GC—MS結(jié)合保留指數(shù)分析玉樹野生藏茴香和人工種植藏茴香揮發(fā)成分

摘要 [目的]利用氣象色譜-質(zhì)譜法對(duì)野生藏茴香和人工種植藏茴香揮發(fā)成分進(jìn)行分析。[方法]采用頂空加熱提取揮發(fā)性成分的方法，對(duì)其進(jìn)行氣象色譜-質(zhì)譜分析，并結(jié)合Kovats保留指數(shù)對(duì)其主要成分進(jìn)行定性分析。[結(jié)果]采用頂空進(jìn)樣技術(shù)，可鑒定出野生藏茴香中的19個(gè)揮發(fā)性成分，含量較高的組分為右旋萜二烯（70.32%）、右旋香芹酮（14.02%），人工種植藏茴香中的17個(gè)揮發(fā)性成分，含量較高的組分為右茴香腦（40.86%）、右旋萜二烯（16.60%）、草蒿腦（7.52%）；2種物質(zhì)的比較，有9種相同的化合物。[結(jié)論]野生藏茴香和人工種植藏茴香葉中的揮發(fā)油在成分構(gòu)成上比較相似，但在相對(duì)含量上有差異。

關(guān)鍵詞 藏茴香；頂空進(jìn)樣技術(shù)；GCMS；Kovats保留指數(shù)

中圖分類號(hào) S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）25-08556-02

Abstract [Objective] Using GCMS to analyse volatile compounds in wild caraway and the artificial planting caraway.[Method] Using headspace injection respectively，volatile componentsin caraway were analyzed by gas chromatographymass spectrometry（GCMS） combined with the Kovats retention indices（KI）.[Result]19 volatile compounds identified in Wild Caraway，the content of DLimonene （70.32%），DCarvone （14.02%） were the highest； while 17 volatile compounds identified in Artificial Planting Caraway， the content of CisAnethol （40.86%），DCarvone （16.60%） and Estragole （7.52%） were the highest among the detected compounds.Comparison of two kinds of material，compound 9 has the same species.[Conclusion]The essential oil in leaves between two kinds of caraway shows a similarity in chemical components but a high difference in relative contents.

Key Words Caraway； Headspace injection； GCMS； Kovats retention indices

藏茴香（Caraway），藏名郭鳥，為雙子葉植物藥傘形科植物葛縷子的干燥果實(shí)[1]，性溫，味微辛，入腎、胃經(jīng)[2]，常用于治療胃脘疼痛、腹脹、消化不良及疝氣等癥狀[3]。研究揮發(fā)性成分對(duì)于開發(fā)新藥、指導(dǎo)臨床指導(dǎo)用藥、闡明和深化中醫(yī)藥理論以及推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化具有重要意義。該試驗(yàn)采用頂空進(jìn)樣技術(shù)分別對(duì)野生藏茴香和人工種植藏茴香揮發(fā)成分進(jìn)行GCMS分析[4]，并結(jié)合Kovats保留指數(shù)對(duì)其主要成分進(jìn)行分析[5]，通過(guò)總揮發(fā)油含量，找出兩者間異同點(diǎn)，以期為制定藏茴香的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)的數(shù)據(jù)資料。

1 材料與方法

1.1 材料 野生藏茴香，采自青海，人工種植藏茴香由青海省藥材公司購(gòu)得，由林鵬程教授鑒定均為藏茴香。將2種藏茴香的樣品除去雜質(zhì)，陰干粉碎至中粉備用。

1.2 儀器與試劑 美國(guó)Agilent公司7890/5975C-GC/MSD氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；G1888 頂空進(jìn)樣器，色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（MSD Chemstation D.03.00.611）（美國(guó)安捷倫公司）；質(zhì)譜檢索數(shù)據(jù)庫(kù)，NIST MS search 2.0；所用試劑為分析純正構(gòu)烷烴混合對(duì)照品（C7～C30），購(gòu)自上海安譜科學(xué)儀器有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.3 頂空進(jìn)樣條件分析

取新鮮粉碎的藏茴香粉末（過(guò)40 目篩）0.5 g，稱定，平行5 份，分別置于10 ml頂空瓶中密封，置頂空進(jìn)樣器中按頂空進(jìn)樣條件進(jìn)樣。頂空進(jìn)樣條件分別為樣品瓶加熱溫度100 ℃、樣品環(huán)溫度120 ℃、傳輸線溫度140 ℃、樣品瓶加熱時(shí)間25 min、樣品環(huán)平衡時(shí)間0.05 min、進(jìn)樣時(shí)間1 min。

1.4 GCMS 分析條件

1.4.1 色譜條件。色譜柱色譜柱為HP5 彈性石英毛細(xì)管柱（30 m×250 μm，0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度250 ℃；載氣為He 氣，柱流量0.8 ml/min。用于頂空直接進(jìn)樣的程序升溫條件：初始溫度45 ℃，以1 ℃/min升至60 ℃，保持1 min，再以1 ℃/min 升至100 ℃，保持1 min；以2 ℃/min 升至130 ℃，保持0 min，以10 ℃/min升至260 ℃。

1.4.2 質(zhì)譜條件。標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜調(diào)諧；電離方式EI，電子能量70 eV；離子源溫度230 ℃，四級(jí)桿溫度150 ℃，輔助區(qū)溫度295 ℃；數(shù)據(jù)采集掃描模式為全掃描；溶劑延遲時(shí)間，揮發(fā)油分析2 min、頂空進(jìn)樣0.1 min。

1.5 保留指數(shù)KI值測(cè)定

精密移取正構(gòu)烷烴混合對(duì)照品20 μl 加入10 ml頂空瓶中，按照“1.4”項(xiàng)條件直接進(jìn)樣的升溫程序條件分析，用于頂空進(jìn)樣各組分的保留指數(shù)KI值計(jì)算；分別記錄不同條件下各正烷烴保留時(shí)間，采用線性升溫公式計(jì)算各組分的保留指數(shù)KI值，保留指數(shù)KI=100n+100（tx-tn）/（tn+1-tn），式中，tx為被分析組分流出峰的保留時(shí)間，tn和tn+1分別為被分析組分相鄰的碳原子數(shù)處于n和n+1之間的正烷烴（tn

2 結(jié)果與分析

按“1.4”項(xiàng)分析條件，對(duì)側(cè)柏葉揮發(fā)性成分進(jìn)行GCMS分析，以峰面積歸一化法計(jì)算揮發(fā)油各組分相對(duì)含量，對(duì)相對(duì)峰面積>0.01%的組分進(jìn)行鑒定。各峰質(zhì)譜圖進(jìn)行NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索，選取質(zhì)譜匹配度高的前10個(gè)可能物質(zhì)，計(jì)算其保留指數(shù)KI值，并與NIST庫(kù)保留指數(shù)KI值檢索結(jié)果相比較，以質(zhì)譜和保留指數(shù)KI值匹配度最高的化學(xué)結(jié)構(gòu)為最佳鑒定結(jié)果。結(jié)果表明（表1），野生藏茴香和人工種植的藏茴香的揮發(fā)油含有α蒎烯、檜烯、月桂烯、右旋萜二烯、β羅勒烯、萜品烯、草蒿腦、右旋香芹酮、茴香腦共9種相同的揮發(fā)性成分，但這些相同的揮發(fā)油含量卻是大多不同的，如α蒎烯野生藏茴香含量為0.31%、人工種植藏茴香為3.57%，右旋萜二烯野生藏茴香含量為70.32%、人工種植藏茴香為16.60%等。因此野生藏茴香和人工種植的藏茴香在除去相互單獨(dú)存在的不同的微量揮發(fā)性成分外，其在共有成分的含量上也是差異比較大的。采用頂空直接進(jìn)樣分析檢測(cè)到野生藏茴香有81個(gè)色譜峰，鑒定出19種化合物占其總揮發(fā)性成分的88.16%，含量較高的組分為右旋萜二烯（70.32%）、右旋香芹酮（14.02%）；采用頂空直接進(jìn)樣分析檢測(cè)到人工種植的藏茴香有26個(gè)色譜峰，鑒定出17種化合物占其總揮發(fā)性成分的76.73%，含量較高的組分為茴香腦（40.86%）、右旋萜二烯（16.60%）、草蒿腦（7.52%）。可見(jiàn)，野生藏茴香和人工種植的藏茴香的揮發(fā)油的主要組成成分的種類相近，均含有α蒎烯、檜烯、月桂烯、右旋萜二烯等，但其組成成分和含量仍然存在一定的差異。

3 小結(jié)與討論

該試驗(yàn)首次采用MS定性與Kovats保留指數(shù)相結(jié)合的方法對(duì)藏茴香的揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒別，使定性結(jié)果更加準(zhǔn)確可信。試驗(yàn)結(jié)果表明，野生藏茴香和人工種植的藏茴香的揮發(fā)油的主要組成成分的種類相近，均含有α蒎烯、檜烯、月桂烯、右旋萜二烯、β羅勒烯、萜品烯、草蒿腦、右旋香芹酮、茴香腦共9種相同的揮發(fā)性成分，但其組成成分和含量仍然存在一定的差異。而從野生藏茴香分離出來(lái)的香芹酮（葛縷酮）的含量與張存彥等對(duì)其葛縷酮含量以及譚睿等用HPLC對(duì)藏茴香油中葛縷酮的含量的測(cè)定結(jié)果[67]有一定差別，分析原因是由于藏茴香不同年生、不同時(shí)期采收和生長(zhǎng)環(huán)境不同所致。對(duì)于其共有成分α蒎烯有較強(qiáng)的抗炎、祛痰、抗真菌作用[8]，藏茴香在青海的分布較為廣泛，其含有的揮發(fā)性油較多，藏茴香油還被廣泛用作食品添加劑、調(diào)味劑和化妝品香精等[9-10]。筆者建立了GCMS結(jié)合保留指數(shù)法測(cè)定2種藏茴香中揮發(fā)油含量及成分的方法，為藏茴香中揮發(fā)油品質(zhì)評(píng)價(jià)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供了依據(jù)。

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