摘要:目的進一步了解EDTA-K2抗凝全血標本儲存時間對肌鈣蛋白I(cTnI)檢測的影響,比較檢測值是否有顯著差別,分析干擾,分析變異,將有助于臨床醫師正確及時診斷。方法用RAMP Reader 200分析儀及北京康思潤業配套試劑心肌肌鈣蛋白I(2型),對我院20例患者抗凝全血樣本采集后,立即送檢為第一次檢測。20min后第二次檢測,40min后第三次檢測。如此隨機選擇,初始檢測值cTnI>0.20ng/ml的樣本進行試驗。結果 立即檢測與20min檢測結果差異有顯著性P=0.011、20min檢測與40min檢測結果差異有顯著性P=0.0007。結論 20例標本因置放時間延長,其檢測數據衰減并且衰減較大,肌鈣蛋白標本要及時送檢,應在20min內完成檢測。
關鍵詞:肌鈣蛋白I;樣本處置;影響
20世紀90年代起,心臟特異生物標志物肌鈣蛋白被發現,并逐步在臨床推廣,由于其高度的心臟特異性,在方法學穩定、無實驗誤差的前提下,幾乎可100%反映心肌損傷和輔助診斷心梗和ACS,隨著技術發展,肌鈣蛋白檢測技術將越來越敏感,研究者發現越來越多導致肌鈣蛋白檢測技術被修正。1987年Cummins等,首次采用多克隆抗體放射免疫分析法來檢測cTnI,檢測時間為24~36h。后來,單克隆抗體的應用提高了檢測的準確性,化學發光技術(ECL)的應用增強了顯色效果,為了使檢測更便捷,單克隆抗體與免疫層析技術相結合,用紙條法定量或半定量床邊檢測cTnI濃度。現在臨床上常用的方法如Stratus法、AxSYM法、RxL2HM法、Opus法、Access法等都采用雙夾心酶聯免疫法檢測,靈敏度都在0.5ng/ml以下,檢測時間都不超過30min,特異性高,操作方便。而不同檢測試劑對同一樣本的測定值千差萬別,解決這一問題需要檢測和分析方法進行標準化[1]。
1資料與方法
1.1一般資料收集2013年1~10月,我院心內等科,年齡55~90歲,男性12例,女性8例,AMI及心肌損傷住院患者全血標本,接收標本后立即,檢測其cTnI>0.25ng/ml,20例。
1.2標本處理使用科華EDTA-K2真空管,采集抗凝全血樣本后立即送檢。20min后第2次檢測,40min后第3次檢測。如此隨機選擇20份初始檢測值cTnI>0.20ng/ml的樣本進行試驗。
1.3儀器與試劑用熒光免疫RAMP Reader 200分析儀及北京康思潤業配套試劑心肌肌鈣蛋白I(2型),屬高敏肌鈣蛋白I,分析靈敏度0.03ng/mL,正常考范圍0~0.16ng/mL。
2結果
用SPSS13.0軟件進行配對t檢驗,立即檢測與20min檢測結果,P=0.011,P<0.05,二者差異有顯著性、20min檢測與40min檢測結果,P=0.0007,P<0.05,差異也有顯著性。
3結論
通過本試驗發現標本放置時間不僅對肌鈣蛋白I血清標本有影響[2],對于肌鈣蛋白I全血樣本的檢測也有明顯影響,時間越長,其檢測值越低。cTnI較不穩定,易受蛋白水解酶作用,在體外可迅速降解,但其不同部分受影響的程度有差別。cTnI的中心區域(第28位和第110位氨基酸)穩定生明顯較高(可能是受TnC的保護作用),氨基端和羧基端則對蛋白水解酶作用敏感。氨基端水解后降解形成-14kDa的片段,羧基端則降解形成-18kDa的片段。高敏肌鈣蛋白I是心肌細胞損傷的高敏感性指標,同時也是急性冠狀動脈綜合癥患者的危險分層和其它一些慢性疾病患者的心肌危險性的指標,為確保給臨床提供可靠的檢驗數據[3],肌鈣蛋白I(cTnI)的檢測,應在20min內進行。
參考文獻:
[1]韓雪松,李強,叢進陽.心肌肌鈣蛋白I檢測及臨床診斷標準化進展[J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(3):197-200
[2]鄭吉平等.血液標本放置時間對心肌肌鈣蛋白I檢測結果的影響[J].實用醫技雜志,2008,27:3690-3691
[3]葛亮.陳云峰.離心時間對心肌肌鈣蛋白Ⅰ檢測結果的影響[J].檢驗醫學與臨床,2010,9:833-834.
編輯/王敏