超聲波輔助提取塊菌多糖工藝優化

摘要 [目的]優化超聲波輔助提取塊菌多糖的工藝條件。[方法]以塊菌為原料，采用超聲波輔助提取方法，通過單因素試驗及正交試驗優化了塊菌多糖的提取工藝。[結果]試驗表明，影響超聲波輔助提取塊菌多糖的主要因素是超聲波處理時間，其次是超聲波處理功率，而超聲波處理溫度與料液比的影響相對較小。最優輔助提取方案為：料液比1∶30 g/ml，超聲波處理溫度40 ℃，超聲波處理功率100 W，超聲波處理60 min，在此條件下塊菌多糖提取率為17.86%。[結論]研究可為塊菌的進一步開發利用提供參考依據。

關鍵詞 塊菌；多糖；超聲波

中圖分類號 S646 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2014）25-08751-02

Abstract [Objective] To optimize the technique conditions for extracting truffles polysaccharide assisted by ultrasonic. [Method] With truffles as raw material， using ultrasonic assistant method， the technique for extracting truffles polysaccharide was optimized by single factor and orthogonal test. [Result] The results showed that： the ultrasound time was main factor which influenced the extraction of truffles polysaccharides， and ultrasound power was secondary factor. The ratio of material to liquid and the ultrasound temperature were relatively the minimal factors. The optimal extraction scheme was 30 ml/g material liquid ratio， ultrasound temperature 40 ℃， ultrasound power 100 W and ultrasonic treatment 60 min. In these conditions， the truffles polysaccharides yield was 17.86%. [Conclusion] The study can provide reference basis for further development and utilization of truffles.

Key words Truffles； Polysaccharide； Ultrasonic

塊菌是一種地下真菌，也俗稱“地下黑黃金”，是世界上非常珍貴的藥食菌種之一。塊菌具有很高的營養價值[1]和特殊的香味，同時還含有多種活性成分，其主要的有塊菌多糖、α雄烷醇、神經酰胺等，其中塊菌多糖具有免疫調節、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化等功能[2-4]。超聲波輔助提取多糖的方法屬于一種物理輔助提取法，其原理是利用超聲波輻射產生強烈的空化效應，因而形成了很強的壓力讓細胞壁甚至整個生物體在極短的時間破裂；輻射時產生的振動作用能加速胞內物質的釋放、擴散與溶解，因此可以在極大程度上縮短提取時間并提高目標物質的提取效率[5]。

筆者用超聲波輔助提取法，通過單因素試驗研究了超聲波處理時間、處理功率、處理溫度及料液比對提取率的影響，通過正交試驗得出最優的提取方案。

1 材料與方法

1.1 材料

供試原料為市售干燥塊菌，購自攀枝花市。主要試劑：蒽酮、硫酸、葡萄糖、無水乙醇，均為分析純，購自成都科龍試劑有限公司。

主要儀器與設備：

低速臺式大容量離心機（TDL5C型），循環水式多用真空泵（SHBⅢ型），EYELA旋轉蒸發儀（N1000型），數控超聲波清洗器（KQ5200DB型），電子恒溫水浴鍋（DZKW4型），電熱鼓風干燥箱（DHG9245A型），盛搏多功能藥材粉碎機（SB350型）。

1.2 塊菌多糖提取工藝

原料→60 ℃干燥→粉碎過60目篩→無水乙醇預處理（85 ℃，2 h）→超聲波處理→水浴浸提（90 ℃，60 min）→真空抽濾→濾液減壓濃縮→乙醇醇沉→離心（5 000 r/min，10 min）→冷凍干燥樣品→粗多糖。

1.3 多糖含量測定

準確稱取樣品2.0 g（精準到0.000 1 g），在試驗設計的條件下進行提取，得到塊菌粗多糖，稱量后計算塊菌多糖得率。采用蒽酮-硫酸法[6]測定多糖含量，用葡萄糖做標準曲線。

3 討論

目前多糖的提取方法主要有化學方法（如熱水浸提法）、物理輔助法（如超聲波提取法）及生物酶法。岳金玫發現，用超聲波輔助提取能得到更好的提取率[3]。因此該研究采用超聲波輔助提取方法對多糖進行提取，但是隨著超聲波處理時間、處理溫度、處理功率的增加，導致溶出的多糖裂解，得率降低。該試驗通過正交試驗優化了塊菌的提取工藝，并得出了最佳提取工藝參數，即料液比1∶30 g/ml，超聲波處理溫度40 ℃，超聲波功率100 W，超聲波處理60 min，此提取工藝下塊菌多糖提取率為17.86%。

參考文獻

[1] 陶愷，劉波.中國塊菌的生態和營養價值[J].山西大學學報，1990，13（3）：319-321.

[2] 湯亞杰，孔國平，朱伶俐，等.塊菌活性成分及其人工栽培研究進展[J].中草藥，2007，38（4）：629-632.

[3] 岳金玫.攀枝花塊菌多糖的提取、純化及抗氧化活性研究[D].雅安：四川農業大學，2012.

[4] 胡慧娟，李佩珍，林濤，等.塊菌多糖對小鼠腫瘤及免疫系統的影響[J].中國藥科大學學報，1994，25（5）：289-292.

[5] 鄔萬寧.超聲提取技術在現代中藥中的應用[J].中草藥，2007，38（2）：315-316.

[6] 阮鳴.蒽酮-硫酸法測定芝芪菌質中的多糖含量[J].安徽農業科學，2008，36（26）：11424-11425.

[7] 王欽德，楊堅.食品試驗設計與統計分析[M].北京：中國農業大學出版社，2003：335-337.