云南不同煙區紅花大金元煙葉中多酚含量的差異性研究

吳德喜　何潔　向麗紅　王超　吳文斗　楊應明　李凡

摘要[目的]了解云南部分煙區種植的煙葉多酚含量及其差異。[方法]通過高效液相色譜定量分析法，對來源于昆明1區（石林縣、宜良縣）、大理、紅河、昆明2區（晉寧縣、安寧市、嵩明縣）4個煙區的紅花大金元（紅大）上部煙葉和中部煙葉的綠原酸、蕓香苷、咖啡酸和莨菪亭4種多酚類物質進行測定，并對不同部位、不同來源的煙葉多酚含量進行差異性分析。[結果]試驗表明，不同煙區的紅花大金元煙葉多酚含量差異較大，4個受檢煙區中上部煙葉多酚含量從高到低依次是大理（38.21 mg/kg）、昆明1區（30.19 mg/kg）、昆明2區（29.07 mg/kg）和紅河（26.98 mg/kg），極差達35.63%；不同部位的紅花大金元煙葉多酚含量差異也較大，綠原酸在上部煙葉（B2F）的含量高出中部煙葉（C3F）12.22%～52.34%（平均33.31%），蕓香苷高出21.10%～55.03%（平均39.12%），多酚物質總計高出27.62%～39.14%（平均34.17%）；紅花大金元中上部煙葉中綠原酸和蕓香苷2種主要多酚物質占多酚總量的61%和37%左右，其余多酚約為2%左右。紅花大金元煙葉的多酚含量在不同栽培地區、不同部位上差異明顯，氣候冷涼、晝夜溫差大的煙區（大理）明顯高于氣候溫暖的煙區（紅河），而氣候條件居中的昆明的煙葉多酚含量也居中；同時，上部的煙葉多酚含量高于中部的煙葉。[結論]研究可為紅花大金元品種栽培區劃及卷煙工業提供參考。

關鍵詞煙草；多酚化合物；紅花大金元

中圖分類號S572文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）22-07561-02

多酚類化合物在煙草的生長發育、調制特性、煙葉色澤、等級、煙氣香吃味和煙氣生理強度等方面起著重要作用，是衡量煙草品質的一個重要因素[1]。測定煙葉中的多酚含量對于了解煙葉香氣質量和指導卷煙配方具有重要意義。煙草中多酚主要有單寧類（綠原酸）、香豆素類（莨菪靈、莨菪亭）和黃酮類（蕓香苷、山萘酚糖苷）等，其中綠原酸和蕓香苷的含量較高，二者含量就基本上可以反映卷煙中多酚的總量[2-5]。為了解不同煙區種植的煙葉多酚含量的情況，筆者對具有清香風格的云南特色烤煙品種紅花大金元進行煙葉主要多酚物質含量測定，比較其差異性。

1材料與方法

1.1樣品來源檢測煙葉樣品為2009年產自昆明1區（石林縣和宜良林的混打復烤煙葉）、大理、紅河、昆明2區（晉寧林、安寧市和嵩明林的混打復烤煙葉）不同煙區的紅大上部煙葉（B2F級）和中部煙葉（C3F級）。檢測指標包括綠原酸、蕓香苷、咖啡酸和莨菪亭4種多酚類物質。不同煙區煙葉采樣按照工業要求，分別對不同煙區B2F級、C3F級煙葉各采樣10個，最后每個煙區制成5個B2F混合樣、5個C3F混合樣送檢。

1.2檢測方法 根據煙草行業標準YC/T 202-2006，用 50%甲醇水溶液萃取煙草和煙草制品中的多酚類化合物，萃取液經0.45 μm濾膜過濾后，通過高效液相色譜定量分析檢測其中多酚類化合物的含量。

1.2.1樣品處理。 稱取0.100 0 g煙末樣品，加入30 ml 80%的甲醇和4 ml 6 mol/L的鹽酸溶液，在35 ℃水浴中超聲提取15 min，取出上層清液；對剩余部分重復以上操作。過濾去除殘渣，合并2次提取液，在37 ℃水浴中旋轉蒸發、濃縮，用甲醇定容至25 ml，0.45 μm濾膜過濾，備用。

1.2.2樣品檢測。煙葉樣品多酚類物質的測定參照谷勛剛等的方法[6]，用美國WATERS 2695高效液相色譜儀進行HPLC分析。色譜柱：Waters XterraTM RP18（1.0×50 mm，2.5 μm）；流動相A：水∶甲醇∶乙酸=88∶10∶2（體積分數），流動相B：水∶甲醇∶乙酸=10∶88∶2（體積分數）；柱溫：30 ℃；梯度：0 min時A為100%，16.5 min時A為80%，B為20%，30 min時A為20%，B為80%；檢測波長為340 nm，參比波長為480 nm。

1.3數據分析根據文獻報道，不同部位煙葉中多酚含量有較大差異，同一類型煙葉中，上部葉中多酚含量最高，中部葉次之，下部葉最低[7-8]。該研究對不同煙區煙葉按照上部（B2F）、中部（C3F）煙葉分別求平均值進行差異性比較。數據處理采用Excel 2003，統計分析采用SPPSS 19.0軟件。