開(kāi)胃合劑的薄層色譜鑒別研究

張 芹，錢 芳

（江蘇省中醫(yī)院，江蘇 南京 210029）

開(kāi)胃合劑由佩蘭、川石斛、陳皮、石菖蒲、益智仁、黃連、甘草等組方，具有醒脾、開(kāi)胃、助食之功效，臨床用于病后、體弱、胃氣不振，表現(xiàn)為飲食無(wú)味、食欲呆滯、食量減少以致神疲乏力等癥，以及功能性消化不良的患者。為了更好地控制該制劑的質(zhì)量，筆者采用薄層色譜法對(duì)制劑中的陳皮、石菖蒲、甘草、黃連、益智仁進(jìn)行了定性鑒別。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

939型全自動(dòng)薄層制板器（重慶市南岸貝爾德儀器技術(shù)廠）；101-1A型電熱鼓風(fēng)干燥箱（南通滬通制藥機(jī)械設(shè)備廠）；HH.S型電熱恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）；WD-9413A型凝膠成像分析儀（北京市六一儀器廠）；KQ-1000E型醫(yī)用超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；BP-211D型1/10萬(wàn)電子分析天平（德國(guó)Sartorius公司）；玻璃點(diǎn)樣毛細(xì)管（華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠）。

硅膠G（青島海洋化工集團(tuán)）；橙皮苷對(duì)照品（含量測(cè)定用，批號(hào)為110721-201115），鹽酸小檗堿對(duì)照品（含量測(cè)定用，批號(hào)為110713-200208），陳皮對(duì)照藥材（批號(hào)為 120969-200507），石菖蒲對(duì)照藥材（批號(hào)為121098-201105），黃連對(duì)照藥材（批號(hào)為120913-200407），甘草對(duì)照藥材（批號(hào)為 120904-201117），益智仁對(duì)照藥材（批號(hào)為121590-201001），均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；開(kāi)胃合劑（批號(hào)為121210）及各缺樣陰性樣品（江蘇省中醫(yī)院中藥制劑實(shí)驗(yàn)室自制）；薄層色譜所用試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 陳皮的薄層色譜鑒別

取開(kāi)胃合劑50 mL，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次40 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。取缺陳皮的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。取陳皮對(duì)照藥材 0.3 g，加甲醇 10 mL，加熱回流 20min，濾過(guò)，取濾液 5 mL，濃縮至約1 mL，作為對(duì)照藥材溶液。另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含0.6 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中華人民共和國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一以0.5%氫氧化鈉溶液制備的硅膠 G薄層板上，以乙酸乙酯 -甲醇 -水（100:17:13）[1]176為展開(kāi)劑，展至約5 cm，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（20 ∶10 ∶1 ∶1）[1]176的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見(jiàn)圖1A。

圖1 薄層鑒別色譜圖

2.2 石菖蒲的薄層色譜鑒別

取開(kāi)胃合劑50 mL，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次40 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含石菖蒲的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。取石菖蒲對(duì)照藥材1 g，加水40mL，煎煮30min，濾過(guò)，取濾液，同供試品溶液制備方法制備對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法[2010年版《中華人民共和國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（2∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，放置約1 h，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見(jiàn)圖1B。

2.3 黃連的薄層色譜鑒別

取開(kāi)胃合劑50 mL，用正丁醇振搖提取3次，每次40 mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，每次10 mL，分取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含黃蓮的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。取黃連對(duì)照藥材0.25 g，加甲醇25mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為對(duì)照藥材溶液。取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中華人民共和國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述4種溶液各3μL，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以正丁醇 -冰醋酸 -水（7∶1∶2）[2]為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見(jiàn)圖1C。

2.4 甘草的薄層色譜鑒別

取開(kāi)胃合劑 50 mL，加水 45 mL，鹽酸 5 mL，加熱回流 1 h，放冷，濾過(guò)，濾液用乙醚振搖提取2次，每次40mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含甘草的陰性樣品，同法制備陰性對(duì)照品溶液。取甘草對(duì)照藥材1 g，加水45 mL，鹽酸 5 mL，加熱回流 1 h，放冷，濾過(guò)，濾液同供試品溶液制備方法制備對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法[2010年版《中華人民共和國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-甲苯 -乙酸乙酯 - 冰醋酸（10 ∶20 ∶7 ∶0.5）[3]為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見(jiàn)圖1D。

2.5 益智仁的薄層色譜鑒別

取開(kāi)胃合劑50 mL，用石油醚（30～60℃）振搖提取2次，每次40 mL，合并石油醚液，揮干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。取不含益智仁的陰性樣品，同法制備陰性供試品溶液。取益智仁對(duì)照藥材 1 g，加石油醚（30～60℃）30 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法[2010年版《中華人民共和國(guó)藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷 -乙酸乙酯（9∶1）[1]273為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性樣品無(wú)干擾，見(jiàn)圖1E。

3 討論

陳皮的薄層鑒別時(shí)，參考藥典[1]176方法進(jìn)行試驗(yàn)，在薄層色譜中陳皮的專屬性斑點(diǎn) Rf值偏小，故調(diào)整展開(kāi)距離，用文中所述展開(kāi)方法。

石菖蒲的薄層鑒別的展開(kāi)條件參考藥典[1]85方法，在薄層色譜中石菖蒲的主斑點(diǎn) Rf值偏小，當(dāng)展開(kāi)劑比例為（2∶1）時(shí)，主斑點(diǎn)Rf值適中。

黃連的薄層鑒別參考藥典[1]285方法，薄層色譜斑點(diǎn)不清晰且拖尾嚴(yán)重，后采用文獻(xiàn)[1]285方法，以正丁醇-冰醋酸-水（7∶1∶2）為展開(kāi)劑，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，得到了專屬性較強(qiáng)的定性鑒別方法。

甘草的薄層鑒別參考藥典[1]80方法，采用甘草酸銨對(duì)照品和甘草對(duì)照藥材為對(duì)照進(jìn)行鑒別研究，未能找到專屬性強(qiáng)的特征斑點(diǎn)。文中用酸水解的方法，色譜斑點(diǎn)清晰、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好。

采用薄層色譜法鑒別處方中的陳皮、石菖蒲、甘草、黃連、益智仁藥材，方法重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，陰性對(duì)照無(wú)干擾，可用于控制該制劑的質(zhì)量。

參考文獻(xiàn):

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2]李鐵強(qiáng)，劉 麗，張大勇.消渴平膠囊的薄層色譜法鑒別[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，29（3）:381-382.

[3]張先林，姚 毅，劉志輝，等.心肌顆粒薄層定性研究[J].中國(guó)藥物與臨床，2007，7（4）:311-312.