較大的紫外吸收，干擾主成分的分析，不能采用紫外分光光度法進行含量分析。原料藥及試片在271 nm波長處均有最大吸收，故確定本品的檢測波長為271 nm。

參考2010年版《中國藥典（二部）》美洛昔康有關物質測定方法[6-7]，精密稱取本品適量，用流動相制成質量濃度為1 g/L的供試品溶液，進樣20 μL，記錄色譜圖。結果表明，該色譜條件下美洛昔康主峰保留時間為17.90 min，保留時間太長。調整流動相比例為 0.1 mol/L 醋酸銨溶液 - 甲醇（50 ∶50），將上述供試品溶液20 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結果表明，調整比例后美洛昔康主峰保留時間為4.2 min，保留時間適宜，可以對該色譜條件進行進一步研究。

2010年版《中國藥典（二部）》采用滴定法測定美洛昔康原料藥的含量，在當前國家藥品質量標準日趨嚴格的情況下，這種分析方法將逐漸為高效液相色譜法所取代。本試驗結果可對美洛昔康原料藥及其制劑的質量標準研究起到參考作用。

參考文獻：

[1]魯統棟，張云良，程維國.非甾體抗炎新藥美洛昔康[J].中國藥業，1999，8(12)：56.

[2]Xu XC.COX-2 inhibitors in cancer treatment and prevention，a recent development[J].Anticancer Drugs，2002，13：127-137.

[3]馮新生，馮巧枝，劉富民.高效液相色譜法測定美洛昔康膠囊的含量[J].中國醫院藥學雜志，2003，23（4）：219-221.

[4]陳 雯.HPLC法測定美洛昔康分散片的含量[J].中國藥師，2009，12（6）：765-766.

[5]楊仲文，沈玲佳，劉 紅.美洛昔康中有關物質的HPLC測定[J].中國醫藥工業雜志，2003，34（11） ：575-576.

[6]楊岫巖，董 怡.非甾體類抗炎藥與環氧化酶異構體[J].中華內科雜志，1996，35(12)：834-835.

[7]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：448.