自動凱氏定氮法測定魷魚肝粉中蛋白質含量

【摘 要】 食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解，產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨。堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質的含量。本文使用自動定氮儀確立魷魚肝粉中蛋白質含量的測定方法。該方法與傳統(tǒng)凱氏定氮法相比，更加安全、簡便、快速。分析結果對飼料配比具有指導性意義。

【關鍵詞】 自動凱氏定氮法 魷魚肝粉 蛋白質

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2014.14.006

魷魚肝粉是新一代高效魚、蝦、蟹飼料誘食劑。它是根據國外水產養(yǎng)殖專家多年辛勤研究而得出的水產動物嗜好的氣味魷魚腥香味，并結合我國水產養(yǎng)殖各個階段的生理、生長特征研制而成的。魷魚肝粉以天然海洋魷魚內臟為原料，具有濃烈的魷魚內臟腥香味，促使魚、蝦食欲增加，提高魚、蝦、蟹的采食量，促進生長等特殊功效，是一種理想的水產飼料誘食劑。自動定氮儀主要功能包括可調節(jié)的蒸汽功率、智能冷卻水系統(tǒng)和溜出液溫度控制、試劑添加、試管排空和專利的SAfE（蒸汽平衡添加）技術，此項技術提高了混合程序的安全性，減少了蒸餾過程中酸和堿之間的劇烈反應，從而不需要進行人工的預稀釋。快速的試管排空系統(tǒng)避免手工處理蒸餾后的熱試劑。用戶被一個獨特的自動安全門完全的保護起來，在進行實驗時需要手動放入一個試管，然后安全門自動關閉后系統(tǒng)才能運行，安全門和滴液盤可以很容易地移出進行清潔。冷卻水流量可自動進行控制，如果溜出液溫度太高，溫度傳感器會自動停止系統(tǒng)，多個傳感器監(jiān)控試管在位、安全門、試劑液位、蒸汽發(fā)生器水位和是否過壓，為實驗員提供最安全的操作條件。同時，顏色滴定系統(tǒng)有無與倫比的精度，其出色的性能基于對化學反應終點顏色的精確探測。每次開機的自檢自校功能使精度能夠得到永久的保證。1 實驗部分1.1 儀器與試劑（試劑均為分析純）FOSS 8400型自動凱氏定氮儀：福斯華（北京）科貿有限公司（福斯集團全資子公司）；硝化器：福斯華（北京）科貿有限公司（福斯集團全資子公司）；電子天平（0.1mg）：梅特勒-托利多（上海）有限公司；催化劑：5水硫酸銅與硫酸鉀按質量比1：10磨碎，混勻；濃硫酸（密度1.84g/L）；鹽酸標準溶液（0.1017mol/L）：應按照GB/T601-2002中規(guī)定標定；氫氧化鈉溶液（40%）：稱取1000g氫氧化鈉，溶于2500ml水中，備用；吸收液、混合指示劑混合液：分別稱取0.14g甲基紅與0.2g溴甲酚綠，溶于200ml95%乙醇，與200g硼酸一同溶于20L水中，備用；水：應符合GB/T6682-1992中三級水的規(guī)格。1.2 分析方法（1）連接好硝化器電源，開始預熱。（2）制備有代表性的樣品，稱取0.2g樣品（精確到0.1mg）放入硝化試管，添加催化劑2g及濃硫酸10ml（同時做空白）。（3）將滌氣裝置接在支架中的硝化管上，接好水抽氣泵，將其開關全部打開。（4）將裝上滌氣裝置的硝化管連同支架放入預熱好的硝化器（設定溫度為420℃），5min后調小抽氣泵，使酸煙恰好吸入滌氣罩頭。（5）繼續(xù)硝化直至全部變?yōu)橥该鞯乃{綠色澄清液體，硝化時間大約2h。（6）硝化完畢后關閉硝化器電源，取出支架和滌氣裝置，冷卻至室溫。（7）連接好8400自動凱氏定氮儀主機電源，檢查水源、各桶中溶液是否達到水平及各個管路是否就位。打開電源開關，待自檢自校完畢，設定好儀器及樣品的各項參數（見表1），先將空白管放入滴液盤進行分析，空白分析結束后依次分析樣品，分析結果（見表2）自動顯示在屏幕上，也可輸出打印結果。（8）取一潔凈空管，選擇清洗功能，清洗管道5分鐘。2 結果與討論2.1 分析結果采用8400自動凱氏定氮法對5家水產飼料企業(yè)提供的5批次魷魚肝粉進行分析，每批次平行分析3次，結果見表2。2.2 討論利用表1中儀器參數，對5批次魷魚肝粉中蛋白質含量進行分析，得出表2中的數據，可以看出，魷魚肝粉中蛋白質含量高，是水產動物的優(yōu)質蛋白源，且該分析方法分析得出的數據平行性好，不僅可以真實地反映出各批次魷魚肝粉中蛋白質的含量，而且可以為水產飼料生產企業(yè)投料配比提供強有力的指導性依據。