MCM5與子宮內膜癌發生發展的關系

摘要：目的：探討MCM5在增殖期子宮內膜、分泌期子宮內膜和子宮內膜樣腺癌組織中的表達和臨床意義。方法：采用免疫組織化學鏈菌素親生物素基因過氧化物酶連接法（SP 法）檢測15例增殖期子宮內膜、15例分泌期子宮內膜和70例子宮內膜樣腺癌標本中MCM5蛋白的表達。結果：子宮內膜癌組織和增殖期宮內膜組織中MCM5蛋白高度表達，而正常分泌期宮內膜組織中低表達或不表達，子宮內膜癌組織和增殖期子宮內膜組織與分泌期宮內膜組織相比MCM5蛋白的表達具有顯著差異（P<0.05），有統計學意義。子宮內膜癌組織和增殖期子宮內膜組織中MCM5蛋白的表達沒有顯著差異（P>0.05）。結論：MCM5蛋白在子宮內膜癌組織中高度表達，在正常增殖期子宮內膜組織中表達也明顯增高。檢測MCM5對子宮內膜癌進行高風險篩選及預后評估有一定意義。

關鍵詞：增殖子宮內膜；子宮內膜樣腺癌；MCM5

【中圖分類號】R71【文獻標識碼】C【文章編號】1002-3763（2014）01-0023-01

子宮內膜癌（endometrial carcinoma，EC）是子宮內膜的惡性上皮性腫瘤，EC是女性生殖道三大惡性腫瘤之一，嚴重危害婦女的健康。雖然其在我國發病率較低，但近10年研究發現有上升趨勢[1]，且呈持續性。然而其發病原因尚不明確，亦無系統早期診斷方法。微小染色體維持蛋白（Minichromosome Maintenance Proteins，MCMs）是一組與DNA復制相關蛋白，其最初發現是在酵母菌中，且有證據證明它們在真核細胞中也存在， MCM5是MCM家族的一員[2]，其在DNA復制起始延伸過程中發揮重要的作用，在靜止期的細胞極少，是一種與增殖密切相關的因子，可以作為反映細胞增殖的一項生物學標記物[3]。本研究采用免疫組化方法對比并觀察MCM5在正常分泌子宮內膜、增殖期子宮內膜和子宮內膜樣腺癌中的表達情況，并為子宮內膜癌惡性程度判斷及預后評估提供新的腫瘤標記物。

1.1 研究對象

本研究收集標本包括子宮內膜癌（EC） 70例，增殖期子宮內膜15例，正常分泌期子宮內膜15例。其中EC按國際婦產科聯盟（FIGO）標準進行臨床分期：Ⅰa期為9例，Ⅰb 期為10例，Ⅱ期為9例，Ⅲa期為10例，Ⅲb 為期6例，Ⅲc 期為17例，Ⅳ期為15例。

1.2 主要制劑和方法

MCM5鼠抗人單克隆抗體、SP 超敏試劑盒、DAB 顯色劑均購自北京中杉公司，具體步驟由技師參照試劑說明進行。

1.3 結果判定

MCM5評分標準：MCM5蛋白以細胞核呈現棕黃色顆粒為陽性細胞，陽性細胞的百分率和細胞的染色強度。百分率：0為0分，1% ～25%為1分，26% ～50%為2分，51%-75%為3分，76% ～100%為4分；染色強度：無色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分；兩者之積，0～3分為陰性（-），>3分為陽性（+），6～8 分為中陽（++）9 ～12分為強陽（+++）。

1.4 統計學分析

統計學處理應用 SPSS 17.0 軟件進行，統計學分析采用Fisher 確切概率法或X2檢驗和Spearman 等級相關分析法。

2.1 不同組織中MCM5基因的表達情況 見表1

3 討論

近些年以來，EC（endometrial carcinoma）的發病率有上升趨勢，這一現象在世界很多國家已有證實。EC的發生、發展過程很復雜，它受很多因素影響。研究證明EC的發生和雌激素增多相關，且常合并有子宮內膜的增生，非典型型增生被認為是EC的癌前病變。單純性增生子宮內膜的癌變率為1%極少發展為癌，復雜性增生子宮內膜的癌變率一般為3%[4]，此二者均較低。但是非典型增生子宮內膜癌變率約為25% -40%[5]，與前二者相比明顯增高。近年來，隨著對不同腫瘤組織蛋白構型的研究越來越深入，促進了分子水平上腫瘤的發生機制的研究進程，且為其提供了重要依據，不僅如此，它還為多種應用機制提供了大量蛋白生物標記物候選指標[6]。在研究真核細胞DNA復制調控的過程中， 發現微小染色體維持蛋白（Minichromosome Maintenance Proteins，MCMs）是一個對于DNA復制的起始非常重要的蛋白家族，這些蛋白的表達可用于檢測細胞增殖周期的全程，但不包括靜息期，也就是說，在絕大多數機體正常組織細胞中MCM蛋白表達缺失，而在腫瘤細胞中卻有大量表達[7]。MCM5蛋白在整個細胞周期中的表達，與其他細胞復制標志物相比有較顯著的特征，而且是細胞生長過程中無數信號途徑聚合的焦點，可以很容易的進入冷凍組織和細胞學制劑，而不需要進行抗原檢測。因此MCM5蛋白與其它標志物相比，是更好的細胞增殖周期標志物[8]，MCM5在子宮內膜增生性病變早期就具有高表達，MCM5基因活化發生在癌變進程中的早期。本研究發現，與正常增殖期子宮內膜和分泌期子宮內膜相比，MCM5蛋白在子宮內膜樣腺癌中的陽性表達率明顯增高，且差異具有顯著性（P <0.05）。隨著子宮內膜樣腺癌分化程度的降低、臨床TMN 分期的增加（肌層浸潤的增加）MCM5陽性表達率有明顯增高。這可能說明腫瘤組織中MCM5蛋白的表達水平明顯增高不僅和細胞數目有關，還可能和單個細胞內蛋白過度表達有關。但子宮內膜組織中MCM5蛋白的表達與月經周期有關，這說明該蛋白在子宮內膜癌中不具有特異性，對該病早期診斷及鑒別并無意義，但對評估患者預后有一定意義。要核實MCM蛋白在子宮內膜癌中的表達意義及機制有待進一步研究。