三種頭孢類抗生素血漿樣品分析方法的應用分析

摘要：目的探討三種頭孢類抗生素的血漿樣品的分析方法。方法實驗儀器為高效液相色譜系統(tǒng)包括紫外可見光檢測器、離心機。 本次研究選取我院感染患者60例均為輕度感染，隨機將60例患者分為A、B、C三組，每組20例，三組患者在檢測前一晚18點服藥，A組患者口服500mg頭抱他美酯，B組患者口服200mg頭抱泊肟酯，C組患者口服200mg頭抱克酯。清晨抽取患者空腹狀態(tài)下的靜脈血5ml，離心后取空白血漿0.5ml，加入甲醇100ul混勻，后加入高氯酸0.5ml，靜置5min后離心10min，取上清液20ul，進樣檢測。結果三組患者血漿樣品高效液相色譜檢測結果存在差異，A組患者血漿含量為0.98±0.51ug/ml，B組患者血漿含量為0.22±0.08ug/ml，C組患者血漿含量為0.11±0.05ug/ml。三組結果間組間差異明顯具有統(tǒng)計學意義，P<0.05。結論高效液相色譜-紫外可見光檢測法測定血漿中頭孢菌素類抗生素的含量具有較好的精密度和準確性，其符合方法學的要求可推廣。

關鍵詞：頭孢類抗生素；血漿樣品；分析方法；頭抱他美酯；頭抱泊肟酯；頭抱克肪

隨著近年來頭孢菌素類抗生素在臨床中的廣泛應用，其優(yōu)點也相對顯現(xiàn)出來，抗菌作用強、毒副作用小、耐青霉素酶效果好、臨床療效高，是臨床中常用的抗感染藥物［1］。基于頭孢菌素的以往研究資料，利用高效液相色譜-紫外法對人體的血漿樣品中的頭孢他美、頭孢泊肟、頭孢克肟進行分析。

1資料和方法

1.1一般資料本次研究選取我院感染患者60例均為輕度感染，其中上呼吸道感染35例，軟組織感染10例，泌尿感染15例，其中男45例，女15例，年齡24~57歲，平均35.45歲。實驗儀器為高效液相色譜系統(tǒng)包括紫外可見光檢測器、離心機，整個實驗操作嚴格儀器說明書進行。

1.2研究方法隨機將60例患者分為A、B、C三組，每組20例，三組患者在檢測前一晚18點服藥，A組患者口服500mg頭抱他美酯，B組患者口服200mg頭抱泊肟酯，C組患者口服200mg頭抱克酯。清晨空腹抽取患者靜脈血5ml，離心后取空白血漿0.5ml，加入甲醇100ul混勻，后加入高氯酸0.5ml，靜置5min后離心10min，取上清液20ul，進樣檢測。

1.3統(tǒng)計學方法本次研究數(shù)據(jù)資料錄入統(tǒng)計分析軟件SPSS19.0進行統(tǒng)計學分析，數(shù)據(jù)采用均值與標準差表示，采用t檢驗，組間差異采用χ2檢驗，當P<0.05時組間差異顯著具有統(tǒng)計學意義。

2結果

3組患者血漿樣品高效液相色譜檢測結果存在差異，A組患者血漿含量為（0.98±0.51）μg/ml，B組患者血漿含量為（0.22±0.08）μg/ml，C組患者血漿含量為（0.11±0.05）μg/ml。三組結果間組間差異明顯具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

3討論

頭孢他美酯、頭孢泊肟酯、頭孢克肟均為第三代口服頭孢菌素類抗生素。第一個口服有效的第三代頭孢菌素是頭孢克肟，給藥劑量較小，需要檢測方法要具有較高的檢測靈敏度［2］。頭孢他美酯和頭孢泊肟酯均為前藥，藥物本身無活性，在口服后經(jīng)體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為具有生物活性的頭孢他美和頭孢泊肟，在體內(nèi)無法測得其前藥的原形要通過測定其活性代謝物從而反映原形藥物在體內(nèi)的含量及代謝過程［3］。本次研究通過高效液相色譜-紫外可見檢測器法對三種頭孢菌素類抗生素的血漿內(nèi)含量進行定量分析，具有專屬性強、檢測結果靈敏、檢測時間短等特點，常常用于血漿中頭孢類抗生素濃度的測定，并且可應用于藥物動力學研究中。

頭孢菌素在血漿濃度中的檢測方法主要采用微生物法、高效液相色譜法、液相-質(zhì)譜聯(lián)用法。液相-質(zhì)譜聯(lián)用法的靈敏度較高且檢測結果準確，但非常規(guī)實驗所用的儀器，微生物法的選擇性相對較差，靈敏度低，僅在臨床藥效學中使用［4］。高效液相色譜法具有靈敏度好，儀器普及率高等特點，前處理過程采用蛋白質(zhì)沉淀法，沉淀后得到的上清液進行上機檢測，但在上清液中會包含部分內(nèi)源性物質(zhì)會因個體差異等干擾結果，會給色譜分析頭孢菌素在血漿中含量帶來困難。

頭孢類抗生素具有一定的紫外吸收，當血漿中藥物濃度較高時，采用簡單易行的高效液相-紫外可見光檢測法可得到滿意的結果［5］。但是當藥物血漿中濃度較低時，會受到強化合物等內(nèi)源物質(zhì)的干擾，會使色譜結果出現(xiàn)一定程度的偏差。本次結果顯示，三組患者血漿樣品高效液相色譜檢測結果存在差異，A組患者血漿含量為（0.98±0.51）μg/ml，B組患者血漿含量為（0.22±0.08）μg/ml，C組患者血漿含量為（0.11±0.05）μg/ml。三種頭孢在體內(nèi)代謝的速度略有不同，頭孢美他酯在血漿中的含量高于頭孢泊肟酯和頭孢克肟，頭孢泊肟酯的血漿中含量高于頭孢克肟，說明頭孢美他酯在體內(nèi)代謝的速度相對較慢，作用時間較頭孢泊肟酯和頭孢克肟長。

綜上所述，高效液相色譜-紫外可見光檢測法測定血漿中頭孢菌素類抗生素的含量具有較好的精密度和準確性，其符合方法學的要求可推廣使用。

參考文獻：

［1］王雨萍.魯卓林.尹永強.人血漿中頭孢克肟的 LC-MS/MS 法測定及生物等效性研究[J].天津藥學，2013，25(2):1-4.

［2］楊瑞霞.色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定人體內(nèi)血漿中頭孢克肟含量[J].醫(yī)學綜述，2013，19(6):3059-3060.

［3］康艷紅，韓淑鳳，楊海英.HPLC 法測定血漿中頭孢克洛的濃度[J].黑龍江醫(yī)藥，2013，26(2):185-188.

［4］溫金華，鄒德琴，鐘海利.LC -ESI/MS 法測定血漿中頭孢他美濃度及頭孢他美酯分散片相對生物利用度的研究[J].藥物分析雜志，2013，33(1):34-38.

［5］徐大星，堯愛珉，馮芳.HPLC 法測定人血漿中頭孢克肟的濃度[J].2013，41(10):159-162.

編輯/王敏