2014年信陽市政府招標H5N1高致病性禽流感疫苗免疫效果評估報告

孫何云 薛邦玉 劉宏斌 馬超鋒

中圖分類號：S858.312.4 文獻標識碼：B 文章編號：1673-1085（2014）12-0040-03

禽流感是禽流行性感冒（Avian influenza，AI）的簡稱。是由正粘病毒科流感病毒屬A型禽流行性感冒病毒引起的一種禽類（家禽和野禽）傳染病。禽流感病毒感染后可以表現為輕度的呼吸道癥狀、消化道癥狀，死亡率較低；或表現為較嚴重的全身性、出血性、敗血性癥狀，死亡率較高。AIV根據其對家禽致病力的不同分為3種，即高致病性、低致病性和無致病性。其中，高致病性禽流感病毒可以直接感染人類，并造成死亡。高致病性禽流感是由H5和H7亞毒株（以H5N1和H7N7為代表）引起的疾病。高致病性禽流感因其在禽類中傳播快、危害大、病死率高，被世界動物衛生組織列為A類動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。現階段，預防禽流感病毒感染主要依靠H5N1亞型禽流感滅活疫苗免疫。我國從2004年開始對高致病性禽流感實行強制免疫。信陽市政府招標的禽流感疫苗有H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4+Re-6）和H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）兩種，為了解這兩種禽流感疫苗免疫效果，信陽市動物疫病預防控制中心組織相關人員歷時3個月，對信陽地區高致病性禽流感防疫狀況進行了深入的調查分析，掌握了信陽市禽流感免疫狀況的第一手資料，以期為信陽市的重大動物疫病防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品采集 2014年3月～2014年6月， 各縣區動物疫病預防控制中心從信陽地區七縣兩區規模養殖場及散養戶，選取健康家禽，共采集血液樣品3653份，通過翅靜脈無菌采集全血2～3ml，冷藏條件下送達實驗室。

1.1.2 樣品的制備 將采集的血液樣品于3500r/min條件下離心10min，取上清液于1.5ml滅菌離心管中，-20℃保存備用待檢。

1.1.3 檢測試劑盒及儀器設備

1.1.3.1 檢測試劑盒 禽流感H5亞型（Re-4株）（批號：2013005）、（Re-6株）（批號：2013006）血凝抑制試驗診斷抗原和禽流感H5亞型（Re-4株）陰、陽性血清（批號：2013004）及禽流感H5亞型（Re-6株）陰、陽性血清（批號：2013004），購自哈爾濱維科生物技術開發公司。

1.1.3.2 1%雞紅細胞懸液 采集2～3只無禽流感和新城疫等抗體的健康公雞自行配制。

1.1.3.3 儀器設備 LC-800低速離心機（科大創新股份有限公司中佳分公司）；Eppendorf 10～1000μl單道移液器及25～300μl多道移液器（德國Eppendorf公司）；303系列電熱恒溫培養箱（上海樹立儀器儀表有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 禽流感抗體檢測采用血凝抑制試驗（HI），按照國家標準GB/18936-2003進行。

血凝試驗抗體檢測方法判定標準：以完全抑制4單位抗原的最高血清稀釋倍數判為該血清的HI效價。當陽性對照血清的HI效價與已知效價誤差不超過1個滴度，陰性對照血清的HI效價不高于2log2時，試驗方可成立。被檢血清HI效價≤3log2判為陰性；=判為4log2可疑（可疑樣品應重檢，重檢效價≥4log2判為陽性，≤3log2判為陰性）；≥5log2判為陽性。

1.2.2 群體免疫抗體陽性率達到70%判定為群體合格。

1.2.3 疫苗使用情況調查采取現場調查和問卷調查相結合的方式，根據各縣區疫苗調撥使用情況，對2014年上半年政府招標采購每個中標疫苗生產企業的每種疫苗開展了臨床免疫安全性調查。主要調查疫苗免疫注射后3d內發生副反應，包括應激反應、應激發病、應激死亡、應激流產等。

2 結果

2.1 信陽市H5N1高致病性禽流感滅活疫苗使用情況調查 見表1、表2、表3。

2.2 高致病性禽流感疫苗應用效果調查結果 2014年上半年全市共調查免疫雞只500631只，雞群免疫后3d內出現應激反應的雞只70只，應激反應率為1.40；應激發病雞只數0只；應激死亡0只。詳見表4。

2014年上半年全市共調查免疫水禽89452只，群體免疫后3d內出現應激反應的水禽15只，應激反應率為1.68；應激發病水禽數0只；應激死亡0只。詳見表5。

3 分析

3.1 雞H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4+Re-6）檢測情況分析 從圖1可以看到，各縣區禽流感抗體合格率均在70%以上，符合國家的群體合格率標準。H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4）抗體，息縣、潢川、淮濱、浉河、新縣抗體合格率均為100%，平橋為83.33%，其余縣區均在90%以上；H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）抗體息縣、潢川、淮濱、新縣抗體合格率為100%，平橋為86.66%，其余縣區均在90%以上。

從圖2可以看到，檢測的各個疫苗廠家禽流感抗體合格率均在70%以上，符合國家的群體合格率標準。

3.2 水禽H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）檢測情況分析 水禽H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）我市檢測了遼寧益康和乾元浩兩個廠家，抗體合格率分別為80%和92%，均在70%以上，免疫效果良好，特別是乾元浩達到90%以上。

3.3 H5N1高致病性禽流感滅活疫苗免疫的有效性 蛋雞是我市雞群中禽流感疫苗主要的受免對象。從表4看到，我市政府采購的幾個疫苗生產企業生產的疫苗注射蛋雞后安全性較好，應激發病、死亡均較少出現。調查中雞群出現應激反應率1.40。像哈維科、哈藥集團、乾元浩的禽流感疫苗注射后的副反應率幾乎為零，蛋雞的產蛋性能受影響較小，在產蛋高峰期之前和之后注射，蛋雞的產蛋率出現短時期的下降，下降3%左右，一星期后能回到產蛋高峰期。

疫苗免疫后有效性好，保護率較高，未出現臨床發病的情況，疫苗保護力較強，保護效果良好。

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